【摘要】：目的肺動(dòng)脈高壓是慢性肺部疾病常見并發(fā)癥。肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞異常增殖引起的肺血管重塑在肺動(dòng)脈高壓的形成機(jī)制中起著關(guān)鍵作用。雖然治療潛在的肺部疾病可以降低輕度的肺動(dòng)脈壓力升高,但終末期肺病的肺動(dòng)脈高壓仍難以逆轉(zhuǎn)。目前特發(fā)性肺動(dòng)脈高壓和慢性肺病所致肺動(dòng)脈高壓的治療藥物在臨床試驗(yàn)中并未取得理想的效果。有研究表明中藥丹參的有效成分-丹參酮ⅡA用于治療肺動(dòng)脈高壓可以降低平均肺動(dòng)脈壓力,緩解臨床癥狀、增加運(yùn)動(dòng)耐量,但具體機(jī)制不明。本研究通過觀察丹參酮ⅡA磺酸鈉(sodium tanshinoneⅡA sulfonate,STS)干預(yù)對(duì)低氧狀態(tài)下大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)增殖的影響并進(jìn)一步探討其分子機(jī)制。方法(1)大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞株傳代后隨機(jī)分為常氧組、常氧+STS組(5ng/ml、10ng/ml、20 ng/ml)、低氧組、低氧+STS組(5 ng/ml、10ng/ml、20 ng/ml)。用CCK-8分別測(cè)定各組的吸光度值代表肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的增殖率。(2)同上述培養(yǎng)方法,將肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞隨機(jī)分為常氧組、低氧組和低氧+STS組(10ng/ml),通過熒光定量PCR法分別測(cè)定各組細(xì)胞mTOR、eIF2α、c-myc mRNA的相對(duì)表達(dá)量。(3)培養(yǎng)方法與上述一致,常氧和低氧下將肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞隨機(jī)分組培養(yǎng),設(shè)常氧組、低氧組、低氧+STS組(10 ng/ml)、低氧+雷帕霉素組(20 nmol/L),采用蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)各組細(xì)胞mTOR、p-mTOR、eIF2α、p-eIF2α、c-myc蛋白表達(dá)量。結(jié)果(1)與常氧組比較,低氧組細(xì)胞的增殖率明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.05);與低氧組比較,STS干預(yù)后的低氧組細(xì)胞增殖率明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.05)。然而,與常氧組比較,常氧+STS組細(xì)胞增殖率無明顯差別,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(2)通過PCR檢測(cè)分析顯示:與常氧組比較,低氧組細(xì)胞mTOR、eIF2α和c-myc mRNA的相對(duì)表達(dá)量明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均㩳0.05);與低氧組比較,低氧+STS組的三種mRNA相對(duì)表達(dá)量下降,其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均㩳0.05)。(3)Western blotting法檢測(cè)各組細(xì)胞蛋白表達(dá):與常氧組比較,低氧組細(xì)胞mTOR、p-mTOR、eIF2α、p-e IF2α、c-myc蛋白表達(dá)均顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均㩳0.05);低氧+STS組和低氧+雷帕霉素組mTOR、mTOR、t-eIF2α、p-eIF2α、c-myc蛋白表達(dá)較低氧組均升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均㩳0.05);而低氧+雷帕霉素組與低氧+STS組的蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論(1)低氧可以上調(diào)mTOR、eIF2a、c-myc蛋白而促進(jìn)大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖,從而誘發(fā)肺動(dòng)脈高壓。(2)丹參酮ⅡA磺酸鈉可以經(jīng)mTOR信號(hào)通路,減少eIF2a及c-myc蛋白表達(dá)水平,抑制低氧誘導(dǎo)的大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖,對(duì)肺動(dòng)脈高壓有潛在的治療作用。
【學(xué)位授予單位】：江蘇大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R544.1
【圖文】：

3.1 肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖情況的比較在未給予 STS 干預(yù)處理的情況下，與常氧組比較，低氧條件下平滑肌細(xì)的增殖水平呈現(xiàn)出顯著升高的趨勢(shì)（P㩳0.05），說明低氧可促進(jìn)大鼠肺動(dòng)脈肌細(xì)胞增殖。而給予 STS 干預(yù)處理常氧和低氧下培養(yǎng)的平滑肌細(xì)胞后的增殖況：與低氧組比較，低氧下的平滑肌細(xì)胞經(jīng) STS（5 ng/ml、10 ng/ml、20 n干預(yù)處理 60 小時(shí)后的增殖水平呈現(xiàn)下降趨勢(shì)（P㩳0.05），說明 STS 對(duì)低氧平滑肌細(xì)胞增殖有抑制作用，而且隨著 STS 濃度增加，抑制增殖的作用逐漸強(qiáng)，呈濃度依賴性。與常氧組比較，常氧下的平滑肌細(xì)胞經(jīng) STS（5 ng/ml、10 n干預(yù) 60 小時(shí)后的增殖水平（P㧐0.05）無明顯下降，但 STS 濃度達(dá)到 20 ng細(xì)胞增殖水平呈現(xiàn)明顯減少趨勢(shì)，考慮此濃度的 STS 對(duì)細(xì)胞有毒性作用，因接下來均選擇藥物濃度為 10 ng/ml 的 STS 用于實(shí)驗(yàn)。（見圖 3.1）

丹參酮ⅡA 磺酸鈉對(duì)低氧誘導(dǎo)的大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖抑制作用及其機(jī)制研究胞加入 STS（10ng/mL）。采用實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 檢測(cè) mTOR、eIF2α、c-myc mRNA的相對(duì)表達(dá)量，其結(jié)果顯示：與常氧組比較，mTOR、 eIF2α 和 c-myc mRNA 在低氧培養(yǎng)的肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的相對(duì)表達(dá)量明顯升高（P㩳0.05），表明低氧能夠促進(jìn)平滑肌細(xì)胞高表達(dá)三種基因的 mRNA；而與低氧組比較，STS 處理低氧培養(yǎng)的平滑肌細(xì)胞后 mTOR、eIF2α、c-myc mRNA 相對(duì)表達(dá)量呈現(xiàn)下降（P㩳0.05），表明 STS 能抑制低氧下平滑肌細(xì)胞的 mTOR、eIF2α、c-myc mRNA 高表達(dá)。（見圖 3.2）

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 宿夢(mèng)琦;楊紅;饒懸;周長(zhǎng)林;竇潔;;低氧誘導(dǎo)蛋白與腫瘤發(fā)生發(fā)展的研究進(jìn)展[J];藥物生物技術(shù);2018年04期

2 王瓊;盧慕峻;;低氧誘導(dǎo)成體干細(xì)胞血管化[J];組織工程與重建外科雜志;2015年04期

3 殷愛紅;武文琦;何麗明;鄭少鵬;;低氧誘導(dǎo)人VEGF基因表達(dá)載體的構(gòu)建及其蛋白表達(dá)檢測(cè)[J];山東醫(yī)藥;2011年52期

4 劉江;吳巍;何衛(wèi)美;朱偉華;劉春燕;董權(quán);鄒偉華;李偉平;;低氧誘導(dǎo)的非酒精性脂肪性肝炎動(dòng)物模型的構(gòu)建[J];浙江醫(yī)學(xué);2014年07期

5 李兵;趙黎明;王海青;王桂芳;修清玉;;低壓低氧誘導(dǎo)大鼠阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征后咽部肌肉結(jié)構(gòu)和功能的改變[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2006年04期

6 楊磊;鄭金旭;史小東;錢海;孫金玲;;丹參酮ⅡA磺酸鈉抑制低氧誘導(dǎo)的大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖及其機(jī)制[J];江蘇大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2018年03期

7 龐靜雯;吳亞霖;徐婷;莊秀妹;;低氧誘導(dǎo)人牙周膜成纖維細(xì)胞凋亡的研究[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2017年09期

8 殷愛紅;武文琦;崔世軍;滕旭;鄭少鵬;;低氧誘導(dǎo)VEGF基因表達(dá)載體治療家兔肢體缺血性疾病的實(shí)驗(yàn)研究[J];首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2012年03期

9 林紅,蔡英年,鄧希賢,李世強(qiáng),梁兵,周曉梅,蔡起薔,楊燕芬;低氧誘導(dǎo)肺血管平滑肌細(xì)胞誘生型一氧化氮合酶基因表達(dá)[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;1997年03期

10 馬子敏,楊曦明,洪欣,孫興斌,謝印芝;低氧誘導(dǎo)法培養(yǎng)大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞[J];航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程;2000年05期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 師永紅;王玉湘;宮麗華;吳巖;石艷春;方偉崗;;bFGF和低氧誘導(dǎo)VEGF分泌的作用機(jī)制及其信號(hào)通路[A];第四屆中國(guó)腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)暨第五屆海峽兩岸腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議教育集[C];2006年

2 康裕建;;銅離子調(diào)節(jié)低氧誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子活性的機(jī)制及應(yīng)用[A];第八屆全國(guó)醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)第五屆全國(guó)臨床應(yīng)用生物化學(xué)與分子生物學(xué)2013華東六省一市生物化學(xué)與分子生物學(xué)聯(lián)合學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2013年

3 王嬙;顧鐳;王艷艷;沈友軒;張繆佳;;Stats激活對(duì)低氧誘導(dǎo)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞凋亡的影響[A];第17次全國(guó)風(fēng)濕病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2012年

4 劉婷;李運(yùn)成;賀斌峰;王關(guān)嵩;;S100A4/Mts1在低氧誘導(dǎo)肺動(dòng)脈平滑肌中的作用機(jī)制[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)年會(huì)——2011（第十二次全國(guó)呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議）論文匯編[C];2011年

5 尚俊依;李爾然;王秋月;康健;;低氧誘導(dǎo)AQP1表達(dá)的分子機(jī)制[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)年會(huì)——2011（第十二次全國(guó)呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議）論文匯編[C];2011年

6 聶欣;施熠煒;許建英;杜永成;;KLF4在低氧誘導(dǎo)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖及表型轉(zhuǎn)化中的作用研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)年會(huì)——2013第十四次全國(guó)呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

7 杜繼曾;陳學(xué)群;;CRFR1受體調(diào)節(jié)低氧誘導(dǎo)的腦-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡(luò)反應(yīng)[A];2008年神經(jīng)內(nèi)分泌暨神經(jīng)免疫內(nèi)分泌學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編[C];2008年

8 梁燕;繆冉;王望;王穎;黃驍舾;王軍;王辰;;抑制Notch3通過降低庫(kù)容性鈣內(nèi)流抑制低氧誘導(dǎo)的人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)年會(huì)——2013第十四次全國(guó)呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

9 陳銳;劉春風(fēng);;慢性間歇低氧誘導(dǎo)小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的機(jī)制探討[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)年會(huì)——2011（第十二次全國(guó)呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議）論文匯編[C];2011年

10 顧鐳;王嬙;梅煥平;沈友軒;張繆佳;;自體吞噬抑制劑3-MA對(duì)低氧誘導(dǎo)肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響[A];第17次全國(guó)風(fēng)濕病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2012年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前1條

1 汪敏 章米力;低氧誘導(dǎo)白血病細(xì)胞分化[N];健康報(bào);2005年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 蔣蕊;新奇型蛋白激酶C在低氧誘導(dǎo)的肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖中的作用和機(jī)制研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2018年

2 曾超;經(jīng)典型蛋白激酶C亞型對(duì)低氧誘導(dǎo)的小鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖的影響及機(jī)制探討[D];山西醫(yī)科大學(xué);2018年

3 張曉萍;ABCA1對(duì)低氧誘導(dǎo)的肺動(dòng)脈高壓的影響及其機(jī)制研究[D];鄭州大學(xué);2018年

4 范亮;低氧誘導(dǎo)的肺癌局部腎素—血管緊張素系統(tǒng)失衡及其對(duì)肺癌侵襲影響研究[D];上海交通大學(xué);2012年

5 郭黎;低氧誘導(dǎo)通路相關(guān)基因的單核苷酸多態(tài)性和急性高山病的關(guān)聯(lián)研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

6 張衛(wèi)芳;LOX-1在低氧誘導(dǎo)肺動(dòng)脈高壓肺血管重構(gòu)中的作用及機(jī)制[D];中南大學(xué);2013年

7 李強(qiáng);低氧誘導(dǎo)成骨細(xì)胞增殖分化兩種機(jī)制的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2016年

8 �，�;MiR-375在低氧誘導(dǎo)的肝癌細(xì)胞自噬中的作用和機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2012年

9 呂順艷;血管鈉肽對(duì)低氧誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞、心成纖維細(xì)胞以及血管平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制調(diào)節(jié)[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2002年

10 孫慶佳;周期性低氧誘導(dǎo)喉癌細(xì)胞化療抵抗的作用機(jī)制[D];吉林大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 楊磊;丹參酮ⅡA磺酸鈉抑制低氧誘導(dǎo)的大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖的體外研究[D];江蘇大學(xué);2018年

2 鄧捚;吳茱萸次堿對(duì)低氧誘導(dǎo)的人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的作用及機(jī)制研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2018年

3 楊?yuàn)?自噬在低氧誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞凋亡中的作用[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2018年

4 魏伊藍(lán);胞外熱休克蛋白90α在低氧誘導(dǎo)的非小細(xì)胞肺癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用與機(jī)制研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2018年

5 孟威;低氧誘導(dǎo)雪旺細(xì)胞AQP1表達(dá)機(jī)制的相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2017年

6 李彩霞;青心酮對(duì)低氧誘導(dǎo)的人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖的影響[D];南華大學(xué);2013年

7 于文燕;蛋白激酶Cα在低氧誘導(dǎo)的大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖中的作用機(jī)制[D];山西醫(yī)科大學(xué);2013年

8 王凡;低氧誘導(dǎo)的miR-147a通過靶向HIF-3α影響細(xì)胞增殖[D];清華大學(xué);2016年

9 李東峰;MicroRNA-24抑制低氧誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡的初步研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2009年

10 董小銣;HUMMR在低氧誘導(dǎo)神經(jīng)元線粒體損傷中的作用研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

本文編號(hào)：2768334