目的：研究黑青稞籽皮提取物后處理對心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧（H/R）損傷的保護作用及其機制。方法：用Na2S2O4作耗氧劑建立H9c2細(xì)胞化學(xué)性缺氧/復(fù)氧損傷模型。將H9c2細(xì)胞隨機分為5組：正常對照組（C組）、缺氧/復(fù)氧組（H/R組）、缺氧/復(fù)氧+低、中、高劑量提取物組（H/R+L、M、H組）。應(yīng)用MTT法檢測細(xì)胞相對活力,流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡、細(xì)胞內(nèi)ROS水平和細(xì)胞線粒體跨膜電位（△Ψm）, Western blot檢測相關(guān)蛋白（Akt、pAkt、Bcl-2和Bax）表達(dá)變化。數(shù)據(jù)統(tǒng)計采用SAS9.2和SPSS19.0軟件包進行統(tǒng)計學(xué)處理。結(jié)果：1.通過將H9c2細(xì)胞置于5mM Na2S2O4中使細(xì)胞缺氧20min,再復(fù)氧8h建立了穩(wěn)定、可靠的缺氧/復(fù)氧損傷模型。2.缺氧/復(fù)氧降低H9c2細(xì)胞相對活力,黑青稞籽皮提取物后處理能抑制缺氧/復(fù)氧所致細(xì)胞相對活力的下降。3.缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)H9c2細(xì)胞凋亡,黑青稞籽皮提取物后處理能抑制缺氧/復(fù)氧所致細(xì)胞凋亡。4.缺氧/復(fù)氧增加H9c2細(xì)胞內(nèi)ROS水平,黑青稞籽皮提取物后處理能抑制缺氧/復(fù)氧所致細(xì)胞內(nèi)ROS水平的增加。5.缺氧/復(fù)氧降低H9c2細(xì)... 

【文章來源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

細(xì)胞在不同NaZS2氏濃度及不同缺氧時間下復(fù)氧4h后細(xì)胞相對活力變化

碩士學(xué)位論文 第二章當(dāng)Na2S204濃度及復(fù)氧時間一定時，細(xì)胞相對活力隨缺氧時間出現(xiàn)波動。缺氧時間在0?20min時，隨著缺氧時間的延長，復(fù)氧后心肌細(xì)胞的相對活力呈下降趨勢；缺氧時間在30?60min時，細(xì)胞相對活力和缺氧時間的關(guān)系出現(xiàn)逆轉(zhuǎn)，在一定范圍內(nèi)，缺氧時間的延長反而有利于細(xì)胞的相對活力的維持；缺氧時間大于60min時，隨著缺氧時間的延長，復(fù)氧后心肌細(xì)胞的相對活力復(fù)呈下降趨勢。缺氧時間為20?30min時，細(xì)胞相對活力最低，且相對活力變化相對平緩。但統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)，缺氧時間對細(xì)胞相對活力的影響無統(tǒng)計學(xué)意義（p〉0.1)。當(dāng)Na2S204濃度及缺氧時間一定時，細(xì)胞相對活力隨著復(fù)氧時間的延長呈下降趨勢。這個下降趨勢在缺氧時間為20?40min時表現(xiàn)尤為明顯。復(fù)氧時間對細(xì)胞相對活力的影響有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05)。在一定復(fù)氧時間范圍內(nèi)，細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷隨著復(fù)氧時間的延長進行性加重。100-1 *

圖3.1提取物對正常心肌細(xì)抱相對活力的影響胞形態(tài)學(xué)變化照組心肌細(xì)胞貼壁生長，為長梭形，呈魚群狀排列，細(xì)胞邊界不清，。缺氧/復(fù)氧組細(xì)胞形態(tài)異常，細(xì)胞皺縮，呈不規(guī)則分枝狀、星狀等，下降，細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)空泡樣改變，培養(yǎng)基內(nèi)可見少量漂浮細(xì)胞及細(xì)量提取物組中，大部分細(xì)胞出現(xiàn)皺縮，部分細(xì)胞呈不規(guī)則分枝狀、異常細(xì)胞比例較缺氧/復(fù)氧組少，細(xì)胞異常程度較前者輕，培養(yǎng)基浮細(xì)胞及細(xì)胞碎片。高劑量提取物組細(xì)胞形態(tài)較正常對照組細(xì)胞細(xì)胞邊緣較正常對照組銳利，說明細(xì)胞貼壁生長能力較正常對照量提取物組細(xì)胞異常細(xì)胞比例及程度介于低劑量提取物組及高劑間。

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3293133