發(fā)布時間：2020-09-30 18:26

　　 目的:心力衰竭(heart failure,HF),是多種心臟疾病發(fā)展的最后階段,HF有多種病因。心肌細胞凋亡是HF發(fā)展的要素。本實驗主要探討HF大鼠心肌組織中,JNK磷酸化激活后,對促凋亡蛋白Bax及抗凋亡蛋白Bcl-2進行調(diào)節(jié),從而對心肌細胞凋亡產(chǎn)生影響;探討海沙瑞林(hexarelin)是否可以通過抑制JNK信號通路,減少心肌細胞凋亡的數(shù)量,改善HF。方法:清潔級,SD大白鼠80只,體重(220?20g)。分為四組:正常組,假手術組,HF組和HF+hexarelin組。我們用左冠狀動脈前降支結扎法,制造心肌梗死后HF模型,術中行心電監(jiān)測。術后4周分別給予生理鹽水或hexarelin(25μg/kg,每天1次),持續(xù)注射4周。手術8周之后用超聲心動圖檢測各組大鼠的心功能;HE染色法,察看心肌細胞的形態(tài);免疫組化法測量大鼠心肌組織中p-JNK、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白陽性表達的水平;Western Blot法分別測定各組大鼠心肌組織中JNK、p-JNK、Bcl-2、Bax、Caspase-3和Cleaved Caspase-3蛋白的表達量。結果:1.心電圖結果術前,大鼠心電圖各波形均正常。手術結束后,假手術組部分大鼠出現(xiàn)一過性心律失常。模型組大鼠T波高聳,且ST段呈直立性抬高。2.超聲心動圖結果術后8周末,行超聲心動圖檢測,大鼠左心室擴張,與正常組相比,HF組的左室收縮期內(nèi)徑、左室舒張期內(nèi)徑均顯著增大(p0.05),左室射血分數(shù)明顯減小(p0.05)。與HF組相比較,HF+hexarelin組左室收縮期內(nèi)徑,及左室舒張期內(nèi)徑與模型組相比明顯變小(p0.05),且左室射血分數(shù)顯著增加(p0.05)。3.HE染色結果正常組、假手術組的心肌細胞:排列均整齊,走向規(guī)律一致,心肌纖維橫紋清晰可見。且染色均勻,心肌細胞核形狀規(guī)則。HF組顯示受損的心肌細胞有大量壞死,心肌細胞排列紊亂,心肌橫紋消失。HF+hexarelin組的心肌細胞排列比較規(guī)律,部分心肌纖維仍可見橫紋。4.免疫組化結果p-JNK蛋白陽性表達水平:模型組較正常組與假手術組相比明顯升高(p0.05),治療組較模型組相比明顯降低(p0.05)。Bax蛋白陽性表達水平:模型組較正常組與假手術組相比明顯升高(p0.05),治療組較模型組相比明顯降低(p0.05)。Bcl-2蛋白陽性表達水平:模型組較正常組與假手術組相比明顯降低(p0.05),治療組較模型組相比明顯升高(p0.05)。Casepase-3蛋白陽性表達水平:模型組較正常組與假手術組相比明顯升高(p0.05),治療組較模型組相比明顯降低(p0.05)。5.Western Blot檢測結果p-JNK/JNK的比值:模型組較正常組與假手術組相比明顯升高(p0.05),治療組較模型組相比明顯降低(p0.05)。Bax蛋白表達量:模型組較正常組與假手術組相比明顯升高(p0.05),治療組較模型組相比明顯降低(p0.05)。Bcl-2蛋白表達量:模型組較正常組與假手術組相比明顯降低(p0.05),治療組較模型組相比明顯升高(p0.05)。Cleaved Casepase-3/Caspase-3的比值:模型組較正常組與假手術組相比明顯升高(p0.05),治療組較模型組相比明顯降低(p0.05)。結論:結果表明hexarelin通過抑制JNK信號通路,抑制了Bax的蛋白表達、增加Bcl-2的蛋白表達、抑制Caspase-3活化,從而減少心肌細胞凋亡,是改善梗死后心力衰竭大鼠心功能的途徑之一。
【學位單位】：佳木斯大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R541.6
【部分圖文】：

佳木斯大學碩士學位論文心肌細胞凋亡的過程主要包括兩種途徑（圖 2）：內(nèi)源性途徑/線粒體途，及外源性途徑/死亡受體途徑。其中胚胎發(fā)育時主要啟動的是外源性細胞凋途徑，例如胚胎發(fā)育時期，手指和腳趾指蹼的逐漸消失；小蝌蚪變成青蛙的程中會褪掉尾巴，也屬于外源性凋亡途徑的實例。而在成人以后很多細胞凋則是通過內(nèi)源性凋亡途。例如，細胞由于缺乏氧氣，缺養(yǎng)分以及病毒感染，NA 損傷等因素而導致的細胞凋亡，都是通過內(nèi)源性凋亡途徑完成的[27]。

Fig. 3 The structure of JNKs圖 3 JNK 的三維結構圖JNK 蛋白的通用結構用米色的條帶表示，可變區(qū)域（選擇性剪接亞型和紫色表示。激酶結構域的催化位點 ATP，用黃色表示。無序區(qū)域用K 的三級激酶模式K 是一組三級磷酸化依賴的激酶，分別是 MAPKKK(MAP kiMEKK), MAPKK(MAP kinase kinase/MEK)和 MAPK 家族中的應就好像是磷酸化的接力賽。MAPKKK 磷酸化激活 MAPKK激活 MAPK 家族中的 JNK[45]（圖 4 ）。

Fig. 4 JNK signaling modules圖 4 JNK 信號通路模式圖種能夠激活 JNK 的 MAPKKK，包括 MEKK 組成員（蛋白激酶組（MLK1，MLK2，MLK3，DLK 和 LZK），K2），TAK1 和 TPL2。已經(jīng)鑒定了具有不同氨基末端激酶，并且已經(jīng)描述了具有不同氨基末端和羧基末端酶同種型。它們都通過蘇氨酸和酪氨酸兩個氨基酸的雙路的激活物K 被許多細胞外信號激活后介導信號從細胞膜傳導入號刺激包括 UV 輻射，反應活性氧(reactive oxygen，病原體，生長因子，毒性化合物，形態(tài)發(fā)生因子，應

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1 張娟娟;;運動與心肌細胞凋亡[J];山西體育科技;2011年03期

2 陳飛;陳s

本文編號：2831199