目的:血管內(nèi)皮細(xì)胞的自噬在抑制炎癥和動脈粥樣硬化的發(fā)展中具有保護作用,mi R-155調(diào)節(jié)動脈粥樣硬化自噬尚未完全闡明。在這篇文章中,我們研究miR-155對血管內(nèi)皮細(xì)胞自噬的調(diào)節(jié)機制,探索miRNA-155與PI3K/Akt/mTOR信號通路中的靶向關(guān)系。方法:采用氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）刺激的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞模型模擬動脈粥樣硬化。在臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中轉(zhuǎn)染mi R-155 mimics、miR-155 inhibitor和陰性對照以改變mi R-155的表達。我們分別使用透射電子顯微鏡（TEM）、激光掃描共聚焦顯微鏡、Western-bolt分析自噬的表達水平。通過qRT-PCR和Western-blot檢測PI3K、Akt、P70s6k、p-PI3K、p-Akt、p-P70s6k和Rheb的mRNA和蛋白的表達水平,充分評估m(xù)iR-155和PI3K/Akt/mTOR信號通路之間的關(guān)系。通過生物信息學(xué)分析預(yù)測miR-155的靶基因,并通過雙熒光素酶報告基因?qū)嶒炦M行證實。結(jié)果:電子顯微鏡、共聚焦顯微鏡和Western-blot分析結(jié)果顯示,過表達miR-155能夠顯著促進臍靜脈內(nèi)皮... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

過表達miR-155誘導(dǎo)自噬

圖 2：共聚焦顯微鏡圖像顯示內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)源性 LC3 斑點表達(綠色)。細(xì)胞核用 DAPI (藍(lán)色)標(biāo)記�？潭葪l，10 μm。圖 3：用 ox-LDL 處理的內(nèi)皮細(xì)胞中 LC3 的表達 wester-blot 分析圖像。采用 GAPDH 作為內(nèi)參。A 為條帶，B 為 LC3 - II / LC3 - I 比率的量化， ( n = 3 ) * P < 0.05。

37圖 3：用 ox-LDL 處理的內(nèi)皮細(xì)胞中 LC3 的表達 wester-blot 分析圖像。采用 GAPDH 作為內(nèi)參。A 為條帶，B 為 LC3 - II / LC3 - I 比率的量化， ( n = 3 ) * P < 0.05。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]參芪復(fù)方調(diào)控GK大鼠大血管病變PTEN/PI3K通路的實驗研究[J]. 劉椏,謝春光,陳敏,莊燦,高泓.  中國中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2010(06)

碩士論文
[1]白藜蘆醇對受到氧化應(yīng)激H9c2心肌細(xì)胞的保護作用及其與自噬關(guān)系的研究[D]. 呂小翠.浙江大學(xué) 2012



本文編號：3341999