【摘要】：目的:原發(fā)性高血壓往往伴有交感神經(jīng)系統(tǒng)過度興奮,并引起多種內(nèi)源性的神經(jīng)內(nèi)分泌和細(xì)胞因子的激活,其激活又促進(jìn)心血管重塑,從而形成惡性循環(huán)。中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥表達(dá)與心血管中樞活動(dòng)增強(qiáng)密切相關(guān),并可明顯改變外周交感神經(jīng)的活動(dòng)。小膠質(zhì)細(xì)胞在調(diào)節(jié)免疫炎癥反應(yīng),維持大腦穩(wěn)態(tài)過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用,在身體某些病理刺激下,可以出現(xiàn)不同程度激活,產(chǎn)生并釋放炎癥因子。硫化氫(Hydrogen sulfide,H_2S)是參與心血管系統(tǒng)功能調(diào)節(jié)的新型氣體信號(hào)分子,具有改善高血壓,中樞神經(jīng)系統(tǒng)保護(hù)等功能。本實(shí)驗(yàn)采用SHR高血壓模型,通過側(cè)腦室顯微注射H_2S供體緩釋劑GYY4137,觀察其是否改善自發(fā)性高血壓大鼠血壓及其中樞炎癥反應(yīng),并探討其相關(guān)機(jī)制。方法:1.實(shí)驗(yàn)分組:動(dòng)物:采用雄性自發(fā)性高血壓大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)、京都Wistar大鼠(Wistar-Kyoto rats,WKY),周齡8周,體重280~300g,隨機(jī)分為四組:WKY+aCSF(artificial cerebrospinal fluid,人工腦脊液)組、WKY+GYY4137組、SHR+aCSF組、SHR+GYY4137組。2.側(cè)腦室置管取8周齡性SHR大鼠和WKY大鼠,根據(jù)PaxinosWatson大鼠腦立體定位圖譜,位于前囟向后0.8mm,旁開1.5mm,確定側(cè)腦室體表位點(diǎn),緩慢置入不銹鋼導(dǎo)管,旋緊螺帽并固定。3.記錄血壓、心率、RSNA行右側(cè)股動(dòng)脈插管、雙極鉑金電極懸掛左側(cè)腎交感神經(jīng),接Powerlab生物信號(hào)采集系統(tǒng),記錄血壓、心率和腎神經(jīng)放電活動(dòng)。4.植入子植入植入子植入手術(shù)后5-7天,于標(biāo)準(zhǔn)頻率1kHz下應(yīng)用PowerLab生物信息采集系統(tǒng)(ML880;ADInstruments)記錄動(dòng)物清醒狀態(tài)下血壓。心率依據(jù)動(dòng)脈血壓搏動(dòng)計(jì)算。5.免疫熒光腦組織經(jīng)多聚甲醛固定、脫水、透明、石蠟包埋,PVN和RVLM切片處理,通過免疫熒光共聚焦標(biāo)記ED-1(一種小膠質(zhì)細(xì)胞活動(dòng)的標(biāo)志)和IL-1β,觀察其表達(dá)狀況。6.western blot技術(shù)通過western blot技術(shù)檢測下丘腦室旁核(nucleus paraventricularis,PVN)區(qū)NLRP3炎性小體通路相關(guān)蛋白NLRP3,Caspase-1,IL-1β表達(dá)情況。結(jié)果:1.麻醉狀態(tài)下,SHR組血壓(SBP,DBP,MAP)明顯高于WKY組,側(cè)腦室急性給予GYY4137后可明顯降低SHR組血壓和腎交感神經(jīng)放電活動(dòng)(SBP 190.60±6.55 vs.167.40±7.39 mmHg,P0.05;DBP124.60±7.43 vs.106.60±6.08 mmHg,P0.05;MAP 146.60±7.0 vs.126.86±6.28 mmHg,P0.05;ΔRSNA 187.50±9.02%vs.110.68±7.12%,P0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,心率(HR 329±8.44 vs.326.60±7.54 bpm,P0.05)無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2.清醒狀態(tài)下,SHR組動(dòng)脈血壓SBP明顯高于WKY組,給予GYY4137治療6周明顯降低SHR組血壓和腎交感神經(jīng)放電活動(dòng)(SBP173.94±0.49 vs.156.64±2.62 mmHg,P0.05;ΔRSNA 160.40±3.76%vs.128.80±3.02%,P0.05),WKY組無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(SBP 115.94±1.29 vs.110.30±2.55 mmHg,P0.05;ΔRSNA 100%vs.92.50±4.81%,P0.05)。3.免疫熒光結(jié)果顯示,SHR組大鼠PVN以及RVLM區(qū)小膠質(zhì)細(xì)胞激活標(biāo)志物ED1和炎癥因子IL-1β表達(dá)明顯上調(diào),慢性給予外源性GYY4137補(bǔ)充后,明顯下調(diào)上述蛋白表達(dá)。4.SHR組大鼠PVN區(qū)NLRP3炎性小體通路相關(guān)蛋白NLRP3,Caspase-1,IL-1β表達(dá)相比于WKY組明顯上調(diào),慢性外源性給予GYY4137后,NLRP3,Caspase-1,IL-1β表達(dá)明顯下調(diào),對(duì)WKY組無明顯影響。結(jié)論:外源性給予硫化氫可以降低自發(fā)性高血壓大鼠血壓及減弱交感神經(jīng)放電活動(dòng),其作用可能是通過抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)小膠質(zhì)細(xì)胞和NLRP3炎癥小體的激活來實(shí)現(xiàn)的。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R544.1
【圖文】：

側(cè)腦室急性給予GYY4137對(duì)各組大鼠血壓、心率和腎神經(jīng)放電的影響

28 6.側(cè)腦室給予 GYY4137 抑制 PVN 區(qū) NLRP3 炎性小體通路蛋白的Fig.6 Intracerebroventricular infusion of GYY4137 inhibits inflammaspathway protein expression in PVN in SHR. (a)(b)(c) Downregulation eof chronic GYY4317 treatment on the expression of NLRP3, Caspase-1IL-1β in PVN in SHR. Data is shown as means ± SEM. *P<0.05 vs. W#P<0.05 vs. SHR+ aCSF (n=12)

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 Guoliang Meng;Jing Wang;Yujiao Xiao;Wenli Bai;Liping Xie;Liyang Shan;Philip K Moore;Yong Ji;;GYY4137 protects against myocardial ischemia and reperfusion injury by attenuating oxidative stress and apoptosis in rats[J];The Journal of Biomedical Research;2015年03期

本文編號(hào)：2723241