發(fā)布時間：2021-05-06 11:56

　　第一部分瑞芬太尼通過糾正鋅穩(wěn)態(tài)失衡而發(fā)揮其抗心肌缺血/再灌注損傷作用目的盡管已有研究證實鋅穩(wěn)態(tài)失衡與心肌缺血/再灌注損傷密切相關,但是關于鋅轉運蛋白表達如何影響鋅穩(wěn)態(tài)失衡以及其在心肌缺血/再灌注損傷中的具體作用尚不清楚。瑞芬太尼（Remifentanil）己被證實可減輕心肌缺血/再灌注損傷,但其相應分子機制尚未完全闡明。本部分的研究目的是證明瑞芬太尼能否通過糾正鋅穩(wěn)態(tài)失衡發(fā)揮其抗心肌缺血/再灌注損傷的作用。方法利用Langendorff模型建立離體大鼠局部心臟缺血/再灌注模型,缺血時間為30min,再灌注時間為2h。瑞芬太尼于缺血前30min給予,5 min/次,每次間隔5min,共3個循環(huán)。通過伊文氏藍+TTC染色法測定心肌梗死面積;用電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀檢測心臟鋅離子含量;用Western blotting法測定心肌危險區(qū)金屬應答轉錄因子1（Metal responsive factor 1,MTF1）及鋅轉運蛋白1（Zinc transporter l,ZnT1）的表達。利用H9c2細胞建立缺氧/復氧模型,瑞芬太尼于缺氧前2 h預先給藥。采用CCK8法測定各組細胞存活率,利... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：120 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、瑞芬太尼通過糾正鋅穩(wěn)態(tài)失衡而發(fā)揮其抗心肌缺血/再灌注損傷作用
    1.1 對象和方法
        1.1.1 研究對象
        1.1.2 實驗儀器
        1.1.3 常用試劑
        1.1.4 關鍵試劑及試劑盒
        1.1.5 大鼠離體心臟灌流及心肌缺血/再灌注模型
        1.1.6 心功能測定
        1.1.7 心肌梗死面積測定
        1.1.8 電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀檢測心臟鋅離子量
        1.1.9 H9c2細胞的復蘇、傳代和凍存
        1.1.10 細胞計數(shù)
        1.1.11 建立H9c2細胞缺氧/復氧模型
        1.1.12 CCK8 法檢測細胞存活率
        1.1.13 Newport Green DCF檢測細胞內(nèi)鋅離子含量
        1.1.14 Western blotting
        1.1.15 質(zhì)粒構建及轉染
        1.1.16 統(tǒng)計學分析
    1.2 結果
        1.2.1 不同濃度瑞芬太尼預處理減輕心肌缺血/再灌注損傷
        1.2.2 瑞芬太尼預處理糾正再灌注后心肌細胞鋅穩(wěn)態(tài)的失衡
        1.2.3 瑞芬太尼預處理通過抑制MTF1和ZnT1表達而糾正心肌細胞鋅穩(wěn)態(tài)的失衡
    1.3 討論
    1.4 小結
二、瑞芬太尼通過抑制鋅離子丟失所致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激而減輕心肌線粒體損傷
    2.1 對象和方法
        2.1.1 研究對象
        2.1.2 實驗儀器
        2.1.3 新增試劑
        2.1.4 動物實驗方案
        2.1.5 細胞實驗方案
        2.1.6 用ER Tracker Red及Newport Green DCF共染法測定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鋅離子含量變化
        2.1.7 DCFH-DA檢測活性氧含量
        2.1.8 Mitosox Red熒光探針檢測線粒體內(nèi)超氧化物水平
        2.1.9 JC-1染色檢測細胞線粒體膜電位變化
        2.1.10 統(tǒng)計學分析
    2.2 結果
        2.2.1 瑞芬太尼通過減少鋅離子外流抑制心肌細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激
        2.2.2 生理條件下鋅離子丟失介導內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激及細胞凋亡
        2.2.3 鋅離子通過減輕內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激介導瑞芬太尼對再灌注心肌的保護作用
        2.2.4 瑞芬太尼通過鋅離子減輕內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激進而防止線粒體損傷
    2.3 討論
    2.4 小結
全文結論
論文創(chuàng)新點
參考文獻
發(fā)表論文和參加科研情況說明
附錄
綜述 鋅與細胞信號轉導
    綜述參考文獻
致謝
個人簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
[1]《中國心血管病報告2017》概要[J]. 陳偉偉,高潤霖,劉力生,朱曼璐,王文,王擁軍,吳兆蘇,李惠君,顧東風,楊躍進,鄭哲,蔣立新,胡盛壽.  中國循環(huán)雜志. 2018(01)



本文編號：3171880