【摘要】：第一部分右側頸交感干離斷對大鼠心肌梗死后心功能及心室重構的影響目的:觀察右側頸交感干離斷對大鼠心肌梗死后心功能及心室重構的影響。方法:24只健康成年雄性SD大鼠隨機分為假手術(Sham)組、心肌梗死(MI)組和心肌梗死+右側頸交感神經干離斷(MI+TCST)組。結扎左冠狀動脈前降支制備急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)模型,MI+TCST組行左冠狀動脈前降支結扎后立即離斷右側頸交感神經干。術后4周超聲心動圖檢測各組大鼠心臟結構和功能;右側頸總動脈插管監(jiān)測各組大鼠血流動力學變化;然后處死大鼠,取心臟計算心臟質量指數(shù);HE染色、Masson染色觀察梗死周邊區(qū)心肌組織病理學改變及間質纖維化情況;TUNEL法檢測心肌細胞凋亡;western blotting檢測梗死周邊區(qū)心肌組織Bax、Bcl-2和Ⅰ型膠原(collagenⅠ)、III型膠原(collagen III)蛋白的表達。結果:1.超聲心動圖結果:與Sham組比較,MI組LVEDd、LVESd顯著增加(P0.05),而LVEF、LVFS顯著降低(P0.05)。與MI組比較,MI+TCST組LVEDd、LVESd顯著減小(P0.05),而LVEF、LVFS顯著升高(P0.05)。2.血流動力學結果:與Sham組比較,MI組LVSP、+dp/dtmax及-dp/dtmax顯著降低(P0.05),LVEDP顯著升高(P0.05)。與MI組比較,MI+TCST組LVSP、+dp/dtmax及-dp/dtmax顯著升高(P0.05),LVEDP顯著降低(P0.05)。3.心臟質量指數(shù)變化:與Sham組比較,MI組HW/BW、LVW/BW和LVW/HW均顯著升高(P0.05)。與MI組相比,MI+TCST組HW/BW、LVW/BW和LVW/HW均顯著降低(P0.05)。Sham組、MI組、MI+TCST組在RV/HW方面差異無統(tǒng)計學顯著性(P0.05)。4.HE染色結果:Sham組心肌細胞呈圓形,排列整齊,細胞核位于中央,橫紋清晰,可見少量炎性細胞浸潤;MI組心肌細胞皺縮,胞質濃染,細胞核固縮、碎裂,心肌纖維溶解、斷裂,炎癥細胞浸潤明顯,細胞間隙大量纖維組織增生;MI+TCST組心肌組織結構破壞明顯改善,炎癥細胞浸潤及纖維組織增生明顯減少。5.心肌細胞凋亡測定結果:與Sham組比較,MI組促凋亡蛋白Bax顯著增加,抗凋亡蛋白Bcl-2顯著減少,梗死周邊區(qū)心肌細胞凋亡明顯增加(P0.05)。與MI組比較,MI+TCST組促凋亡蛋白Bax顯著減少,抗凋亡蛋白Bcl-2顯著增加,梗死周邊區(qū)凋亡心肌細胞明顯減少(P0.05)。6.心肌纖維化測定結果:Masson染色結果顯示:與Sham組比較,MI組可見大量增生藍色膠原纖維,排列紊亂,心肌組織膠原容積分數(shù)(CVF)顯著增加(P0.05);與MI組比較,MI+TCST組心肌組織膠原容積分數(shù)(CVF)顯著減少(P0.05)。western blotting檢測梗死周邊區(qū)心肌組織Ⅰ型、III型膠原蛋白的表達,結果顯示:與Sham組比較,MI組Ⅰ型、III型膠原蛋白的表達顯著增加,Ⅰ/III膠原蛋白的比值顯著升高(P0.05);與MI組比較,MI+TCST組Ⅰ型、III型膠原蛋白的表達顯著減少,Ⅰ/III膠原蛋白的比值顯著降低(P0.05)。結論:1.右側TCST可抑制心肌肥厚,減緩心室重構,提高大鼠心肌梗死后心臟功能。2.右側TCST可顯著降低大鼠心肌組織促凋亡蛋白Bax的表達,并增加抗凋亡蛋白Bcl-2的表達,減少心肌細胞凋亡。3.右側TCST可調節(jié)Ⅰ、III型膠原蛋白的表達,減輕心肌纖維化。第二部分右側頸交感干離斷對大鼠心肌梗死后炎癥反應及HMGB1/TLR4/NF-κB信號通路的影響目的:探討右側頸交感干離斷對大鼠心肌梗死后炎癥反應及HMGB1/TLR4/NF-κB信號通路蛋白表達的影響。方法:結扎左冠狀動脈前降支制備急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)模型,將造模成功的大鼠隨機分為心肌梗死(MI)組、心肌梗死+右側頸交感干離斷(MI+TCST)組,MI+TCST組在左冠狀動脈前降支結扎后立即離斷右側頸交感神經干。MI組和MI+TCST組按模型制備及干預后1、3、7、14、28 d分為5個亞組,假手術(Sham)組,只穿線不結扎。定量PCR法檢測不同時間點梗死邊緣區(qū)HMGB1、TNF-α和IL-6的m RNA表達。Western blot分析MI后不同時間點梗死邊緣區(qū)HMGB1、TLR4蛋白的表達變化,并進一步分析右側TCST對HMGB1和TLR4/NF-κB信號通路蛋白表達的影響。結果1.心肌組織HMGB1、TNF-α及IL-6的m RNA表達情況:與Sham組比較,MI后1 d心肌組織早期炎癥因子TNF-α、IL-6的m RNA表達上調,3 d組最高,7 d后開始下降,28 d仍明顯高于Sham組(P0.05);晚期炎癥因子HMGB1 m RNA在MI后3 d表達上調,7 d組最高,之后開始下降,28 d仍明顯高于Sham組(P0.05)。與MI組比較,MI+TCST組各對應時間點亞組中心肌組織HMGB1、TNF-α、IL-6的m RNA表達均有所下調,28 d后IL-6的m RNA水平與Sham組間無顯著差異(P0.05)。2.AMI后不同時間點心肌組織HMGB1、TLR4的蛋白表達變化:與Sham組比較,MI后3 d HMGB1蛋白表達增加,并于梗死后7 d達到高峰,之后開始下降,MI后28 d仍明顯高于Sham組(P0.05);TLR4蛋白的表達變化與HMGB1一致。3.心肌組織HMGB1和TLR4/NF-κB信號通路相關蛋白的表達情況:與Sham組比較,心肌梗死后7 d心肌組織中HMGB1、TLR-4、My D88和NF-?Bp65蛋白表達水平顯著升高(P0.05)。與MI組比較,MI+TCST組HMGB1、TLR-4、My D88和NF-?Bp65蛋白表達水平顯著降低(P0.05)。結論1.心肌梗死后炎癥反應增強,梗死周邊區(qū)炎癥因子TNF-α、IL-6表達上調,右側TCST可下調炎癥因子的表達,抑制MI后炎癥反應。2.HMGB1是一種晚期炎癥因子,出現(xiàn)時期晚于TNF-α、IL-6,而持續(xù)時間較長,這可能是MI后炎癥反應持續(xù)的重要原因。3.TLR4-NF-κB信號通路在AMI后炎癥反應過程中發(fā)揮重要作用。右側TCST可抑制HMGB1的表達,減少HMGBl與細胞膜上的TLR4受體結合,最終抑制NF-?Bp65的激活,從而減少炎癥因子的釋放,減輕炎癥反應,這可能是右側TCST減輕MI后炎癥反應的作用途徑之一。
【圖文】：

圖 1 各組大鼠 M 型超聲心動圖Fig.1 M-mode echocardiograms obtained with two-dimensional guidance from a short-axismidventricular view from rats of all groups. A sham operation group; B MI group; CMI+TCST group.表 1 各組大鼠超聲心動圖結果比較

24圖 2 各組大鼠 MI 后梗死周邊區(qū)心肌形態(tài)學變化(×400)Fig.2 Pathomorphological variance of myocardial tissues(×400).A sham operation group; BMI group; C MI+TCST group.
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R542.22

【參考文獻】

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1 李志斌;段然;趙森明;;星狀神經節(jié)阻滯在心臟病治療中的作用與意義[J];實用疼痛學雜志;2015年02期

2 李昊;張幼怡;;促炎細胞因子在交感/兒茶酚胺介導心臟重塑中的作用[J];北京大學學報(醫(yī)學版);2014年06期

3 陳永權;胡光祥;付群;金孝\，

本文編號：2701870