【摘要】：低水平的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激能通過誘導(dǎo)未折疊蛋白反應(yīng)對細胞起到保護作用,但病理性、慢性內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激往往導(dǎo)致組織功能障礙并引發(fā)多種疾病,如神經(jīng)退行性疾病、炎癥性疾病、癌癥和心血管疾病等。據(jù)報告顯示心血管疾病是當今社會危害人類健康的主要疾病,越來越多的研究表明內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激是心血管疾病發(fā)生、發(fā)展和臨床進展過程中的一個重要事件。IRE1α是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激感受器,在緩解內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、決定細胞命運與調(diào)節(jié)細胞內(nèi)環(huán)境平衡中具有重要的功能。本論文著重研究內(nèi)皮細胞中IRE1α在血管損傷后再內(nèi)皮化過程中的調(diào)控機制。首先我們構(gòu)建了內(nèi)皮細胞IRE1α特異性敲除的小鼠,然后對小鼠實施股動脈損傷手術(shù)與頸動脈損傷手術(shù),觀察小鼠手術(shù)后內(nèi)膜新生的程度。HE染色結(jié)果表明IRE1α的敲除會促進內(nèi)皮損傷誘導(dǎo)平滑肌細胞的增生,導(dǎo)致血管再狹窄加重。Evans blue染色與主動脈環(huán)實驗顯示內(nèi)皮細胞IRE1α的缺失會使再內(nèi)皮化程度降低。隨后在體外,我們以HUVEC細胞為研究對象,利用siRNA敲低IRE1α在內(nèi)皮細胞中的表達來研究IRE1α對內(nèi)皮細胞的調(diào)控機制。研究結(jié)果顯示IRE1α的缺失會抑制內(nèi)皮細胞的增殖并引起細胞周期的阻滯,Transwell與tube formation實驗表明IRE1α的缺失還會抑制內(nèi)皮細胞的遷移和血管形成。通過以上研究,我們發(fā)現(xiàn)內(nèi)皮細胞中IRE1α在再內(nèi)皮化過程中的調(diào)控機制,IRE1α的敲除能抑制內(nèi)皮細胞的增殖、遷移和血管生成,進而使內(nèi)皮損傷后的再內(nèi)皮化程度降低,從而引起內(nèi)膜新生,加重血管的再狹窄率。之前有關(guān)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對血管功能的重要影響主要集中在血管平滑肌上。本文首次對IRE1α在內(nèi)皮中的功能作了簡單闡述,證明作為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的感受器,IRE1α能夠直接調(diào)控內(nèi)皮細胞的增殖與遷移,這些將直接影響血管修復(fù)后的再內(nèi)皮化過程。
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R543
【圖文】：

.2 UPR 中三條信號通路簡介在酵母中，UPR 僅由一個信號通路控制，由 IRE1p（inositol-requiring prote的 I 型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)跨膜蛋白介導(dǎo)[10]。在高等真核生物中，UPR 由三類不同的跨膜應(yīng)受器介導(dǎo)，包括 IRE1α和 IRE1β、PEKR[double-strandedRNA-activatedproteinkinaKR) likeERkinase]、ATF6α 和 ATF6β（activatingtranscriptionfactor6）。這三個 UP支控制特定轉(zhuǎn)錄因子的表達和信號事件，調(diào)節(jié)各種 UPR 下游反應(yīng)，協(xié)調(diào)對 ER 的適應(yīng)。在生理條件下，IRE1α、PERK 和 ATF6 與 Bip/GRP78（Bindimunoglobulinprotein）結(jié)合，處于未激活狀態(tài)（圖 1.1.）。在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激時，BIP 些感應(yīng)蛋白解離并被招募到未折疊或錯誤折疊的蛋白質(zhì)中，引發(fā) 3 條不同的 UP徑[11]。未折疊蛋白也可以直接結(jié)合到 IRE1α 和 PERK，導(dǎo)致二聚化、寡聚化，終激活 UPR[12,13]。一旦激活，這些反應(yīng)會降低蛋白質(zhì)合成，并誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄程序來內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的蛋白折疊能力從而解決壓力[14]。

圖 1.2. IRE1 活性示意圖。用酵母 IRE1C 端胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域的晶體結(jié)構(gòu)來表征單體、二聚體和多聚物的形態(tài)。IRE1 以單體形式存在于內(nèi)腔，單體的反式自磷酸化導(dǎo)致蛋白質(zhì)的二聚化和寡聚化。IRE1 的二聚形式也可以在沒有磷酸化事件的情況下形成。根據(jù)應(yīng)激程度的不同，細胞反應(yīng)也不同，而 IRE1 在不同刺激下可能最終導(dǎo)致不同的細胞輸出[29]。IRE1α 與 IRE1β 和酵母 IRE1P 激酶具有高度的同源性，最保守的特征是蛋白質(zhì)C 末端的 RNase-L-結(jié)構(gòu)域和激酶結(jié)構(gòu)域（圖 1.2.）。IRE1α 的內(nèi)腔結(jié)構(gòu)域通過與 Bip結(jié)合而保持在其非活性單體狀態(tài)。ER 中錯誤折疊的蛋白質(zhì)的積累會導(dǎo)致 Bip 的釋放[11]，從而使管腔結(jié)構(gòu)域二聚化[30]。這使得相關(guān)的胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域在 ER 膜的另一側(cè)接近，促進激酶結(jié)構(gòu)域的轉(zhuǎn)自磷酸化，從而導(dǎo)致 RNase 結(jié)構(gòu)域的激活[14]。在出芽酵母中，IRE1RNase 活性對 hac1mRNA 具有特異性，并以不依賴于剪接體的方式切除 252 個核苷酸片段[31]。在哺乳動物中，IRE1α 從 XBP1mRNA 中切除 26 個核苷酸。剪接的轉(zhuǎn)錄 XBP1s 編碼一種有效的轉(zhuǎn)錄激活蛋白，該蛋白可上調(diào) UPR 靶基因的表達[21]，[32]

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李添添;丁楊楠;吳江;沈陽;劉肖珩;;血管介入治療再內(nèi)皮化修復(fù)的研究進展[J];生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志;2016年01期

2 劉建林,黨曉敏,何西利;同種瓣體內(nèi)再內(nèi)皮化的效果[J];西安交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2004年03期

3 伏蕊;竇克非;;藥物促進冠脈支架置入術(shù)后血管再內(nèi)皮化[J];中國分子心臟病學(xué)雜志;2013年06期

4 王曉軍;崔連群;劉繼東;王敏;蓋玉生;李峰;;粒細胞集落刺激因子對大鼠頸動脈球囊損傷后再內(nèi)皮化和內(nèi)膜增生過程的影響[J];中國病理生理雜志;2006年09期

5 汪小力;許博聞;馮唐;劉肖珩;沈陽;;血管支架植入損傷后的再內(nèi)皮化修復(fù)研究[J];醫(yī)用生物力學(xué);2019年S1期

6 陳文群;王燕國;吳青;王治義;徐寒松;;移植到裸鼠體內(nèi)的糖尿病患者外周血內(nèi)皮祖細胞再內(nèi)皮化能力的觀察[J];中國糖尿病雜志;2017年11期

7 李鑫;張曉蕓;金成文;成敏;;吲哚美辛對受損頸動脈再內(nèi)皮化的作用及機制[J];中國老年學(xué)雜志;2014年17期

8 王亞莉;賴應(yīng)龍;魏蜀亮;賈維坤;;心血管支架置入后血管內(nèi)皮損傷的修復(fù)與再內(nèi)皮化[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2009年09期

9 王威;張穎倩;李中軒;周瑾;陳韻岱;;內(nèi)皮祖細胞促進損傷血管再內(nèi)皮化的機制[J];臨床心血管病雜志;2019年08期

10 羅明華;關(guān)懷敏;解金紅;陳玉善;王賀;邱承杰;董文杰;宗永華;;冠心病藥物涂層支架置入后再內(nèi)皮化研究[J];實用醫(yī)學(xué)雜志;2016年05期

相關(guān)會議論文 前10條

1 張琳;張瑞巖;朱政斌;杜潤;張嵐;韓偉;;基質(zhì)細胞衍生因子-1促進雷帕霉素洗脫支架置入后血管再內(nèi)皮化研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第11次心血管病學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2009年

2 汪小力;許博聞;馮唐;劉肖珩;沈陽;;血管支架植入損傷的再內(nèi)皮化修復(fù)及其力學(xué)生物學(xué)機制研究[A];第十二屆全國生物力學(xué)學(xué)術(shù)會議暨第十四屆全國生物流變學(xué)學(xué)術(shù)會議會議論文摘要匯編[C];2018年

3 武曉靜;黃嵐;晉軍;張坡;蔣世忠;宋明寶;趙剛;;自體內(nèi)皮細胞移植在損傷動脈再內(nèi)皮化及抑制新生內(nèi)膜增生中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會心血管病學(xué)分會第十次全國心血管病學(xué)術(shù)會議匯編[C];2008年

4 尹揚光;黃嵐;趙曉輝;于世勇;方玉強;趙景紅;崔斌;;基質(zhì)細胞衍生因子-1α參與血管損傷后內(nèi)皮祖細胞動員及再內(nèi)皮化[A];中華醫(yī)學(xué)會心血管病學(xué)分會第十次全國心血管病學(xué)術(shù)會議匯編[C];2008年

5 武曉靜;黃嵐;晉軍;;自體內(nèi)皮細胞移植在損傷動脈再內(nèi)皮化及抑制新生內(nèi)膜增生中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會第11次心血管病學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2009年

6 石燕昆;楊麗霞;郭瑞威;;內(nèi)皮祖細胞過表達c-Met對球囊損傷血管再內(nèi)皮化的影響[A];第十三次全國心血管病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2011年

7 石蓓;趙然尊;王冬梅;沈長銀;許官學(xué);;G-CSF對兔粥樣硬化頸動脈球囊損傷后再內(nèi)皮化和內(nèi)膜增生的影響[A];貴州醫(yī)學(xué)會心血管病學(xué)分會、心電生理與起搏學(xué)分會2008年學(xué)術(shù)年會專題講座及論文摘要匯編[C];2008年

8 崔連群;王曉軍;劉繼東;王敏;蓋玉生;李峰;;粒細胞集落刺激因子對大鼠頸動脈血管成形術(shù)后內(nèi)膜修復(fù)和增生的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會心血管病學(xué)分會第八次全國心血管病學(xué)術(shù)會議匯編[C];2006年

9 劉鎮(zhèn);熊紹虎;張傳森;;REDV修飾對脫細胞帶瓣靜脈支架體外再內(nèi)皮化的影響[A];中國解剖學(xué)會2013年年會論文文摘匯編[C];2013年

10 武曉靜;黃嵐;晉軍;張坡;蔣世忠;宋明寶;趙剛;;自體內(nèi)皮細胞移植在損傷動脈再內(nèi)皮化及抑制新生內(nèi)膜增生中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會心血管病分會第八次全國心血管病學(xué)術(shù)會議匯編[C];2004年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前6條

1 高巖;移植自體骨髓源內(nèi)皮祖細胞促進靜脈橋血管再內(nèi)皮化及抑制內(nèi)膜增生的實驗研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2006年

2 尹揚光;動脈內(nèi)膜損傷后SDF-1對內(nèi)皮祖細胞動員及歸巢影響的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2007年

3 王紅;轉(zhuǎn)錄因子Id1對內(nèi)皮祖細胞增殖、遷移的影響及在損傷血管修復(fù)中作用的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2010年

4 劉鵬霞;間充質(zhì)干細胞輸注在血管內(nèi)皮細胞損傷和動脈粥樣硬化中的作用[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

5 楊志祿;多功能血管支架涂層的構(gòu)建和生物相容性研究[D];西南交通大學(xué);2014年

6 張穎倩;尼可地爾抑制大鼠頸動脈球囊拉傷后內(nèi)膜增生及促進內(nèi)皮化的研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2016年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 魏昕;IRE1α對血管損傷后再內(nèi)皮化過程的調(diào)控作用研究[D];華中科技大學(xué);2019年

2 蔡瑤;Periostin蛋白過表達對小鼠損傷頸動脈再內(nèi)皮化的影響[D];蚌埠醫(yī)學(xué)院;2018年

3 李志海;瑞舒伐他汀對兔腹主動脈粥樣硬化藥物涂層支架置入后再內(nèi)皮化的影響[D];河南中醫(yī)藥大學(xué);2016年

4 劉鳳山;缺氧誘導(dǎo)因子-1α表達與移植靜脈再內(nèi)皮化關(guān)系的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2003年

5 劉鎮(zhèn);REDV修飾對脫細胞帶瓣靜脈支架體外再內(nèi)皮化的影響[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2014年

6 艾帥兵;丹蔞片促進兔腹主動脈粥樣硬化藥物涂層支架置入后再內(nèi)皮化的調(diào)控機制研究[D];河南中醫(yī)藥大學(xué);2017年

7 鄭經(jīng)緯;生物可降解冠狀動脈支架的研究進展[D];南昌大學(xué);2017年

8 王金林;幾丁聚糖對大鼠頸動脈球囊損傷后血管內(nèi)膜增殖的影響[D];南華大學(xué);2008年

9 姚佳璐;阿苯達唑?qū)用}再狹窄的治療效應(yīng)和機制研究[D];蘇州大學(xué);2016年

10 劉志江;心肌梗死后MSCs移植對球囊損傷血管再狹窄及心臟功能的影響[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2010年

本文編號：2722425