【目的】研究細(xì)胞因子與肺癌患者并發(fā)慢性病貧血（Anemia of chronic disease,ACD）的關(guān)系,進(jìn)一步通過(guò)研究GDF15等多種細(xì)胞因子對(duì)hepcidin m RNA表達(dá)的影響,探討肺癌患者ACD的發(fā)病機(jī)制。【內(nèi)容】采用ELISA方法檢測(cè)肺癌不伴貧血與伴ACD、以及經(jīng)治療貧血改善后細(xì)胞因子變化;利用RT-q PCR檢測(cè)EPO、TNF-а、IFN-а、IL-6及GDF15干預(yù)后對(duì)Hep G2細(xì)胞hepcidin m RNA表達(dá)的影響,在基因水平上研究這些因子與hepcidin的關(guān)系,探討細(xì)胞胞因子與肺癌患者ACD的關(guān)系�！痉椒ā�1.對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組血清樣本的采集與保存。2.肺癌不伴貧血與伴ACD、及伴ACD患者經(jīng)EPO聯(lián)合鐵劑治療后,血清細(xì)胞因子水平檢測(cè)。3.細(xì)胞因子干預(yù)下Hep G2細(xì)胞的培養(yǎng)。4.總RNA的提取、逆轉(zhuǎn)錄。5.RT-q PCR檢測(cè)各組Hep G2細(xì)胞hepcidin m RNA表達(dá)情況�！窘Y(jié)果】1.1肺癌不伴貧血組EPO的x±s為9.7713±1.8365 m IU/ml;伴ACD組EPO的x±s為11.1427±2.4196 m IU/ml;兩組間P=0... 

【文章來(lái)源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：97 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

A培養(yǎng)中的HepG2細(xì)胞（×100）

B培養(yǎng)中的HepG2細(xì)胞（×200）

圖 2.1C 培養(yǎng)中的 HepG2 細(xì)胞（×400）2.1.3.2 細(xì)胞因子干預(yù)下 HepG2 細(xì)胞的培養(yǎng)及細(xì)胞保存（1）細(xì)胞因子干預(yù)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1） 細(xì)胞因子種類、稀釋方法及保存：① 細(xì)胞因子種類：rh EPO、rhTNF-а、rhIFN-а、rhIL-6 及 rhGDF-15。② 稀釋方法及保存：稀釋前將 rh EPO、rhTNF-а、rhIFN-а、rhIL-6 及rhGDF-15 因子凍干粉放入離心機(jī)內(nèi)，以 4000 轉(zhuǎn)/分鐘離心 30 秒鐘，使細(xì)胞因子凍干粉末沉到管底。用已加 10%的胎牛血清的 DMEM（低糖）培養(yǎng)液先行稀釋成濃度為 100ng/μl 濃度，然后用 0.2ml 無(wú)菌離心管以 5μl～10μl/每管分裝，-20℃凍存。臨用時(shí)再用上述培養(yǎng)液進(jìn)一步稀釋成 10ng/μl 的工作液，避免反復(fù)凍存。2）細(xì)胞因子干預(yù)時(shí)間、濃度設(shè)計(jì)按照貼壁細(xì)胞覆蓋培養(yǎng)瓶/板底約 70-80%面積時(shí)，細(xì)胞增殖處于最佳對(duì)數(shù)增殖期，此時(shí)施加干預(yù)效果較佳。依據(jù)增殖狀態(tài)良好的 HepG2 的傳代時(shí)間介于24～48 小時(shí)特點(diǎn)，當(dāng) HepG2 細(xì)胞貼壁覆蓋培養(yǎng)瓶/板底約 70-80%面積這一最佳


本文編號(hào)：3397918