目的：體外分離培養(yǎng)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（human umbilical cord-MSCs，hUC-MSCs），并制備攜帶siRNA-apelin、apelin標(biāo)記基因的慢病毒載體轉(zhuǎn)染的hUC-MSCs。方法：組織塊貼壁培養(yǎng)法培養(yǎng)hUC-MSCs，流式細(xì)胞儀測(cè)定hUC-MSCs表面免疫標(biāo)記、成骨、成脂細(xì)胞誘導(dǎo)分化；將構(gòu)建的apelin-siRNA、apelin基因慢病毒載體轉(zhuǎn)染P3代hUC-MSCs，實(shí)驗(yàn)分為干擾組、空白組和過表達(dá)組。轉(zhuǎn)染后第4天采用RT-PCR（real time-photo conductive relay，RT-PCR）、western-blot方法檢測(cè)靶基因apelin的抑制、過表達(dá)效果。結(jié)果：流式細(xì)胞儀鑒定結(jié)果表明：hUC-MSCs表達(dá)CD44、CD90、CD105、CD73、HLA-ABC，不表達(dá)CD34、CD45、HLA-DR；組織化學(xué)染色顯示茜素紅、油紅染色陽性。RT-PCR檢測(cè)示空白組apelin mRNA的表達(dá)是干擾組的16.60±2.30倍；過表達(dá)組apelin mRNA的表達(dá)是空白組的1.59±0.10倍。western-blot顯示：過表達(dá)組的細(xì)... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞表
中文摘要
Abstract
前言
    參考文獻(xiàn)
第一部分 攜帶 siRNA-apelin、apelin 基因的慢病毒載體轉(zhuǎn)染人臍帶華通膠間充質(zhì)干細(xì)胞
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 結(jié)果
    4討論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 apelin對(duì)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化的影響
    1 材料和方法
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4 討論
    參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]慢病毒載體介導(dǎo)apelin基因轉(zhuǎn)染人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 王力,張寧坤,徐小紅,鄭楠,高連如,朱智明.  天津醫(yī)藥. 2013(12)
[2]Apelin-13對(duì)5-Aza誘導(dǎo)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化的影響[J]. 徐小紅,王力,張寧坤,鄭楠,高連如,朱智明.  解放軍醫(yī)學(xué)雜志. 2013(10)
[3]基于miR30骨架的HPSE-shRNA慢病毒載體的構(gòu)建及其效應(yīng)研究[J]. 劉曉艷,方紅,朱定仙,張妤.  浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2013(01)
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[5]力學(xué)拉伸對(duì)經(jīng)5-氮胞苷誘導(dǎo)的間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化的影響[J]. 郭勇,張西正,李瑞欣,張春秋,郭春,張彥軍,閆玉仙.  醫(yī)用生物力學(xué). 2009(S1)
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本文編號(hào)：3429894