【摘要】：目的及意義:探討胰高血糖素樣肽-1受體激動劑(GLP-1)利拉魯肽對PCI術(shù)后血清誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVECs)炎癥損傷的保護作用及相關(guān)機制。方法復(fù)蘇并培養(yǎng)凍存的人臍靜脈內(nèi)皮細胞,取3-5代細胞進行實驗,用PCI術(shù)后患者血清誘導(dǎo)HUVECs炎癥損傷建立內(nèi)皮細胞炎癥反應(yīng)模型并設(shè)陰性對照組,然后予利拉魯肽進行干預(yù)并分組進行研究。以MTT法檢測不同濃度利拉魯肽干預(yù)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞的活性,并計算各組細胞的增殖率、測LDH漏出率;硝酸還原酶法測定各組細胞培養(yǎng)液上清中的一氧化氮(NO)含量和比色法測定NOS活性;ELISA法測定處理后各組的培養(yǎng)上清液中細胞炎癥因子MCP-1、s VCAM-1、s ICAM-1、IL-1和IL-6的含量;RT-q PCR檢測細胞凋亡相關(guān)基因Bcl-2和Bax的表達;Western-blot檢測PKA和NF-κB p65活化水平。結(jié)果:PCI術(shù)后血清組的細胞炎癥因子MCP-1、VCAM-1、ICAM-1、IL-1和IL-6,細胞凋亡因子基因Bcl-2和Bax表達較陰性對照組增加(P0.05),利拉魯肽處理組與PCI術(shù)后血清組相比較,MCP-1、VCAM-1、ICAM-1、IL-1和IL-6,細胞凋亡因子Bcl-2和Bax明顯下降(P0.05);PCI術(shù)后血清組的NO含量和NOS活性較陰性對照組明顯下降(P0.05),利拉魯肽處理組較PCI術(shù)后血清組的NO含量和NOS活明顯上升(P0.05);利拉魯肽處理組較PCI術(shù)后血清組的LDH泄漏率顯著降低(P0.01);PCI術(shù)后患者血清組的NF-κB蛋白的活化水平明顯上升,而PKA蛋白的活化水平明顯降低;而利拉魯肽能夠抑制NF-κB p65的活化水平并且促進PKA的活化水平。結(jié)論:利拉魯肽對PCI術(shù)后血清致人臍靜脈內(nèi)皮細胞的炎癥損傷具有保護作用,且其作用是可能通過利PKA/NF-κB信號通路調(diào)節(jié)實現(xiàn)的。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R541.4
【圖文】：

圖 1 復(fù)蘇培養(yǎng)至第 3 代的人臍靜脈內(nèi)皮細胞bilical vein endothelial cells recovered and cultured

圖2 MTT法繪制的不同濃度利拉魯肽處理對臍靜脈內(nèi)皮細胞增殖的影響Fig 2 Effects of different concentrations of liraglutide on the proliferation of HUVEC using MT表 1 不同濃度利拉魯肽處理臍靜脈內(nèi)皮細胞 24 h 后對細胞增殖率的影響組別 增殖率0 nM 利拉魯肽 22%1 nM 利拉魯肽 30%10 nM 利拉魯肽 39%100 nM 利拉魯肽 55%2 利拉魯肽對 PCI 術(shù)后靜脈內(nèi)皮細胞凋亡的影響為了進一步研究利拉魯肽如何促進細胞的增殖以及利拉魯肽處I 術(shù)后患者血清細胞凋亡的影響，本論文通過對 PCI 術(shù)后不同時間患行利拉魯肽干預(yù)處理，并對處理 24 h 和 48 h 后的細胞凋亡情況進

【參考文獻】

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本文編號：2741119