【摘要】：第一部分右側(cè)頸交感干離斷對(duì)大鼠心肌梗死后心功能及心室重構(gòu)的影響目的:觀察右側(cè)頸交感干離斷對(duì)大鼠心肌梗死后心功能及心室重構(gòu)的影響。方法:24只健康成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)(Sham)組、心肌梗死(MI)組和心肌梗死+右側(cè)頸交感神經(jīng)干離斷(MI+TCST)組。結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支制備急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)模型,MI+TCST組行左冠狀動(dòng)脈前降支結(jié)扎后立即離斷右側(cè)頸交感神經(jīng)干。術(shù)后4周超聲心動(dòng)圖檢測(cè)各組大鼠心臟結(jié)構(gòu)和功能;右側(cè)頸總動(dòng)脈插管監(jiān)測(cè)各組大鼠血流動(dòng)力學(xué)變化;然后處死大鼠,取心臟計(jì)算心臟質(zhì)量指數(shù);HE染色、Masson染色觀察梗死周邊區(qū)心肌組織病理學(xué)改變及間質(zhì)纖維化情況;TUNEL法檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡;western blotting檢測(cè)梗死周邊區(qū)心肌組織Bax、Bcl-2和Ⅰ型膠原(collagenⅠ)、III型膠原(collagen III)蛋白的表達(dá)。結(jié)果:1.超聲心動(dòng)圖結(jié)果:與Sham組比較,MI組LVEDd、LVESd顯著增加(P0.05),而LVEF、LVFS顯著降低(P0.05)。與MI組比較,MI+TCST組LVEDd、LVESd顯著減小(P0.05),而LVEF、LVFS顯著升高(P0.05)。2.血流動(dòng)力學(xué)結(jié)果:與Sham組比較,MI組LVSP、+dp/dtmax及-dp/dtmax顯著降低(P0.05),LVEDP顯著升高(P0.05)。與MI組比較,MI+TCST組LVSP、+dp/dtmax及-dp/dtmax顯著升高(P0.05),LVEDP顯著降低(P0.05)。3.心臟質(zhì)量指數(shù)變化:與Sham組比較,MI組HW/BW、LVW/BW和LVW/HW均顯著升高(P0.05)。與MI組相比,MI+TCST組HW/BW、LVW/BW和LVW/HW均顯著降低(P0.05)。Sham組、MI組、MI+TCST組在RV/HW方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(P0.05)。4.HE染色結(jié)果:Sham組心肌細(xì)胞呈圓形,排列整齊,細(xì)胞核位于中央,橫紋清晰,可見(jiàn)少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn);MI組心肌細(xì)胞皺縮,胞質(zhì)濃染,細(xì)胞核固縮、碎裂,心肌纖維溶解、斷裂,炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)明顯,細(xì)胞間隙大量纖維組織增生;MI+TCST組心肌組織結(jié)構(gòu)破壞明顯改善,炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)及纖維組織增生明顯減少。5.心肌細(xì)胞凋亡測(cè)定結(jié)果:與Sham組比較,MI組促凋亡蛋白Bax顯著增加,抗凋亡蛋白Bcl-2顯著減少,梗死周邊區(qū)心肌細(xì)胞凋亡明顯增加(P0.05)。與MI組比較,MI+TCST組促凋亡蛋白Bax顯著減少,抗凋亡蛋白Bcl-2顯著增加,梗死周邊區(qū)凋亡心肌細(xì)胞明顯減少(P0.05)。6.心肌纖維化測(cè)定結(jié)果:Masson染色結(jié)果顯示:與Sham組比較,MI組可見(jiàn)大量增生藍(lán)色膠原纖維,排列紊亂,心肌組織膠原容積分?jǐn)?shù)(CVF)顯著增加(P0.05);與MI組比較,MI+TCST組心肌組織膠原容積分?jǐn)?shù)(CVF)顯著減少(P0.05)。western blotting檢測(cè)梗死周邊區(qū)心肌組織Ⅰ型、III型膠原蛋白的表達(dá),結(jié)果顯示:與Sham組比較,MI組Ⅰ型、III型膠原蛋白的表達(dá)顯著增加,Ⅰ/III膠原蛋白的比值顯著升高(P0.05);與MI組比較,MI+TCST組Ⅰ型、III型膠原蛋白的表達(dá)顯著減少,Ⅰ/III膠原蛋白的比值顯著降低(P0.05)。結(jié)論:1.右側(cè)TCST可抑制心肌肥厚,減緩心室重構(gòu),提高大鼠心肌梗死后心臟功能。2.右側(cè)TCST可顯著降低大鼠心肌組織促凋亡蛋白Bax的表達(dá),并增加抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá),減少心肌細(xì)胞凋亡。3.右側(cè)TCST可調(diào)節(jié)Ⅰ、III型膠原蛋白的表達(dá),減輕心肌纖維化。第二部分右側(cè)頸交感干離斷對(duì)大鼠心肌梗死后炎癥反應(yīng)及HMGB1/TLR4/NF-κB信號(hào)通路的影響目的:探討右側(cè)頸交感干離斷對(duì)大鼠心肌梗死后炎癥反應(yīng)及HMGB1/TLR4/NF-κB信號(hào)通路蛋白表達(dá)的影響。方法:結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支制備急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)模型,將造模成功的大鼠隨機(jī)分為心肌梗死(MI)組、心肌梗死+右側(cè)頸交感干離斷(MI+TCST)組,MI+TCST組在左冠狀動(dòng)脈前降支結(jié)扎后立即離斷右側(cè)頸交感神經(jīng)干。MI組和MI+TCST組按模型制備及干預(yù)后1、3、7、14、28 d分為5個(gè)亞組,假手術(shù)(Sham)組,只穿線不結(jié)扎。定量PCR法檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)梗死邊緣區(qū)HMGB1、TNF-α和IL-6的m RNA表達(dá)。Western blot分析MI后不同時(shí)間點(diǎn)梗死邊緣區(qū)HMGB1、TLR4蛋白的表達(dá)變化,并進(jìn)一步分析右側(cè)TCST對(duì)HMGB1和TLR4/NF-κB信號(hào)通路蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果1.心肌組織HMGB1、TNF-α及IL-6的m RNA表達(dá)情況:與Sham組比較,MI后1 d心肌組織早期炎癥因子TNF-α、IL-6的m RNA表達(dá)上調(diào),3 d組最高,7 d后開(kāi)始下降,28 d仍明顯高于Sham組(P0.05);晚期炎癥因子HMGB1 m RNA在MI后3 d表達(dá)上調(diào),7 d組最高,之后開(kāi)始下降,28 d仍明顯高于Sham組(P0.05)。與MI組比較,MI+TCST組各對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)亞組中心肌組織HMGB1、TNF-α、IL-6的m RNA表達(dá)均有所下調(diào),28 d后IL-6的m RNA水平與Sham組間無(wú)顯著差異(P0.05)。2.AMI后不同時(shí)間點(diǎn)心肌組織HMGB1、TLR4的蛋白表達(dá)變化:與Sham組比較,MI后3 d HMGB1蛋白表達(dá)增加,并于梗死后7 d達(dá)到高峰,之后開(kāi)始下降,MI后28 d仍明顯高于Sham組(P0.05);TLR4蛋白的表達(dá)變化與HMGB1一致。3.心肌組織HMGB1和TLR4/NF-κB信號(hào)通路相關(guān)蛋白的表達(dá)情況:與Sham組比較,心肌梗死后7 d心肌組織中HMGB1、TLR-4、My D88和NF-?Bp65蛋白表達(dá)水平顯著升高(P0.05)。與MI組比較,MI+TCST組HMGB1、TLR-4、My D88和NF-?Bp65蛋白表達(dá)水平顯著降低(P0.05)。結(jié)論1.心肌梗死后炎癥反應(yīng)增強(qiáng),梗死周邊區(qū)炎癥因子TNF-α、IL-6表達(dá)上調(diào),右側(cè)TCST可下調(diào)炎癥因子的表達(dá),抑制MI后炎癥反應(yīng)。2.HMGB1是一種晚期炎癥因子,出現(xiàn)時(shí)期晚于TNF-α、IL-6,而持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng),這可能是MI后炎癥反應(yīng)持續(xù)的重要原因。3.TLR4-NF-κB信號(hào)通路在AMI后炎癥反應(yīng)過(guò)程中發(fā)揮重要作用。右側(cè)TCST可抑制HMGB1的表達(dá),減少HMGBl與細(xì)胞膜上的TLR4受體結(jié)合,最終抑制NF-?Bp65的激活,從而減少炎癥因子的釋放,減輕炎癥反應(yīng),這可能是右側(cè)TCST減輕MI后炎癥反應(yīng)的作用途徑之一。
【圖文】：

圖 1 各組大鼠 M 型超聲心動(dòng)圖Fig.1 M-mode echocardiograms obtained with two-dimensional guidance from a short-axismidventricular view from rats of all groups. A sham operation group; B MI group; CMI+TCST group.表 1 各組大鼠超聲心動(dòng)圖結(jié)果比較

24圖 2 各組大鼠 MI 后梗死周邊區(qū)心肌形態(tài)學(xué)變化(×400)Fig.2 Pathomorphological variance of myocardial tissues(×400).A sham operation group; BMI group; C MI+TCST group.
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R542.22

【參考文獻(xiàn)】

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1 李志斌;段然;趙森明;;星狀神經(jīng)節(jié)阻滯在心臟病治療中的作用與意義[J];實(shí)用疼痛學(xué)雜志;2015年02期

2 李昊;張幼怡;;促炎細(xì)胞因子在交感/兒茶酚胺介導(dǎo)心臟重塑中的作用[J];北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2014年06期

3 陳永權(quán);胡光祥;付群;金孝\，

本文編號(hào)：2701870