【摘要】：目的:高遷移率族蛋白1(HMGB1)作為一種損傷相關分子模式分子(DAMPs),是一種促炎性細胞因子,當遇到微生物或其他危險信號時,能從免疫活性細胞中釋放到細胞外,通過激活模式識別受體(PRRs)如Toll樣受體4(TLR4)、高級糖基化終末產物受體(AGER)等參與氧化應激反應。HMGB1所在AGE氧化損傷通路與內皮功能紊亂存在關聯(lián)。動物實驗研究證實HMGB1通過激活TLR4參與了實驗性肺動脈高血壓的發(fā)生;另有研究證據提示隨著血漿HMGB1水平的增高,在非糖尿病人群和2型糖尿病患者中冠心病的發(fā)病風險都顯著增加。轉化生長因子β受體相關蛋白1(TGFBRAP1)是一種細胞質蛋白可以結合轉化生長因子β受體1(TGFBR1)并作為Smad4的分子伴侶分子,通過TGF-beta/Smad信號通路,幫助Smad4參與血管發(fā)育和血管重塑。在糖尿病動物模型中發(fā)現抗AGER抗體可以避免TGF-β的上調和腹膜處的纖維沉積,多項研究表明TGF-beta/Smad信號通路在胚胎造血發(fā)育中起作用,劉峰等發(fā)現TLR4-Myd88-NF-κB通路通過Notch信號對造血干細胞起調控作用,推測內皮功能紊亂與血管重塑存在關聯(lián),炎性信號與胚胎期造血干細胞可能存在關聯(lián),并且AGE氧化損傷通路和TGF-beta/Smad信號通路可能存在交互。我們前期研究已經對AGE氧化損傷通路的功能候選基因AGER基因、CRP基因、NOS3基因進行關聯(lián)研究,本課題組指導老師之前也對TGF-β信號通路的功能候選基因Emilin1基因、Furin基因、THSD1基因、Fibrillin1基因(FBN基因)、tgfbr1基因、tgfbr2基因以及相關的mirna上的單核苷酸多態(tài)性進行了關聯(lián)研究。因此本研究的目的是繼續(xù)討論age氧化損傷通路的hmgb1基因和tgf-β信號通路上的受體基因tgfbrap1基因的單核苷酸多態(tài)性與高血壓和血壓水平,相關的血漿分子標志物以及高血壓降壓藥物效果的關系。并探討兒童青少年心理行為問題對血壓的影響以及心理行為問題與hmgb1基因變異對兒童青少年血壓升高、血壓變化的交互作用。方法:兒童青少年人群采用病例對照研究方法,對例血壓升高組和例血壓正常組收集年齡、性別等流行病學信息,測量血壓,并檢測血糖(glu)、總膽固醇(tc)、甘油三酯(tg)等。用單因素、多因素logistic回歸分析篩選出血壓升高的相關因素。用2×4叉生分析表描述基因(hmgb1基因)與環(huán)境(行為異常傾向)的交互作用。成年人群采用病例對照研究方法,對2012例原發(fā)性高血壓病例和2210例對照收集年齡、性別等流行病學信息,測量血壓,并檢測血糖(glu)、總膽固醇(tc)、甘油三酯(tg)、高密度脂蛋白(hdl-c)、低密度脂蛋白(ldl-c)等。對成人研究發(fā)現的關聯(lián)位點進一步在兒童人群中進行驗證。hmgb1、tgfbrap1基因位點選擇采用連鎖不平衡分析和生物信息學的功能預測相結合的方法,選擇6個標簽單核苷酸多態(tài)性(tagsnps)并應用taqman技術進行基因分型。采用fisher精確概率法檢驗對照組基因型頻率是否符hardy—weinberg平衡,應用兩樣本t檢驗(計量資料)或卡方檢驗(計數資料)比較病例組和對照組間臨床特征和基因型分布的差異,以雙側概率p0.05為差異有統(tǒng)計學意義。用非條件logistic回歸模型(enter法)進行關聯(lián)性分析以校正混雜因素;采用一般線性模型分析血壓性狀與基因型之間的關系。對服用復方利血平、珍菊降壓片和降壓片的高血壓患者(780例)進行流行病學調查并收集臨床資料。結果:單因素logistic回歸分析兩個基因的6個tagsnps與高血壓的關聯(lián)均無統(tǒng)計學意義。分別對兩個基因各3個標簽snp(tagsnps)構建單體型進行分析,結果顯示,校正混雜因素后,hmgb1基因、tgfbrap1基因單體型與高血壓的關聯(lián)無統(tǒng)計學意義。進一步分層分析,結果顯示,校正協(xié)變量(年齡、性別、bmi、tc、tg、hdl、ldl、glu、吸煙、飲酒等)后,≥55歲人群中,hmgb1基因的rs2249825位點的變異與高血壓的關聯(lián)性有統(tǒng)計學意義,相加模型的or(95%ci)值為1.208(1.029-1.417)顯性模型的or(95%ci)值為1.212(1.020-1.441)。血壓數量性狀分析結果顯示,在高血壓非用藥組和對照組中,校正協(xié)變量后,不同基因型之間舒張壓(dbp)隨rs2249825位點變異呈線性下降的趨勢,p值分別為0.002,0.034。同時,rs1045411不同基因型之間dbp的差異有統(tǒng)計學意義(p=0.015)。服用復方利血平的高血壓病人中,rs1412125位點與舒張壓水平呈線性負相關,攜帶cc等位基因的病人dbp水平明顯低于tt和tc等位基因,調整混雜因素后p值為0.040。對tgfbrap1基因的關聯(lián)分析結果顯示,不同基因型之間舒張壓(dbp)隨rs2679860位點變異呈線性下降的趨勢,p值為0.005。正態(tài)分布的tgf-beta1的平方根值隨rs2679860位點變異呈線性增長的趨勢,p值為0.042。在兒童人群中,多因素logistic回歸分析顯示女性(or=1.366)、tg升高(or=1.846)、超重(or=2.081)、肥胖(or=2.296)是兒童青少年血壓升高的危險因素,可升高高血壓的發(fā)病危險。農村人口(or=0.367)、小學高年級(or=0.533)是兒童青少年血壓升高的保護因素。血壓z-評分的數量性狀分析,結果顯示在城市兒童,rs1045411各基因型之間sbp的z-評分和dbp的z-評分的差異均有統(tǒng)計學意義,p值分別為0.043和0.006。rs2679860攜帶aa基因型的dbp的z-評分低于攜帶ag+gg基因型(p=0.040),但是遺傳效應的方向與成人人群相反。在男性兒童人群中hmgb1基因rs1045411位點的變異與血壓升高有關聯(lián)性,or(95%ci)為0.656(0.445-0.968),p值為0.034。同時發(fā)現rs1045411的變異與血壓升高之間的相互作用受到心理行為問題的修飾調節(jié)�；�-環(huán)境交互作用無統(tǒng)計學意義的關聯(lián)。服用珍菊降壓片的女性高血壓病人中,收縮壓隨著rs1045411的ga改變和rs2249825的CG改變都有明顯的下降,校正混雜因素后P值分別為0.044,0.043。服用降壓片的≥55歲人群中,rs2249825位點不同基因型之間的收縮壓存在顯著差異,校正協(xié)變量后仍差異仍有統(tǒng)計學意義(P=0.048)。結論:HMGB1基因多態(tài)性與高血壓和舒張壓水平有關聯(lián),并且年齡調節(jié)了這種遺傳效應;HMGB1基因多態(tài)性可能影響復方利血平、珍菊降壓片和降壓片的降壓效果;rs1045411的變異與血壓升高之間的相互作用受到心理行為問題的修飾調節(jié)。心理行為問題對兒童青少年血壓升高存在顯著作用。TGFBRAP1基因多態(tài)性與舒張壓水平和血漿TGF-beta1水平有顯著關聯(lián)。rs2679860的變異可能通過調節(jié)血漿TGF-beta1水平而影響了TGF-beta1對血壓的調節(jié)作用。
【學位授予單位】：皖南醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R544.1;B842

【參考文獻】

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本文編號：2773070