研究背景:心力衰竭(HF)幾乎是所有心臟疾病的終末階段,其發(fā)病率、死亡率逐年攀升,給人類造成了極大的經(jīng)濟負擔和生活壓力,因此及時準確識別慢性心力衰竭患者是至關重要的。心肌營養(yǎng)因子-1(CT-1)是白細胞介素-6超家族的成員,是一種可以引起心肌細胞肥大和功能障礙的細胞因子,大量研究表明血漿CT-1可作為心力衰竭診斷、分期和預后評估的心臟生物標志物。然而,目前仍然缺乏較為高效的檢測方法,難以實現(xiàn)對CT-1的快速、簡易定量檢測,極大的限制了心肌營養(yǎng)因子-1作為診斷標志物的臨床研究進程。方法:本研究建立了一種基于微米磁顆粒及生物素-親和素系統(tǒng)的CT-1化學發(fā)光免疫定量檢測方法(MPs-CLIA),能夠快速、靈敏檢測血漿CT-1的含量。1.血漿心肌營養(yǎng)因子-1化學發(fā)光免疫定量檢測方法學的建立及優(yōu)化:制備生物素標記兔抗人CT-1多克隆抗體(bio-Ab)及吖啶酯標記兔抗人CT-1多克隆抗體(AE-Ab)。對血漿心肌營養(yǎng)因子-1化學發(fā)光免疫定量檢測方法學進行優(yōu)化:優(yōu)化生物素標記抗人游離CT-1多克隆抗體(bio-Ab)及吖啶酯標記抗人游離CT-1多克隆抗體(AE-Ab)的濃度。優(yōu)化抗原抗體反應時間、免...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖3-1AE-anti-CT-1檢測抗體和bio-anti-CT-1捕獲抗體濃度與RLU關系

浙江大學碩士學位論文正文結果與討論163結果與討論3.1MPs-CLIA實驗條件的優(yōu)化3.1.1AE-anti-CT-1檢測抗體和bio-anti-CT-1捕獲抗體濃度的優(yōu)化我們制備一系列抗體對的濃度梯度，分別為0.1μg/ml、0.2μg/ml、0.4μg/ml、0.8μg/m....

圖3-2MPs-SA濃度與RLU關系

浙江大學碩士學位論文正文結果與討論173.1.2確定親和素包被磁珠（MPs-SA）濃度本研究分別選取0.14μg/μL,0.28μg/μL,0.43μg/μL,0.72μg/μLand0.86μg/μL磁珠濃度進行優(yōu)化。經(jīng)過實驗，圖3-2所示，磁珠濃度為0.72μg/μL，50μ....

圖3-3免疫孵育時間與RLU的關系

浙江大學碩士學位論文正文結果與討論18圖3-3免疫孵育時間與RLU的關系3.1.4MPs-SA捕獲時間的優(yōu)化MPs-SA的捕獲時間也對抗原抗體反應起到一定影響。本研究選取5分鐘、10分鐘、15分鐘、30分鐘、45分鐘、60分鐘進行優(yōu)化。圖3-4所示，加磁珠后，孵育15min，信號....

圖3-4MPs-SA捕獲時間與RLU的關系

浙江大學碩士學位論文正文結果與討論18圖3-3免疫孵育時間與RLU的關系3.1.4MPs-SA捕獲時間的優(yōu)化MPs-SA的捕獲時間也對抗原抗體反應起到一定影響。本研究選取5分鐘、10分鐘、15分鐘、30分鐘、45分鐘、60分鐘進行優(yōu)化。圖3-4所示，加磁珠后，孵育15min，信號....

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