【摘要】：背景心肌肥厚發(fā)生發(fā)展過(guò)程中體內(nèi)一系列級(jí)聯(lián)反應(yīng)被激活:心臟收縮蛋白的含量、能量代謝的改變及氧化應(yīng)激水平改變。正常心臟中心肌細(xì)胞主要由脂肪酸氧化滿(mǎn)足體內(nèi)的能量需求,而心肌肥厚期間心臟的新陳代謝更多的依賴(lài)于葡萄糖、氨基酸而不是脂肪酸作為主要的能量來(lái)源。心肌肥厚引起的氧化應(yīng)激反應(yīng)可導(dǎo)致心臟重塑而最終發(fā)展為心力衰竭。因此,進(jìn)一步了解脂肪酸氧化和氧化應(yīng)激水平改變?cè)谛募》屎裰械淖饔?可以幫助我們改善目前關(guān)于心肌肥厚的診斷和治療策略。之前的研究主要集中在它們的獨(dú)立效應(yīng)上,忽略了能量代謝和表觀遺傳學(xué)在心臟保護(hù)中的潛在相互作用~([1])。本研究采用異丙腎上腺素(isoproterenol,ISO)及LSD1特異性抑制劑OG-L002構(gòu)建大鼠心肌肥厚模型,欲探討LSD1與氧化應(yīng)激及脂代謝的關(guān)系在病理性心肌肥厚中的作用。目的1.探討持久激動(dòng)β-腎上腺素能受體病理性心肌肥厚發(fā)生機(jī)制中組蛋白去甲基化酶LSD1與脂肪酸代謝改變的相關(guān)性。2.初步探討病理性心肌肥厚發(fā)生機(jī)制中組蛋白去甲基化酶LSD1與氧化應(yīng)激相關(guān)蛋白Nrf2表達(dá)的相關(guān)性。方法選取健康雄性Sprague Dawley(SD)大鼠,體重為120~150 g,SPF級(jí)方法飼養(yǎng)大鼠,自由飲食攝水,自然晝夜節(jié)律光照。將實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為三組:正常對(duì)照組(Control),ISO組,OG-L002組,每組六只。通過(guò)心重比、超聲心動(dòng)檢測(cè)、實(shí)時(shí)定量PCR、蘇木素-伊紅染色、Western Blot、免疫組織化學(xué)檢測(cè)、血液代謝組學(xué)(核磁共振、液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜)等多種實(shí)驗(yàn)方法,檢測(cè):1.各組大鼠的心臟功能、心肌肥厚表型、肥厚因子、LSD1及其下游蛋白的表達(dá);2.各組大鼠血液代謝組學(xué)檢測(cè)脂代謝的變化以及脂代謝相關(guān)基因AGPS表達(dá)水平的改變;3.各組大鼠氧化應(yīng)激相關(guān)蛋白及基因的表達(dá);結(jié)果一、心肌肥厚大鼠模型的建立及大鼠心肌LSD1的表達(dá)水平與Control組相比,ISO組和OG-L002組動(dòng)物:心臟出現(xiàn)明顯肥厚現(xiàn)象,左室室壁厚度及左心室質(zhì)量明顯增加,左心室舒張末期內(nèi)徑縮小,射血分?jǐn)?shù)及左室短軸縮短率均增加;心臟明顯增大,心重比顯著升高;蘇木素-伊紅染色心肌細(xì)胞橫截面積明顯增大;免疫組織化學(xué)檢測(cè)LSD1蛋白表達(dá)量明顯降低且其下游蛋白表達(dá)量均升高;LSD1蛋白和mRNA的表達(dá)量均減少,LSD1下游組蛋白蛋白和mRNA的表達(dá)量均增加;心肌組織肌球蛋白輕鏈-2v、α-型肌紅素重鏈、心房利鈉肽蛋白及其mRNA表達(dá)量均升高(n=6,*P0.05,**P0.01,***P0.001)。二、心肌肥厚大鼠脂代謝水平及相關(guān)基因的變化血液代謝組檢測(cè)結(jié)果顯示:與Control組相比,ISO組和OG-L002組動(dòng)物體內(nèi)脂肪酸降解減少。Western Blot和實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)顯示:與Control組相比,ISO組和OG-L002組動(dòng)物體內(nèi)AGPS蛋白和mRNA的表達(dá)量均增加(n=6,**P0.01)。三、心肌肥厚大鼠氧化應(yīng)激水平的變化氧化應(yīng)激相關(guān)基因的變化:Western Blot和實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果顯示:與Control組相比,ISO組和OG-L002組動(dòng)物體內(nèi)Nrf2蛋白和mRNA的表達(dá)量均下降;Keap-1蛋白和mRNA的表達(dá)量均上升(n=6,*P0.05,**P0.01,***P0.001)。結(jié)論ISO持久激動(dòng)β-腎上腺素能受體,可能通過(guò)抑制LSD1的表達(dá)增加組蛋白甲基化水平導(dǎo)致心肌肥厚的發(fā)生。在ISO及LSD1抑制劑誘導(dǎo)的病理性心肌肥厚發(fā)生機(jī)制中出現(xiàn)能量代謝異常,脂肪酸降解減少,AGPS基因表達(dá)上調(diào),Nrf2表達(dá)下調(diào)。因此脂代謝紊亂及氧化應(yīng)激水平變化可能與LSD1改變誘發(fā)的病理性心肌肥厚的發(fā)生存在一定的聯(lián)系。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R542.2
【圖文】：

25圖 1.超聲心動(dòng)結(jié)果圖（A）及心功能檢測(cè)指標(biāo)圖（B）結(jié)果表明：與 Control 組相比，ISO 組和 OG-L002 組大鼠左心室室壁厚度增加（A），EF、FS 均升高，LVID 減小，LVM、LVPW 明顯增加（B）。Figure 1.The results of echocardiography and cardiac function test showed that comparedwith the control group , in ISO and OG-L002 groups the left ventricular wall thickness (A) wereincreased, Eject Fraction and Fraction Shortening increased, Left ventricular internal dimensiondiastolic decreased, Left ventricular Mass and Left ventricular posterior wall increasedsignificantly (B).2.1.2 大鼠心重比及心臟表型變化如圖 2 所示：與 Control 組相比，ISO 組和 OG-L002 組大鼠心重比（圖 2A）明顯增加，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（n=6，**P< 0.01）；ISO 組和 OG-L002 組大鼠心臟明顯增大（圖 2B）。結(jié)果表明，ISO 組大鼠出現(xiàn)了心肌肥厚的表征，

圖 2.大鼠心重比（A）及心臟表型的變化（B）果表明：心重比和心臟表型結(jié)果表明與 Control 組相比，ISO 組和 OG-L00心重比顯著增加（A）心臟明顯增大（B）（n=6，**P< 0.001，vs Cop）。igure 2.The results of cardiac weight ratio and cardiac phenotype showed that the cat ratio in ISO group and OG-L002 group increased significantly (A) compared witl group (B). The results were statistically significant（n=6，**P< 0.01,vs Conp）.3 心肌肥厚的組織學(xué)檢查結(jié)果圖 3H&E 染色結(jié)果所示：與 Control 組相比，ISO 組和 OG-L002 組大出現(xiàn)明顯肥厚現(xiàn)象，心肌細(xì)胞橫截面積增加，在組織學(xué)上證實(shí)了 ISO 和 均誘導(dǎo)大鼠出現(xiàn)心肌肥厚。

圖 2.大鼠心重比（A）及心臟表型的變化（B）果表明：心重比和心臟表型結(jié)果表明與 Control 組相比，ISO 組和 OG-L002 組心重比顯著增加（A）心臟明顯增大（B）（n=6，**P< 0.001，vs Contr）。igure 2.The results of cardiac weight ratio and cardiac phenotype showed that the cardit ratio in ISO group and OG-L002 group increased significantly (A) compared with tl group (B). The results were statistically significant（n=6，**P< 0.01,vs Contr）.3 心肌肥厚的組織學(xué)檢查結(jié)果圖 3H&E 染色結(jié)果所示：與 Control 組相比，ISO 組和 OG-L002 組大出現(xiàn)明顯肥厚現(xiàn)象，心肌細(xì)胞橫截面積增加，在組織學(xué)上證實(shí)了 ISO 和 OG 均誘導(dǎo)大鼠出現(xiàn)心肌肥厚。

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3 陶厚權(quán);葉再元;王元宇;王惠菊;何徐軍;馬英玉;夏英捷;;LSD1在胃癌中的表達(dá)及其意義[A];2009年浙江省外科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

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本文編號(hào)：2787424