第一部分瑞芬太尼通過(guò)糾正鋅穩(wěn)態(tài)失衡而發(fā)揮其抗心肌缺血/再灌注損傷作用目的盡管已有研究證實(shí)鋅穩(wěn)態(tài)失衡與心肌缺血/再灌注損傷密切相關(guān),但是關(guān)于鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)如何影響鋅穩(wěn)態(tài)失衡以及其在心肌缺血/再灌注損傷中的具體作用尚不清楚。瑞芬太尼（Remifentanil）己被證實(shí)可減輕心肌缺血/再灌注損傷,但其相應(yīng)分子機(jī)制尚未完全闡明。本部分的研究目的是證明瑞芬太尼能否通過(guò)糾正鋅穩(wěn)態(tài)失衡發(fā)揮其抗心肌缺血/再灌注損傷的作用。方法利用Langendorff模型建立離體大鼠局部心臟缺血/再灌注模型,缺血時(shí)間為30min,再灌注時(shí)間為2h。瑞芬太尼于缺血前30min給予,5 min/次,每次間隔5min,共3個(gè)循環(huán)。通過(guò)伊文氏藍(lán)+TTC染色法測(cè)定心肌梗死面積;用電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀檢測(cè)心臟鋅離子含量;用Western blotting法測(cè)定心肌危險(xiǎn)區(qū)金屬應(yīng)答轉(zhuǎn)錄因子1（Metal responsive factor 1,MTF1）及鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（Zinc transporter l,ZnT1）的表達(dá)。利用H9c2細(xì)胞建立缺氧/復(fù)氧模型,瑞芬太尼于缺氧前2 h預(yù)先給藥。采用CCK8法測(cè)定各組細(xì)胞存活率,利... 

【文章來(lái)源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：120 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、瑞芬太尼通過(guò)糾正鋅穩(wěn)態(tài)失衡而發(fā)揮其抗心肌缺血/再灌注損傷作用
    1.1 對(duì)象和方法
        1.1.1 研究對(duì)象
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.1.3 常用試劑
        1.1.4 關(guān)鍵試劑及試劑盒
        1.1.5 大鼠離體心臟灌流及心肌缺血/再灌注模型
        1.1.6 心功能測(cè)定
        1.1.7 心肌梗死面積測(cè)定
        1.1.8 電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀檢測(cè)心臟鋅離子量
        1.1.9 H9c2細(xì)胞的復(fù)蘇、傳代和凍存
        1.1.10 細(xì)胞計(jì)數(shù)
        1.1.11 建立H9c2細(xì)胞缺氧/復(fù)氧模型
        1.1.12 CCK8 法檢測(cè)細(xì)胞存活率
        1.1.13 Newport Green DCF檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鋅離子含量
        1.1.14 Western blotting
        1.1.15 質(zhì)粒構(gòu)建及轉(zhuǎn)染
        1.1.16 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 不同濃度瑞芬太尼預(yù)處理減輕心肌缺血/再灌注損傷
        1.2.2 瑞芬太尼預(yù)處理糾正再灌注后心肌細(xì)胞鋅穩(wěn)態(tài)的失衡
        1.2.3 瑞芬太尼預(yù)處理通過(guò)抑制MTF1和ZnT1表達(dá)而糾正心肌細(xì)胞鋅穩(wěn)態(tài)的失衡
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
二、瑞芬太尼通過(guò)抑制鋅離子丟失所致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激而減輕心肌線粒體損傷
    2.1 對(duì)象和方法
        2.1.1 研究對(duì)象
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.3 新增試劑
        2.1.4 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方案
        2.1.5 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方案
        2.1.6 用ER Tracker Red及Newport Green DCF共染法測(cè)定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鋅離子含量變化
        2.1.7 DCFH-DA檢測(cè)活性氧含量
        2.1.8 Mitosox Red熒光探針檢測(cè)線粒體內(nèi)超氧化物水平
        2.1.9 JC-1染色檢測(cè)細(xì)胞線粒體膜電位變化
        2.1.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 瑞芬太尼通過(guò)減少鋅離子外流抑制心肌細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激
        2.2.2 生理?xiàng)l件下鋅離子丟失介導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及細(xì)胞凋亡
        2.2.3 鋅離子通過(guò)減輕內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)瑞芬太尼對(duì)再灌注心肌的保護(hù)作用
        2.2.4 瑞芬太尼通過(guò)鋅離子減輕內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激進(jìn)而防止線粒體損傷
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
全文結(jié)論
論文創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明
附錄
綜述 鋅與細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]《中國(guó)心血管病報(bào)告2017》概要[J]. 陳偉偉,高潤(rùn)霖,劉力生,朱曼璐,王文,王擁軍,吳兆蘇,李惠君,顧東風(fēng),楊躍進(jìn),鄭哲,蔣立新,胡盛壽.  中國(guó)循環(huán)雜志. 2018(01)



本文編號(hào)：3171880