血糖異常對心肌梗死大鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)心肌細胞凋亡的作用和機制研究
發(fā)布時間:2021-12-31 23:54
目的:觀察血糖異常下急性心肌梗死(acute myocardial infarction, AM I)大鼠心肌組織形態(tài)學(xué)變化及血糖異常是否會加重AMI大鼠心肌組織的凋亡程度,確定血糖異常加重AMI大鼠心肌組織凋亡程度是否通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress, ERS)途徑介導(dǎo)的,并進一步探討高、低血糖AMI大鼠ERS介導(dǎo)心肌細胞凋亡的具體途徑,進而為研發(fā)與應(yīng)用阻斷ERS藥物提供證據(jù)。方法:1.以SPF級健康雄性Wistar大鼠為研究對象,依據(jù)隨機原則將動物分成6組,分別為低血糖假手術(shù)組(SL,n=13)、正常血糖假手術(shù)組(SN,n=13)、高血糖假手術(shù)組(SH,n=13),低血糖AMI組(ML,n=13)、正常血糖AMI組(MN,n=13)和高血糖AMI組(MH,n=13)。采用注射胰島素5U/kg或25%葡萄糖1.5g/kg,同時結(jié)扎左冠狀動脈前降支的方法建立大鼠低、高血糖兼AMI模型,假手術(shù)組只穿線不結(jié)扎。2.采用血糖儀檢測法和心電圖(electrocardiogram, ECG)評價動物模型。3.采用HE染色法觀察血糖異常下AMI大鼠心肌組織的...
【文章來源】:蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:53 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
第一章 引言
第二章 實驗方法
2.1 實驗材料
2.1.1 實驗動物
2.1.2 主要儀器設(shè)備
2.2 實驗試劑
2.3 主要溶液及試劑的配制
2.3.1 2%戊巴比妥鈉溶液的配制
2.3.2 4%中性多聚甲醛固定液的配制
2.3.3 SDS-聚丙烯酰胺凝膠的配制
2.3.4 30%丙烯酰胺的配制
2.3.5 10%過硫酸銨的配制
2.3.6 10%SDS的配制
2.3.7 電泳緩沖液的配制
2.3.8 電轉(zhuǎn)緩沖液的配制
2.3.9 TBST溶液的配制
2.3.10 顯影液的配制
2.3.11 定影液的配制
2.4 實驗方法
2.4.1 實驗動物分組
2.4.2 動物模型制備
2.4.3 標本采集
2.4.4 HE染色
2.4.5 TUNEL凋亡檢測
2.4.6 免疫組化染色
2.4.7 real time-PCR分析
2.4.8 Western Blot檢測
2.5 統(tǒng)計學(xué)處理
第三章 實驗結(jié)果
3.1 動物模型的評價
3.2 HE染色對不同血糖水平AMI大鼠心肌組織形態(tài)學(xué)的分析
3.3 TUNEL染色對不同血糖水平AMI大鼠心肌細胞凋亡的分析
3.4 不同血糖水平AMI大鼠ERS標志蛋白GRP78 MRNA及蛋白的表達
3.5 不同血糖水平AMI大鼠ERS應(yīng)激感受蛋白ATF-6、IRE-1及PERK MRNA及蛋白的表達
3.5.1 ATF6的表達
3.5.2 IRE-1的表達
3.5.3 PERK的表達
3.6 不同血糖水平AMI大鼠ERS下游凋亡信號分子CASPASE 12、CHOP MRNA及蛋白的表達
3.6.1 Caspase 12的表達
3.6.2 CHOP的表達
第四章 討論
4.1 動物模型的評價
4.2 血糖異常AMI大鼠心肌組織病變程度增加
4.3 血糖異常AMI大鼠心肌細胞凋亡程度增加
4.4 血糖異常通過ERS介導(dǎo)AMI大鼠心肌細胞的凋亡:高、低血糖分別通過IRE-1,IRE-1和ATF6途徑激活CHOP促進心肌細胞的凋亡
第五章 結(jié)論
參考文獻
在學(xué)期間的研究成果
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與血管內(nèi)皮細胞凋亡的研究進展[J]. 邱志凌,張軍平,郭曉辰. 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報. 2014(01)
[2]5-HT1B受體增強野百合堿誘導(dǎo)的肺性高血壓大鼠的肺血管對5-HT收縮反應(yīng)(英文)[J]. 王懷良,董旭,章新華,邢軍. Acta Pharmacologica Sinica. 2001(03)
本文編號:3561227
【文章來源】:蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:53 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
第一章 引言
第二章 實驗方法
2.1 實驗材料
2.1.1 實驗動物
2.1.2 主要儀器設(shè)備
2.2 實驗試劑
2.3 主要溶液及試劑的配制
2.3.1 2%戊巴比妥鈉溶液的配制
2.3.2 4%中性多聚甲醛固定液的配制
2.3.3 SDS-聚丙烯酰胺凝膠的配制
2.3.4 30%丙烯酰胺的配制
2.3.5 10%過硫酸銨的配制
2.3.6 10%SDS的配制
2.3.7 電泳緩沖液的配制
2.3.8 電轉(zhuǎn)緩沖液的配制
2.3.9 TBST溶液的配制
2.3.10 顯影液的配制
2.3.11 定影液的配制
2.4 實驗方法
2.4.1 實驗動物分組
2.4.2 動物模型制備
2.4.3 標本采集
2.4.4 HE染色
2.4.5 TUNEL凋亡檢測
2.4.6 免疫組化染色
2.4.7 real time-PCR分析
2.4.8 Western Blot檢測
2.5 統(tǒng)計學(xué)處理
第三章 實驗結(jié)果
3.1 動物模型的評價
3.2 HE染色對不同血糖水平AMI大鼠心肌組織形態(tài)學(xué)的分析
3.3 TUNEL染色對不同血糖水平AMI大鼠心肌細胞凋亡的分析
3.4 不同血糖水平AMI大鼠ERS標志蛋白GRP78 MRNA及蛋白的表達
3.5 不同血糖水平AMI大鼠ERS應(yīng)激感受蛋白ATF-6、IRE-1及PERK MRNA及蛋白的表達
3.5.1 ATF6的表達
3.5.2 IRE-1的表達
3.5.3 PERK的表達
3.6 不同血糖水平AMI大鼠ERS下游凋亡信號分子CASPASE 12、CHOP MRNA及蛋白的表達
3.6.1 Caspase 12的表達
3.6.2 CHOP的表達
第四章 討論
4.1 動物模型的評價
4.2 血糖異常AMI大鼠心肌組織病變程度增加
4.3 血糖異常AMI大鼠心肌細胞凋亡程度增加
4.4 血糖異常通過ERS介導(dǎo)AMI大鼠心肌細胞的凋亡:高、低血糖分別通過IRE-1,IRE-1和ATF6途徑激活CHOP促進心肌細胞的凋亡
第五章 結(jié)論
參考文獻
在學(xué)期間的研究成果
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與血管內(nèi)皮細胞凋亡的研究進展[J]. 邱志凌,張軍平,郭曉辰. 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報. 2014(01)
[2]5-HT1B受體增強野百合堿誘導(dǎo)的肺性高血壓大鼠的肺血管對5-HT收縮反應(yīng)(英文)[J]. 王懷良,董旭,章新華,邢軍. Acta Pharmacologica Sinica. 2001(03)
本文編號:3561227
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