【摘要】：實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^檢測(cè)免疫相關(guān)性全血細(xì)胞減少癥(IRP)患者外周血輔助性T細(xì)胞9(Th9)數(shù)量、細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-9(IL-9)的水平,以及Th9細(xì)胞分化相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子PU.1、BATF mRNA相對(duì)表達(dá)量。探究Th9細(xì)胞在IRP的發(fā)病機(jī)制中的作用,尋找IRP新的潛在的治療靶點(diǎn)。材料和方法:選取2017年7月至2018年1月在天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院被診斷為IRP的患者有50例,其中初治組30例、緩解組20例,另外選取20名健康人作為對(duì)照組。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組外周血Th9細(xì)胞(CD3+CD4+IL-9+)占CD3+CD4+細(xì)胞百分比;ELISA法檢測(cè)各組血清IL-9水平。RT-PCR方法檢測(cè)各組CD4+細(xì)胞中Th9細(xì)胞分化相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子PU.1,BATF的mRNA相對(duì)表達(dá)量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:1.流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定IRP患者外周血Th9細(xì)胞(CD3~+CD4~+IL-9~+)占CD3~+CD4~+細(xì)胞百分率,IRP患者初治組為(2.73±1.96)%,緩解組為(1.21±0.86)%,對(duì)照的為(0.68±0.40)%。在IRP患者初治組中Th9細(xì)胞的百分率明顯高于緩解組(p0.001),緩解組明顯高于對(duì)照組(p0.05),初治組明顯高于對(duì)照組(p0.01)。2.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法定量檢測(cè)血清IL-9水平,在IRP患者初治組外血清IL-9水平為(183.91±112.42)pg/ml,緩解組為(105.96±64.79)pg/ml,對(duì)照組為(56.03±14.49)pg/ml;初治明顯高于緩解組(p0.01),初治組明顯高于對(duì)照組(p0.001),緩解組也明顯高于對(duì)照組(p0.01)。3.RT-PCR方法檢測(cè)外周血CD4~+細(xì)胞中PU.1、BATF mRNA的相對(duì)表達(dá)量,IRP初治組PU.1的相對(duì)表達(dá)量為117.30±82.33,緩解組為45.46±33.22,對(duì)照組為19.07±13.56;初治組PU.1的相對(duì)表達(dá)量明顯高于緩解組(p0.001),初治組明顯高于對(duì)照組(p0.01),緩解組明顯高于對(duì)照組(p0.01);IRP初治組BATF的相對(duì)表達(dá)量為608.57±517.68,緩解組為238.89±206.80,對(duì)照組為134.71±113.31,初治組明顯高于緩解組(p0.01),初治組明顯高于對(duì)照組(p0.001),緩解組與對(duì)照組之間無顯著性差異(p0.05)。4.IL-9水平與臨床指標(biāo)的相關(guān)性分析,IL-9水平與血紅蛋白(p0.01,r=-0.457),紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(p0.05,r=0.467),血小板計(jì)數(shù)(p0.05,r=-0.297),白細(xì)胞計(jì)數(shù)(p0.05,r=-0.227)呈負(fù)相關(guān);血清IL-9濃度與CD5~+CD19~+/CD19+細(xì)胞的百分比(p0.05,r=0.376)和CD19+細(xì)胞的百分比(p0.05,r=0.318)均呈正相關(guān)。5.Th9細(xì)胞占CD3~+CD4~+T細(xì)胞的百分比與臨床指標(biāo)的相關(guān)性分析,Th9細(xì)胞在外周血中占CD3~+CD4~+細(xì)胞的百分比與血紅蛋白(p0.05,r=-0.366)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(p0.05,r=-0.364)、血小板計(jì)數(shù)(p0.05,r=-0.457)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)(p0.05,r=-0.418)呈負(fù)相關(guān)。Th9細(xì)胞百分比與CD5~+CD19~+/CD19~+細(xì)胞的百分比(p0.05,r=0.377)和CD19~+細(xì)胞的百分比(p0.001,r=0.835)均呈正相關(guān)。結(jié)論:1.IRP患者外周血中Th9細(xì)胞占CD3~+CD4~+細(xì)胞的百分比較對(duì)照組顯著增高;2.IRP患者外周血血清中IL-9水平明顯高于對(duì)照組;3.IRP患者與Th9細(xì)胞相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子PU.1和BATF的mRNA均明顯高于對(duì)照組;4.IRP患者血清中IL-9水平與Hb、WBC、RBC、PLT呈負(fù)相關(guān),與CD19~+細(xì)胞的百分比、CD5~+CD19~+/CD19~+細(xì)胞的百分比呈正相關(guān);5.IRP患者外周血中Th9細(xì)胞占CD3~+CD4~+細(xì)胞的百分比與Hb、WBC、RBC、PLT呈負(fù)相關(guān),與CD19~+細(xì)胞的百分比、CD5~+CD19~+/CD19~+細(xì)胞的百分比呈正相關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R558.2
【圖文】：

天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文16圖-2 流式細(xì)胞術(shù)中TH9細(xì)胞(CD3+CD4+IL-9+)的流式示意圖(2A和2B為初治者；2C和2D為緩解者，2E和2F為對(duì)照者）

初治 緩解 對(duì)照0100200300400500*******IL-9(pg/ml)圖-3 外周血血清中IL-9水平CD4+細(xì)胞磁珠分選純度測(cè)定如圖-4，F(xiàn)CM檢測(cè)免疫磁珠分選CD4+細(xì)胞的純度達(dá)到98.21%。

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本文編號(hào)：2733625