發(fā)布時間：2020-06-20 04:30

【摘要】：背景:絕經(jīng)后女性心血管疾病高發(fā)現(xiàn)象備受關(guān)注。由于女性絕經(jīng)后性激素結(jié)合球蛋白水平下降而引起血管內(nèi)皮細胞功能障礙,進而啟動了心血管疾病的發(fā)展過程。因此,防止內(nèi)皮細胞功能障礙和促進血管新生是預(yù)防心血管疾病的關(guān)鍵。研究表明,刺芒柄花素是一種植物雌激素,具有擬雌激素作用與心血管保護作用密切相關(guān)。目的:探究刺芒柄花素在人臍靜脈內(nèi)皮細胞Human Umbilical Vein Endothelial Cells(HUVECs)中的藥物作用,尋找藥物濃度范圍并證實刺芒柄花素促進HUVECs的增長。探討刺芒柄花素對HUVECs增殖、早期凋亡及遷移表達水平的影響;探討刺芒柄花素對HUVECs中IGF-1R和ICAM-1蛋白表達水平的影響。證實刺芒柄花素對心血管的保護作用,為刺芒柄花素成為治療心血管疾病的新藥提供理論依據(jù)。方法:采用MTT實驗檢測刺芒柄花素對HUVECs的增殖作用,設(shè)置不同藥物濃度,檢測藥物作用48h后OD值,選出合適的促增殖濃度;采用流式細胞術(shù)檢測刺芒柄花素對HUVECs的凋亡作用;采用劃痕實驗檢測刺芒柄花素對HUVECs的遷移作用;采用蛋白免疫印跡(Western Blot)實驗檢測刺芒柄花素作用HUVECs后蛋白因子IGF-1R和ICAM-1的表達情況。結(jié)果:MTT實驗結(jié)果顯示在0-10μmol/L濃度范圍內(nèi)隨著刺芒柄花素濃度的增加OD值逐漸增大;流式細胞術(shù)結(jié)果顯示隨著刺芒柄花素濃度增加Q4象限早凋率逐漸下降;劃痕實驗結(jié)果顯示隨著刺芒柄花素濃度增大和作用時間延長劃痕愈合率逐漸增大;Western Blot實驗表明刺芒柄花素促使HUVECs中IGF-1R和ICAM-1蛋白因子的表達量增高。結(jié)論:刺芒柄花素通過調(diào)節(jié)HUVECs內(nèi)IGF-1R和ICAM-1蛋白表達水平的增高,抑制HUVECs的早期凋亡,促進HUVECs的增殖和遷移,從而發(fā)揮對內(nèi)皮細胞和血管的保護作用。可作為未來心血管疾病的預(yù)防和治療用藥提供新思路及新作用靶點。
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R54
【圖文】：

2 結(jié)果2.1 刺芒柄花素促進 HUVECs 增殖去雌激素環(huán)境培養(yǎng) HUVECs（實驗前 4 天用無酚紅的 1640 培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，目的排除酚紅的擬雌激素作用，模擬去雌激素環(huán)境），通過 MTT 實驗檢測刺芒柄花素在 0、0.5、1、2、5、8 和 10μmol/L 不同濃度下 HUVECs的增殖情況，作用 48h 后檢測 OD 值。結(jié)果如圖 1 所示：隨著橫軸刺芒柄花素濃度的增大，縱軸增殖率逐漸增強。說明刺芒柄花素在 0-10μmol/L 范圍內(nèi)有效促進 HUVECs 的增殖。

2.2 刺芒柄花素抑制 HUVECs 早期凋亡去雌激素環(huán)境培養(yǎng) HUVECs（實驗前 4 天用無酚紅的 1640 培養(yǎng)培養(yǎng)，目的排除酚紅的擬雌激素作用，模擬去雌激素環(huán)境），內(nèi)皮期凋亡增多，與臨床上絕經(jīng)后婦女內(nèi)皮細胞變化情況相同。通過流術(shù)檢測刺芒柄花素在 0、5 和 10μmol/L 不同濃度作用下 HUVECs 的亡情況，作用 48h 后檢測其早期凋亡率。結(jié)果如圖 2 中的 Q4 所示：芒柄花素濃度的增大，早期凋亡作用逐漸下降。說明刺芒柄0-10μmol/L 范圍內(nèi)有擬雌激素作用抑制 HUVECs 的凋亡作用。

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本文編號：2721871