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激活TRPM8通道對正常和慢性低氧肺高壓大鼠肺動(dòng)脈上鈣池操縱性鈣內(nèi)流(SOCE)的調(diào)控

發(fā)布時(shí)間:2021-01-24 16:39
  肺高壓(pulmonary hypertension,PH)的顯著特征是肺血管收縮增強(qiáng)和肺血管重塑,主要由肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)胞漿內(nèi)游離Ca2+濃度(intracellular free calcium concentration,[Ca2+]i)的持續(xù)升高引起。研究表明,鈣池操縱性鈣通道(store-operated Ca2+channel,SOCC)所介導(dǎo)的鈣池操縱性鈣內(nèi)流(store-operated calcium entry,SOCE)在特發(fā)性肺動(dòng)脈高壓(idiopathic pulmonary arterial hypertension,IPAH)患者及PH動(dòng)物模型的PASMCs中均顯著增強(qiáng),并且在PH發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。研究表明,PH大鼠模型PASMCs中melastatin相關(guān)的瞬時(shí)受體電位8(melastatin-related transient receptor potential 8... 

【文章來源】:福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】:138 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

激活TRPM8通道對正常和慢性低氧肺高壓大鼠肺動(dòng)脈上鈣池操縱性鈣內(nèi)流(SOCE)的調(diào)控


慢性低氧處理三周后肺高壓大鼠模型鑒定Fig.1-1.Validationofpulmonaryhypertensioninratsexposedtochronichypoxia(CH)

大鼠,內(nèi)參,蛋白表達(dá),表達(dá)水平


n=4;CHPH 組:2.1±0.7, n=5, P<0.01. Fig.1-2B)。提示,TRPM8 和 TRPC1的 mRNA 表達(dá)水平在 CHPH 大鼠 PAs 中都發(fā)生了顯著變化。圖1-2. 正常和CHPH大鼠去內(nèi)皮PAs中TRPM8和TRPC1基因表達(dá)檢測Fig.1-2. Alterations in the transient receptor potential melastatin-8 (TRPM8) andcanonical transient receptor potential 1 (TRPC1) expression in PAs of CH-treated rats.Quantitative real-time RT-PCR analysis of TRPM8 (A) and TRPC1 (B) mRNAexpression in endothelium-denuded PAs of control and CHPH-treated rats (n=3,**P<0.01 vs CON).2.2. CHPH 大鼠去內(nèi)皮 PAs 中 TRPM8 和 TRPC1 蛋白表達(dá)的變化此外,Western Blotting 檢測結(jié)果顯示:在以 β-actin 為內(nèi)參的情況下,與 CON組相比,CHPH 大鼠 PAs 中 TRPM8 蛋白的表達(dá)水平也顯著降低(CON 組:0.3±0.04,n=3;CHPH 組:0.1±0.03, n=3, P<0.01. Fig.1-3A、C),同樣,TRPC1 蛋白的表達(dá)水平在CHPH大鼠PAs中也顯著增高(CON組:0.03±0.01, n=3; CHPH組:0.3±0.07,n=3,P<0.01. Fig.1-3B、D),與實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 的結(jié)果一致。提示

大鼠,共聚焦,蛋白表達(dá),免疫熒光法


39圖1-3. 正常和CHPH大鼠去內(nèi)皮PAs中TRPM8和TRPC1蛋白表達(dá)檢測Fig.1-3. Western blots of TRPM8 and TRPC1 proteins in endothelium denuded PAs ofcontrol and CHPH rats (A and B). Normalized amount of TRPM8 and TRPC1 proteinsharvested from PAs of 3 control and 3 CH-treated animals (C and D). **P<0.01,differences between control and CH-treated groups.3. 共聚焦免疫熒光法檢測 CHPH 大鼠 PASMCs 中 TRPM8 和 TRPC1蛋白表達(dá)的變化上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明TRPM8和TRPC1通道在CHPH大鼠PAs中發(fā)生了相反的變化趨勢,為了進(jìn)一步驗(yàn)證TRPM8和TRPC1蛋白在CHPH大鼠PASMCs中表達(dá)量的變化,以及TRPM8和TRPC1之間可能存在的關(guān)系,繼續(xù)采用共聚焦免疫熒光檢測方法,檢測CHPH大鼠PASMCs中TRPM8和TRPC1蛋白表達(dá)情況。3.1.大鼠原代 PASMCs 的鑒定

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Imbalance and dysfunction of transient receptor potential channels contribute to the pathogenesis of hypertension[J]. LIU DaoYan,XIONG ShiQiang,ZHU ZhiMing.  Science China(Life Sciences). 2014(08)



本文編號(hào):2997576

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