研究背景冠心�。–AD）嚴重威脅著人類健康，發(fā)病呈上升趨勢。冠心病是導致心衰的的主要原因[1]，而心衰是各種心臟疾病的嚴重和終末階段，早期正確診斷、鑒別診斷和治療冠心病能有效減少死亡率，基于此，尋求診斷冠心病靈敏度和特異性高的標志物仍然任重道遠。CAD導致心衰的主要發(fā)病機制之一為心肌病理性重塑，如心肌壞死、凋亡、肥大、自噬、心肌細胞外基質(zhì)沉積、血管新生等，心臟功能漸漸惡化，發(fā)展至心衰直至患者死亡。CAD患者減少心肌纖維化、調(diào)控缺血區(qū)周邊的基質(zhì)沉積、增加血管新生對于防止心室重塑、改善心功能尤其重要。心臟缺血后心臟相關細胞內(nèi)基因表達紊亂、調(diào)節(jié)失衡，導致相應受調(diào)節(jié)蛋白表達發(fā)生改變，可能是冠心病缺血后心臟發(fā)生心室重塑的病理基礎。基于以上理論，從基因或分子水平研究心室重塑有可能為臨床治療冠心病、防止心室重塑提供新的思路。MicroRNAs（miRNAs）是一類長度為21²5個核糖核苷酸的非編碼內(nèi)源性小單鏈RNAs分子，在生物進化過程中高度保守。它們通過堿基互補或部分堿基互補與目標mRNA結合，使mRNA降解或者抑制mRNA的翻譯，在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)基因表達。MiRNAs在多種... 

【文章來源】：廣州醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

qRT-PCR檢測microRNA的原理示意圖（摘自Chen[48]

72℃ 32 秒延伸（32 秒收集熒光信號），變性-退火-延伸進行 40 個循環(huán)熔解曲線分析：溫度 60℃~95℃。分析軟件：7500 Software v2.0.6。在擴增目的基因 miR-21、miR-100、miR-423-5p 的同時，我們還擴增了 snRNA U6（管家基因）作為內(nèi)對照。所有實時定量 PCR 實驗獨立重復 3 次。相對表達量采用 2-(Δt)方法[49]，將目的基因表達 CT*(Cycle threshold)值與 U6 表達 CT 值進行比較，標準化后的 CT 值為相對定量值(*注：Ct 值的含義指每個反應管內(nèi)的熒光信號到達設定的域值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù))。標準化后的 CT 值：ΔΔCt=(Ct目的基因-Ct管家)實驗組-(Ct目的基因-Ct管家基因)參照組，相對樣品表達量=2-(ΔΔCt)，以相對樣本表達量表示循環(huán) miR-21、miR-100、miR-423-5p 的相對表達水平。部分樣本的內(nèi)參基因及目的基因的基因擴增曲線和熔解曲線見圖（圖 2-2 至2-9）。

部分樣品的snRNAU6內(nèi)參基因熔解曲線


本文編號：3273890