【摘要】：背景/目的:炎癥反應促進動脈粥樣硬化,其特征在于各種炎性細胞因子的產(chǎn)生和釋放。最近有研究表明新型抗炎細胞因子白細胞介素-37(IL-37)參與多種炎癥和動脈粥樣硬化相關的疾病。然而,我們對IL-37在動脈粥樣硬化中的潛在調(diào)節(jié)機制仍知之甚少。本研究目的是為了進一步明確IL-37在動脈粥樣硬化中的作用,并研究其可能的潛在機制。方法:本研究將通過以下研究進行驗證:1、檢測人動脈粥樣硬化斑塊中IL-37的表達;2、研究IL-37過表達在小鼠動脈粥樣硬化中的作用;3、評估IL-37在小鼠動脈粥樣硬化中的信號傳導途徑并研究其涉及的潛在機制。我們通過免疫組織化學染色和實時聚合酶鏈式反應(RT-PCR)檢測人動脈粥樣硬化斑塊中IL-37的表達;通過免疫熒光共定位染色確定了斑塊中IL-37的細胞來源;通過小鼠轉基因過表達IL-37研究其在動脈粥樣硬化中的作用;通過油紅O染色來檢測動脈粥樣斑塊的大小;通過Western blot來檢測IL-37tg-Apo E-/-小鼠IL-37,IL-18Rα和p-Smad3的蛋白質(zhì)表達水平;通過smad3基因缺失或IL-18Rα中和實驗來研究IL-37在動脈粥樣硬化中的作用機制;通過流式細胞術分析和末端脫氧核苷酸轉移酶介導的d UTP缺口末端標記(TUNEL)染色分別測試體外和體內(nèi)血管平滑肌細胞(VSMC)凋亡。通過流式細胞術檢測脾臟和血管斑塊中的免疫細胞。通過ELISA檢測IL-37轉基因小鼠循環(huán)中IL-37和培養(yǎng)上清中細胞因子的表達。結果:免疫組織化學染色結果提示:IL-37在人動脈粥樣硬化斑塊中高度表達;細胞內(nèi)細胞因子免疫熒光染色結果提示:浸潤的CD4+T淋巴細胞和血管平滑肌細胞(VSMCs),而不是巨噬細胞,是IL-37的主要細胞來源。IL-37轉基因的Apo E-/-小鼠表現(xiàn)出其動脈粥樣硬化負荷較Apo E-/-小鼠顯著改善,表現(xiàn)在IL-37tg-Apo E-/-小鼠比Apo E-/-小鼠胸腹動脈和主動脈根部斑塊面積更小,斑塊中膠原蛋白含量增加,凋亡細胞減少等。隨后,機制研究提示:IL-37通過促進T輔助細胞向抗炎表型分化,通過降低基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)對斑塊內(nèi)膠原蛋降解,以及通過抑制VSMCs凋亡來抑制炎癥,增加斑塊的穩(wěn)定性。結論:IL-37可能通過誘導Th2抗炎細胞分化,減少MMP-2/13介導的膠原蛋白降解,以及抑制SMCs凋亡發(fā)揮抗動脈粥樣硬化的作用。
【圖文】：

18圖 1.1 IL-37 在人動脈粥樣硬化斑塊中高度表達。A. 有代表性的 IL-37 免疫組化染色圖，，Control 表示無粥樣硬化斑塊的正常血管，AS 代表有動脈粥樣硬化斑塊的血管；B. IL-37 在人動脈粥樣硬化斑塊（n = 7）和無動脈粥樣硬化斑塊的正常血管（n = 8）中的表達的統(tǒng)計分析；C. IL-37 mRNA 在人動脈粥樣硬化（n=3）斑塊和正常動脈標本（n = 6）中的表達水平；數(shù)據(jù)以平均值±SD 表示，**表示 p <0.01，***表示 p <0.001與對照組相比。

華 中 科 技 大 學 博 士 學 位 論 文2、CD4+T 細胞及人血管平滑肌細胞是斑塊中 IL-37 的主要來源為了確定動脈粥樣硬化斑塊中哪些細胞是 IL-37 的主要來源，我們進行了 IL-37 與CD4, α-SMA, CD68, CD31 共定位的免疫熒光染色。出乎意料的是，我們發(fā)現(xiàn) IL-37 在CD68+巨噬細胞中表達很低（圖 1.2C），甚至在 CD31+的內(nèi)皮細胞（ECs）中檢測不到（圖 1.2D）；但卻發(fā)現(xiàn)大量 IL-37 信號在 CD4+T 淋巴細胞（圖 1.2A）和 α-SMA+血管平滑肌細胞（VSMC）中（圖 1.2B）。
【學位授予單位】：華中科技大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R543.5

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 代紅朝;;阿托伐他汀對急性心肌梗死白細胞介素-6水平的影響[J];海峽藥學;2017年05期

2 錢小英;胡春宏;;白細胞介素6與惡性腫瘤關系的研究近況[J];中國衛(wèi)生標準管理;2015年19期

3 林偉明;;白細胞介素-2對鼻咽癌化療患者機體免疫功能的影響分析[J];海峽藥學;2015年07期

4 李永忠;閔華;劉超;吳煌;;骨關節(jié)炎疾病中白細胞介素17協(xié)同腫瘤壞死因子α調(diào)節(jié)誘導型一氧化氮合酶的表達[J];中國組織工程研究;2012年24期

5 唐保東;詹磊磊;朱森林;;白細胞介素32在胃癌組織中的表達及與臨床病理特征的關系[J];中國醫(yī)藥科學;2012年23期

6 �？∶�;張東杰;;結核性腦膜炎腦脊液中白細胞介素-6水平及臨床意義[J];現(xiàn)代預防醫(yī)學;2011年16期

7 程涵蓉;葉中綠;陳銘珍;;兒童骨髓增生異常綜合征造血前體細胞增殖與白細胞介素15的影響[J];中國組織工程研究與臨床康復;2010年45期

8 ;白細胞介素-2對治療HIV-AIDS無效[J];臨床合理用藥雜志;2009年20期

9 王越夫;姚彤;王古巖;李立環(huán);;非體外循環(huán)冠狀動脈旁路移植術后全身炎性反應綜合征評分與白細胞介素-6、白細胞介素-10比值動態(tài)變化的關系[J];中國循環(huán)雜志;2009年05期

10 鄧學軍;覃數(shù);;白細胞介素-10、白細胞介素-6在急性冠狀動脈綜合征中的臨床意義[J];四川醫(yī)學;2008年10期

相關會議論文 前10條

1 劉玉春;林士軍;葉建華;劉美描;陳雄;張靜;;白細胞介素2、可溶性白細胞介素2受體在慢性阻塞性肺疾病表達的研究[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2013第十四次全國呼吸病學學術會議論文匯編[C];2013年

2 曹艷華;張蕊;余奕;張威;祝成亮;王青;宋煜;白蘭;劉映樂;鄔開朗;吳建國;;由白細胞介素-29介導的白細胞介素-27抑制乙型肝炎病毒復制機制的研究[A];2013年湖北省暨武漢微生物學會會員代表大會暨學術年會論文摘要集[C];2013年

3 張曉光;惠延年;韓泉洪;馬吉獻;;培養(yǎng)人視網(wǎng)膜色素上皮細胞受附加磁場作用后單核細胞趨化蛋白-1和白細胞介素-8的表達[A];中國眼底病論壇·全國眼底病專題學術研討會論文匯編[C];2008年

4 曹艷華;吳建國;;由白細胞介素-29介導的白細胞介素-27抑制乙型肝炎病毒復制機制的研究[A];2012年鄂粵微生物學學術年會——湖北省暨武漢微生物學會成立六十年慶祝大會論文集[C];2012年

5 姜曉君;魏海明;孫lm;田志剛;;白細胞介素2保護刀豆蛋白A誘導的肝損傷[A];第六屆全國免疫學學術大會論文集[C];2008年

6 張媛;;白細胞介素-21在免疫性疾病中的作用[A];第四屆中國臨床微生物學大會暨微生物學與免疫學論壇論文匯編[C];2013年

7 鞏貴宏;楊建濤;張海波;;血清腫瘤壞死因子-α、白細胞介素-1及白細胞介素-6與慢性心衰患者心功能的相關性研究[A];中國中藥雜志2015/專集：基層醫(yī)療機構從業(yè)人員科技論文寫作培訓會議論文集[C];2016年

8 姚晶晶;劉冬戈;;白細胞介素-1多態(tài)性與阿爾茨海默病的關系[A];中華醫(yī)學會病理學分會2009年學術年會論文匯編[C];2009年

9 李素

本文編號：2710972