第一部分ICR小鼠腎臟晝夜節(jié)律的表達目的：本部分實驗通過對小鼠進行黑箱干預后，觀察晝夜節(jié)律基因Bmal1、Clock、隱色素基因Cry1-2、周期基因Per1-2及鐘控基因DBP、Rev-erbα和Rev-erbβ在小鼠腎臟中的表達情況，探討ICR小鼠腎臟組織晝夜節(jié)律的存在。方法：1、制作通氣性良好的黑箱子，采用遮光布嚴格避光；2、選擇24只出生3個月左右的ICR小鼠，稱量小鼠的體重，盡可能要求實驗鼠體重相近，大小相差不超過3g，放入黑箱中給予足夠飲食和水分，小鼠在黑箱中生活72小時后，每間隔4個小時隨機取出2只小鼠，脫頸處死后取腎臟組織放入液氮中保存；3、提取mRNA，將mRNA定量取3ug逆轉(zhuǎn)錄稀釋至300ul，用普通PCR檢測目的基因是否表達，用RT-PCR檢測Clock、Bmal1、Cry1、Cry2、Per1、Per2和Dbp等晝夜節(jié)律基因的具體表達情況；4、收集并整理經(jīng)上述處理得到的數(shù)據(jù)，使用GraphPad統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行繪圖及分析。結(jié)果：以β-action作為內(nèi)參基因，可以觀察到Bmal1、Cry1、Cry2、DBP、Rev-erbα、Rev-erb β、Per1隨著... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學福建省

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

組小鼠標本與9個引物定量PCR結(jié)果;

圖2 12組小鼠標本與9個引物定量PCR結(jié)果圖2說明：以上分別代表本實驗12份標本與引物clock、Bmal1、Cry1、Cry2、Per1、Per2、DBP、Rev-erbα、Rev-erbβ做RT-PCR得出的擴增數(shù)計算出的RQ值，每份標本分別是0、4、8、12……44小時的標本。由以上可知，小鼠腎臟組織中晝夜節(jié)律基因Bmal1、Cry1、Cry2、DBP、Per1、Rev-erbα、 Rev-erbβ呈現(xiàn)晝夜節(jié)律變化，其周期大約為24小時，Per2基因的表達未見明顯晝夜節(jié)律振蕩，而Clock表達量在呈現(xiàn)一個波峰之后并未規(guī)律的出現(xiàn)第二個波峰。

慢性午高輕微病變性腎功能不高于下午，M 1變患者上午、不全病人上午可能與患者2結(jié)下午尿蛋午與下午未者腎小球濾3果蛋白排泄量呈未見明顯差異濾過率嚴重下4呈現(xiàn)出不同異，而尿毒癥下降相關(guān)。5同的趨勢，癥患者節(jié)6


本文編號：3491731