目的研究髓系惡性腫瘤部分巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶基因的表達(dá)情況，基因包括斑馬魚巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶基因（DF1、DF2、DF7、DF8、DF9、DF10、DF11）和參與人類ABH血型抗原和Lewis血型抗原形成的巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶基因（FUT1、FUT2、FUT3、FUT6、FUT7）。方法應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（real-time fluorscence quantitativereverse transcription-polymerase chain reaction，F(xiàn)Q RT-PCR）檢測(cè)具髓系表型的MYCN轉(zhuǎn)基因型斑馬魚系巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶基因、HL-60人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞和急性髓細(xì)胞白血�。ˋML）/骨髓增生異常綜合征（MDS）患者FUT1/2/3/6/7基因的表達(dá)，同時(shí)分別以野生型（WT）斑馬魚系、正常CD34（+）細(xì)胞和健康體檢者作為各自的正常對(duì)照進(jìn)行相應(yīng)表達(dá)分析研究。結(jié)果斑馬魚巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶7、8、9、10、11基因在MYCN轉(zhuǎn)基因型斑馬魚系和野生型斑馬魚系的相對(duì)表達(dá)情況分別為：4.858±0.203vs1.005±0.010、0.143±0.022vs1.040±0.1... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
前言
材料與方法
    1. 主要試劑
    2. 主要設(shè)備
    3. 研究對(duì)象
        3.1 野生型斑馬魚和 MYCN 轉(zhuǎn)基因斑馬魚
        3.2 HL-60 細(xì)胞與正常 CD34（+）細(xì)胞
        3.3 AML/MDS 患者及其正常對(duì)照樣本
    4. 細(xì)胞培養(yǎng)、計(jì)數(shù)、凍存和復(fù)蘇方法
        4.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        4.2 細(xì)胞計(jì)數(shù)
            4.2.1 原理
            4.2.2 細(xì)胞計(jì)數(shù)方法
        4.3 細(xì)胞凍存和復(fù)蘇
            4.3.1 原理
            4.3.2 細(xì)胞凍存操作步驟
            4.3.3 細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟
    5. 臨床樣本的收集
    6. 分離外周血單個(gè)核細(xì)胞
        6.1 原理
        6.2 操作步驟
    7. 總 RNA 的提取、鑒定
        7.1 實(shí)驗(yàn)原理
        7.2 樣本預(yù)處理
        7.3 操作步驟
        7.4 總 RNA 的鑒定
    8. cDNA 的制備
        8.1 去除基因組 DNA
        8.2 反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
    9. 實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（FQ RT-PCR）
        9.1 原理
        9.2 引物設(shè)計(jì)與合成
        9.3 反應(yīng)體系和反應(yīng)條件
        9.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備及線性范圍的確定
        9.5 PCR 產(chǎn)物的確定和溶解曲線的分析
    10. 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
    1. 總 RNA 濃度和純度的鑒定
    2. RT-PCR 產(chǎn)物的鑒定
        2.1 熔解曲線和擴(kuò)增曲線分析
        2.2 電泳結(jié)果分析
    3. 各基因標(biāo)準(zhǔn)曲線
    4. 巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶基因的表達(dá)
        4.1 斑馬魚巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶各基因的表達(dá)
        4.2 HL-60 細(xì)胞部分巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶基因的表達(dá)
        4.3 AML/MDS 患者部分巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶基因的表達(dá)
討論
    1. 巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶生物學(xué)特性
    2. 巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶基因?qū)崟r(shí)熒光定量檢測(cè)方法的優(yōu)勢(shì)和優(yōu)化
        2.1 FQ RT-PCR 檢測(cè)方法的優(yōu)勢(shì)
        2.2 FQ RT-PCR 檢測(cè)方法的優(yōu)化
    3. 血液系統(tǒng)惡性腫瘤模式生物斑馬魚與巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶
    4. HL-60 人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞與巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶
    5. 人類惡性腫瘤與巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶
    6. 總結(jié)
本實(shí)驗(yàn)的創(chuàng)新點(diǎn)與不足
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
學(xué)術(shù)論文和科研成果目錄


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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