腹主動(dòng)脈瘤(abdominal aortic aneurysm,AAA)多發(fā)于50歲以上的老年男性,是腹主動(dòng)脈壁局部異常擴(kuò)張或膨脹超過(guò)正常血管直徑50%的一種病理狀態(tài),最終血管壁無(wú)法承受血流的沖擊而破裂,導(dǎo)致患者突然大量失血而死亡,病死率高,除高風(fēng)險(xiǎn)的外科手術(shù)外尚無(wú)切實(shí)有效的治療方法,預(yù)后極差,因此,深入探討腹主動(dòng)脈瘤發(fā)病機(jī)制,尋找其防治方法顯得尤為重要。免疫球蛋白E(IgE)通過(guò)與肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞結(jié)合從而激活I(lǐng)型超敏反應(yīng),眾所周知,IgE及其受體FcεRI在過(guò)敏性哮喘導(dǎo)致的的氣道炎癥和重塑中發(fā)揮至關(guān)重要的作用。我們的前期研究發(fā)現(xiàn),AAA患者血漿中免疫球蛋白E(IgE)含量顯著升高,最近有研究表明,IgE在腹主動(dòng)脈瘤的發(fā)病機(jī)制中也起著重要作用。然而,IgE促進(jìn)AAA發(fā)生發(fā)展的具體機(jī)制目前尚不清楚。本課題研究發(fā)現(xiàn),哮喘誘導(dǎo)小鼠IgE升高并加重了小鼠AAA形成,敲除FcεRI明顯減輕由哮喘加重的小鼠AAA直徑、發(fā)生率、彈性板斷裂和AAA局部及全身性炎癥反應(yīng),并檢測(cè)到敲除FcεRI可以明顯緩解AAA組織衰老及p21表達(dá)。體外研究表明,人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(HASMC)表達(dá)IgE受體FcεRI,并且IgE刺激可使平滑肌p21表達(dá)量顯著升高,同時(shí)不影響p53表達(dá)量,并可以明顯促進(jìn)平滑肌衰老,而敲低長(zhǎng)非編碼RNA:lincRNA-p21則可抑制IgE誘導(dǎo)的p21表達(dá)升高和HASMC衰老。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí),敲低小鼠lincRNA-p21可有效減緩哮喘加重的AAA,并降低瘤組織中p21表達(dá)減輕細(xì)胞衰老。本研究首次發(fā)現(xiàn)了哮喘誘導(dǎo)的高IgE能夠通過(guò)lincRNAp21-p21通路促進(jìn)平滑肌衰老,從而加重AAA形成,為哮喘加重AAA的診斷和潛在治療靶點(diǎn)提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【學(xué)位單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R543.1
【部分圖文】：

哮喘與腹主動(dòng)脈瘤之間的關(guān)系，我們建立小鼠哮喘并發(fā)腹主動(dòng)脈瘤動(dòng)物模型，采用逡逑Ａｎｇｌｌ誘導(dǎo)ＡｐｏＥ＿Ａ小鼠法建立腹主動(dòng)脈瘤模型的同時(shí)，用卵清蛋白（ＯＶＡ）誘導(dǎo)建逡逑立小鼠過(guò)敏性哮喘模型（圖１Ａ）。如圖１Ｂ－Ｆ所示，與ＰＢＳ霧化暴露對(duì)照組相比，逡逑ＯＶＡ誘導(dǎo)哮喘組小鼠（哮喘組）的支氣管肺泡灌洗液（Ｂｒｏｎｃｈｏａｌｖｅｏｌａｒ邋ｌａｖａｇｅ邋ｆｌｕｉｄｓ，逡逑ＢＡＬＦ）中嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞的數(shù)量顯著增加，哮喘組小鼠血清中ＯＶＡ特異逡逑性ＩｇＥ含量也顯著升高，膠原纖維染色證實(shí)，哮喘組小鼠肺組織膠原纖維的形成較逡逑對(duì)照組明顯增多，并且哮喘組小鼠肺組織小血管周圍炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)較對(duì)照組顯著逡逑增加，以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明ＯＶＡ誘導(dǎo)建立小鼠過(guò)敏性哮喘模型成功。在敲除小鼠ＩｇＥ逡逑受體ＦｃｅＲＩ邋（ＡｐｏＥ＋，邋ＦｃｅＲＴＭ、＿）再接受ＯＶＡ誘導(dǎo)哮喘（實(shí)驗(yàn)組）后，支氣管肺逡逑泡灌洗液中嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞的數(shù)量較哮喘組明顯下降，血清中ＯＶＡ特異逡逑性ＩｇＥ含量、肺組織膠原纖維及肺組織小血管周圍炎性細(xì)胞浸潤(rùn)都比哮喘組小鼠顯逡逑著減少。說(shuō)明ＩｇＥ受體ＦｃｅＲＩ在小鼠過(guò)敏性哮喘發(fā)病進(jìn)程中具有重要病理作用。逡逑對(duì)小鼠進(jìn)行哮喘并發(fā)ＡＡＡ建模后解剖小鼠觀察其主動(dòng)脈成瘤情況

逑除炎癥外，血管壁細(xì)胞的衰老和凋亡在血管重塑中也起著至關(guān)重要的作用［５３R%。逡逑因此我們使用ＴＵＮＥＬ染色觀察三組小鼠ＡＡＡ組織中的細(xì)胞凋亡情況，如圖２Ｋ所逡逑示，哮喘顯著增加了邋ＡＡＡ小鼠瘤組織壁中凋亡細(xì)胞的數(shù)量，特別是增加了組織中逡逑平滑肌凋亡細(xì)胞的數(shù)量（圖２Ｌ），而敲除ＦｃｅＲＩ后由哮喘造成的組織細(xì)胞凋亡增加逡逑明顯回落。并且通過(guò)Ｐ－半乳糖苷酶（ＳＡ－ｐ－ｇａｌ）衰老組織化學(xué)染色發(fā)現(xiàn)，與沒(méi)有哮喘的逡逑ＡＡＡ單發(fā)小鼠相比，哮喘并發(fā)ＡＡＡ小鼠的主動(dòng)脈瘤組織衰老更為嚴(yán)重（圖２Ｍ和逡逑Ｎ）而哮喘同樣未能顯著加重ＡｐｏＥ＇邋ＴｃｅＲｒ邋－小鼠ＡＡＡ組織中的細(xì)胞凋亡和衰老（圖逡逑２Ｋ－Ｎ）。以上結(jié)果表明，ＩｇＥ能夠通過(guò)促進(jìn)腹主動(dòng)脈壁細(xì)胞的衰老和凋亡從而加重小逡逑鼠ＡＡＡ發(fā)生發(fā)展。逡逑Ａ邐Ｂ邐Ｃ邐Ｄ逡逑５０＾邋——邐４００邋＊邐０．１５－邋＊邋邋邋＾邋？邋——邋口邋ＰＢＳＡｐｏＥ’逡逑Ｃ邋＿邐＊邐ｃ邐－ｒ邐ｘ邐Ｉ邋邐＾邋ＢＯＶＡＡｐｏＥ－逡逑ｉ邋ＩＩ３００邋ｉ邋ｉ邋ｊｉ，邋｜邋ＢＯＶＡＡｐｏ？＂逡逑ｆ４Ｌ邋〖ｉ：ｎＬ邋ｆｃｆｉｌｉ逡逑Ｅ邐Ｆ邐Ｇ邐Ｈ邐？，逡逑？邐１．０ｉ邋？邋邋邋邋８ｉ邐；＾３０ｊ邋邋逡逑Ｈ４＇邋￣ｒ邐ｉｉ邋＾邐Ｌ邋｜逡逑‘邐■Ｍｍ邐‘邐ｉｔＬ逡逑１邐＾邐Ｋ邐Ｌ逡逑８０］邋——１１—邐一邋１00ｌ邐邐邋Ｈ邋４

逑細(xì)胞，ＳＡ－（３－ｇａｌ衰老染色結(jié)果表明，ＩｇＥ與Ａｎｇｌｌ相同都能夠促使平滑肌顯著衰老，逡逑（圖３Ｃ，邋Ｄ）。ｐ２１，也稱為細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑１邋（ｃｙｃｌｉｎ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｋｉｎａｓｅ逡逑ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ邋１）是細(xì)胞衰老的經(jīng)典標(biāo)志物，也是代表其上游因子ｐ５３活性的重要靶因子，逡逑對(duì)丨ｇＥ刺激后的平滑肌細(xì)胞的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，ＩｇＥ刺激可以顯著上調(diào)平滑肌細(xì)胞ｐ２１的逡逑ｍＲＮＡ及蛋白水平的表達(dá)量，然而ｐ５３的ｍＲＮＡ及蛋白水平的表達(dá)量卻沒(méi)有顯著逡逑差異（圖３Ｅ－Ｇ）。于是在小鼠組織上加以驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，哮喘引發(fā)高ＩｇＥ逡逑組小鼠的腹主動(dòng)脈瘤組織ｍＲＮＡ水平上同樣出現(xiàn)ｐ２１表達(dá)顯著增高而ｐ５３的表達(dá)逡逑量沒(méi)有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異現(xiàn)象（圖３Ｈ，Ｉ），并且免疫組化染色結(jié)果顯示，哮喘小鼠腹主逡逑動(dòng)脈瘤組織ｐ２１蛋白水平較對(duì)照組明顯增多圖３Ｊ，Ｋ）。這些發(fā)現(xiàn)表明，ＩｇＥ在體外和逡逑體內(nèi)都能夠誘發(fā)主動(dòng)脈血管平滑肌發(fā)生衰老。逡逑Ａ邐Ｂ邐Ｃ逡逑８－１邐４０邋ｎ逡逑

本文編號(hào)：2819596