目的:三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1（ABCA1）作為介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)游離膽固醇（FC）和磷脂流出至貧脂的載脂蛋白（apoA-I）接受體的關(guān)鍵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,對(duì)減少細(xì)胞內(nèi)膽固醇蓄積和抑制泡沫細(xì)胞形成具有重要意義。巨噬細(xì)胞活化脂肽-2（MALP-2）是從發(fā)酵支原體細(xì)胞壁上提取的一種脂多肽,能特異性識(shí)別靶細(xì)胞膜上的Toll樣受體（TLRs）,與動(dòng)脈粥樣硬化（As）形成密切相關(guān),但MALP-2是否能調(diào)控ABCA1表達(dá)仍不清楚。本研究旨在闡明MALP-2對(duì)THP-1巨噬細(xì)胞ABCA1表達(dá)的影響及相關(guān)機(jī)制。方法:培養(yǎng)THP-1單核細(xì)胞,依次加入佛波酯（PMA）、氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）孵育,使其最終分化為THP-1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞,經(jīng)不同濃度的MALP-2（0、25、50、100、200 mM）處理細(xì)胞24 h或以100 mM MALP-2處理細(xì)胞不同時(shí)間（0、6、12、24、48 h）后,行油紅O染色觀察細(xì)胞蓄脂情況,高效液相色譜法（HPLC）檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)總膽固醇（TC）、FC及膽固醇酯（CE）含量,液體閃爍計(jì)數(shù)法分析細(xì)胞內(nèi)膽固醇流出,熒光實(shí)時(shí)定量PCR、Western blot分別測(cè)定ABCA1 ... 

【文章來(lái)源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要英文縮略語(yǔ)索引
第1章 引言
第2章 實(shí)驗(yàn)材料
    2.1 主要試劑與抗體
    2.2 主要儀器與設(shè)備
第3章 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 THP-1 細(xì)胞培養(yǎng)與處理
    3.2 ox-LDL的制備與鑒定
    3.3 油紅O染色觀察細(xì)胞脂滴
    3.4 高效液相色譜法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)總膽固醇（total cholesterol, TC）、FC、膽固醇酯（cholesterol ester, CE）含量
    3.5 液體閃爍計(jì)數(shù)法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)膽固醇流出
    3.6 小干擾RNA（small interfering RNA, siRNA）轉(zhuǎn)染細(xì)胞
    3.7 細(xì)胞總RNA提取和熒光實(shí)時(shí)定量PCR
    3.8 細(xì)胞總蛋白提取
    3.9 細(xì)胞核蛋白提取
    3.10 Western blot
    3.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.1 MALP-2促進(jìn)THP-1巨噬細(xì)胞內(nèi)膽固醇蓄積
    4.2 MALP-2減少THP-1巨噬細(xì)胞膽固醇流出
    4.3 MALP-2下調(diào)THP-1巨噬細(xì)胞ABCA1 mRNA和蛋白表達(dá)
    4.4 MALP-2通過(guò)TLR2/NF-κB途徑下調(diào)THP-1 巨噬細(xì)胞ABCA1表達(dá)
    4.5 ZNF202參與NF-κB介導(dǎo)的ABCA1表達(dá)下調(diào)
第5章 討論
第6章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述 巨噬細(xì)胞活化脂肽-2研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
碩士期間發(fā)表論文
致謝
基金資助


【參考文獻(xiàn)】：
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