【摘要】：背景:絕經(jīng)后女性心血管疾病高發(fā)現(xiàn)象備受關(guān)注。由于女性絕經(jīng)后性激素結(jié)合球蛋白水平下降而引起血管內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙,進(jìn)而啟動(dòng)了心血管疾病的發(fā)展過程。因此,防止內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙和促進(jìn)血管新生是預(yù)防心血管疾病的關(guān)鍵。研究表明,刺芒柄花素是一種植物雌激素,具有擬雌激素作用與心血管保護(hù)作用密切相關(guān)。目的:探究刺芒柄花素在人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Human Umbilical Vein Endothelial Cells(HUVECs)中的藥物作用,尋找藥物濃度范圍并證實(shí)刺芒柄花素促進(jìn)HUVECs的增長。探討刺芒柄花素對(duì)HUVECs增殖、早期凋亡及遷移表達(dá)水平的影響;探討刺芒柄花素對(duì)HUVECs中IGF-1R和ICAM-1蛋白表達(dá)水平的影響。證實(shí)刺芒柄花素對(duì)心血管的保護(hù)作用,為刺芒柄花素成為治療心血管疾病的新藥提供理論依據(jù)。方法:采用MTT實(shí)驗(yàn)檢測刺芒柄花素對(duì)HUVECs的增殖作用,設(shè)置不同藥物濃度,檢測藥物作用48h后OD值,選出合適的促增殖濃度;采用流式細(xì)胞術(shù)檢測刺芒柄花素對(duì)HUVECs的凋亡作用;采用劃痕實(shí)驗(yàn)檢測刺芒柄花素對(duì)HUVECs的遷移作用;采用蛋白免疫印跡(Western Blot)實(shí)驗(yàn)檢測刺芒柄花素作用HUVECs后蛋白因子IGF-1R和ICAM-1的表達(dá)情況。結(jié)果:MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示在0-10μmol/L濃度范圍內(nèi)隨著刺芒柄花素濃度的增加OD值逐漸增大;流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示隨著刺芒柄花素濃度增加Q4象限早凋率逐漸下降;劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示隨著刺芒柄花素濃度增大和作用時(shí)間延長劃痕愈合率逐漸增大;Western Blot實(shí)驗(yàn)表明刺芒柄花素促使HUVECs中IGF-1R和ICAM-1蛋白因子的表達(dá)量增高。結(jié)論:刺芒柄花素通過調(diào)節(jié)HUVECs內(nèi)IGF-1R和ICAM-1蛋白表達(dá)水平的增高,抑制HUVECs的早期凋亡,促進(jìn)HUVECs的增殖和遷移,從而發(fā)揮對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞和血管的保護(hù)作用�？勺鳛槲磥硇难芗膊〉念A(yù)防和治療用藥提供新思路及新作用靶點(diǎn)。
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R54
【圖文】：

2 結(jié)果2.1 刺芒柄花素促進(jìn) HUVECs 增殖去雌激素環(huán)境培養(yǎng) HUVECs（實(shí)驗(yàn)前 4 天用無酚紅的 1640 培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，目的排除酚紅的擬雌激素作用，模擬去雌激素環(huán)境），通過 MTT 實(shí)驗(yàn)檢測刺芒柄花素在 0、0.5、1、2、5、8 和 10μmol/L 不同濃度下 HUVECs的增殖情況，作用 48h 后檢測 OD 值。結(jié)果如圖 1 所示：隨著橫軸刺芒柄花素濃度的增大，縱軸增殖率逐漸增強(qiáng)。說明刺芒柄花素在 0-10μmol/L 范圍內(nèi)有效促進(jìn) HUVECs 的增殖。

2.2 刺芒柄花素抑制 HUVECs 早期凋亡去雌激素環(huán)境培養(yǎng) HUVECs（實(shí)驗(yàn)前 4 天用無酚紅的 1640 培養(yǎng)培養(yǎng)，目的排除酚紅的擬雌激素作用，模擬去雌激素環(huán)境），內(nèi)皮期凋亡增多，與臨床上絕經(jīng)后婦女內(nèi)皮細(xì)胞變化情況相同。通過流術(shù)檢測刺芒柄花素在 0、5 和 10μmol/L 不同濃度作用下 HUVECs 的亡情況，作用 48h 后檢測其早期凋亡率。結(jié)果如圖 2 中的 Q4 所示：芒柄花素濃度的增大，早期凋亡作用逐漸下降。說明刺芒柄0-10μmol/L 范圍內(nèi)有擬雌激素作用抑制 HUVECs 的凋亡作用。

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2721871