發(fā)布時間：2021-09-17 03:56

　　【目的】研究細胞因子與肺癌患者并發(fā)慢性病貧血（Anemia of chronic disease,ACD）的關系,進一步通過研究GDF15等多種細胞因子對hepcidin m RNA表達的影響,探討肺癌患者ACD的發(fā)病機制。【內容】采用ELISA方法檢測肺癌不伴貧血與伴ACD、以及經治療貧血改善后細胞因子變化;利用RT-q PCR檢測EPO、TNF-а、IFN-а、IL-6及GDF15干預后對Hep G2細胞hepcidin m RNA表達的影響,在基因水平上研究這些因子與hepcidin的關系,探討細胞胞因子與肺癌患者ACD的關系�！痉椒ā�1.對照組及實驗組血清樣本的采集與保存。2.肺癌不伴貧血與伴ACD、及伴ACD患者經EPO聯(lián)合鐵劑治療后,血清細胞因子水平檢測。3.細胞因子干預下Hep G2細胞的培養(yǎng)。4.總RNA的提取、逆轉錄。5.RT-q PCR檢測各組Hep G2細胞hepcidin m RNA表達情況�！窘Y果】1.1肺癌不伴貧血組EPO的x±s為9.7713±1.8365 m IU/ml;伴ACD組EPO的x±s為11.1427±2.4196 m IU/ml;兩組間P=0... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學天津市 211工程院校

【文章頁數】：97 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

A培養(yǎng)中的HepG2細胞（×100）

B培養(yǎng)中的HepG2細胞（×200）

圖 2.1C 培養(yǎng)中的 HepG2 細胞（×400）2.1.3.2 細胞因子干預下 HepG2 細胞的培養(yǎng)及細胞保存（1）細胞因子干預的實驗設計1） 細胞因子種類、稀釋方法及保存：① 細胞因子種類：rh EPO、rhTNF-а、rhIFN-а、rhIL-6 及 rhGDF-15。② 稀釋方法及保存：稀釋前將 rh EPO、rhTNF-а、rhIFN-а、rhIL-6 及rhGDF-15 因子凍干粉放入離心機內，以 4000 轉/分鐘離心 30 秒鐘，使細胞因子凍干粉末沉到管底。用已加 10%的胎牛血清的 DMEM（低糖）培養(yǎng)液先行稀釋成濃度為 100ng/μl 濃度，然后用 0.2ml 無菌離心管以 5μl～10μl/每管分裝，-20℃凍存。臨用時再用上述培養(yǎng)液進一步稀釋成 10ng/μl 的工作液，避免反復凍存。2）細胞因子干預時間、濃度設計按照貼壁細胞覆蓋培養(yǎng)瓶/板底約 70-80%面積時，細胞增殖處于最佳對數增殖期，此時施加干預效果較佳。依據增殖狀態(tài)良好的 HepG2 的傳代時間介于24～48 小時特點，當 HepG2 細胞貼壁覆蓋培養(yǎng)瓶/板底約 70-80%面積這一最佳


本文編號：3397918