目的:三磷酸腺苷結合盒轉運體A1（ABCA1）作為介導細胞內游離膽固醇（FC）和磷脂流出至貧脂的載脂蛋白（apoA-I）接受體的關鍵轉運蛋白,對減少細胞內膽固醇蓄積和抑制泡沫細胞形成具有重要意義。巨噬細胞活化脂肽-2（MALP-2）是從發(fā)酵支原體細胞壁上提取的一種脂多肽,能特異性識別靶細胞膜上的Toll樣受體（TLRs）,與動脈粥樣硬化（As）形成密切相關,但MALP-2是否能調控ABCA1表達仍不清楚。本研究旨在闡明MALP-2對THP-1巨噬細胞ABCA1表達的影響及相關機制。方法:培養(yǎng)THP-1單核細胞,依次加入佛波酯（PMA）、氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）孵育,使其最終分化為THP-1巨噬細胞源性泡沫細胞,經不同濃度的MALP-2（0、25、50、100、200 mM）處理細胞24 h或以100 mM MALP-2處理細胞不同時間（0、6、12、24、48 h）后,行油紅O染色觀察細胞蓄脂情況,高效液相色譜法（HPLC）檢測細胞內總膽固醇（TC）、FC及膽固醇酯（CE）含量,液體閃爍計數法分析細胞內膽固醇流出,熒光實時定量PCR、Western blot分別測定ABCA1 ... 

【文章來源】：南華大學湖南省

【文章頁數】：67 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要英文縮略語索引
第1章 引言
第2章 實驗材料
    2.1 主要試劑與抗體
    2.2 主要儀器與設備
第3章 實驗方法
    3.1 THP-1 細胞培養(yǎng)與處理
    3.2 ox-LDL的制備與鑒定
    3.3 油紅O染色觀察細胞脂滴
    3.4 高效液相色譜法檢測細胞內總膽固醇（total cholesterol, TC）、FC、膽固醇酯（cholesterol ester, CE）含量
    3.5 液體閃爍計數法檢測細胞內膽固醇流出
    3.6 小干擾RNA（small interfering RNA, siRNA）轉染細胞
    3.7 細胞總RNA提取和熒光實時定量PCR
    3.8 細胞總蛋白提取
    3.9 細胞核蛋白提取
    3.10 Western blot
    3.11 統(tǒng)計學分析
第4章 實驗結果
    4.1 MALP-2促進THP-1巨噬細胞內膽固醇蓄積
    4.2 MALP-2減少THP-1巨噬細胞膽固醇流出
    4.3 MALP-2下調THP-1巨噬細胞ABCA1 mRNA和蛋白表達
    4.4 MALP-2通過TLR2/NF-κB途徑下調THP-1 巨噬細胞ABCA1表達
    4.5 ZNF202參與NF-κB介導的ABCA1表達下調
第5章 討論
第6章 結論
參考文獻
文獻綜述 巨噬細胞活化脂肽-2研究進展
    參考文獻
碩士期間發(fā)表論文
致謝
基金資助


【參考文獻】：
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本文編號：3302116