【摘要】：背景心肌細(xì)胞上的鈉離子通道由SCN5A基因編碼,介導(dǎo)快速內(nèi)向的Na+內(nèi)流,除引起心肌細(xì)胞去極 化動(dòng)作電位的快速上升外,還介導(dǎo)沖動(dòng)在心肌組織間的快速傳導(dǎo)。SCN5A基因上的突變與一 系列危及生命的遺傳性心律失常相關(guān),如Brugada綜合征,長(zhǎng)QT間期綜合征和早復(fù)極綜合征等 。鈉通道阻滯劑誘導(dǎo)或自發(fā)的ST段壓低在少量Brugada綜合征患者中可見(jiàn)報(bào)道,但胺碘酮誘 導(dǎo)的早復(fù)極心電圖伴隨ST段壓低此前未見(jiàn)闡述。目的本研究對(duì)一名胺碘酮誘發(fā)早復(fù)極及胸前區(qū)ST段壓低相關(guān)的心室顫動(dòng)的患者定位基因突變位 點(diǎn)。從細(xì)胞水平評(píng)估該突變對(duì)編碼蛋白功能的影響,并初步探討該特殊心電圖產(chǎn)生的機(jī)制。方法詳細(xì)收集并仔細(xì)分析該患者的病歷資料及心電圖。收集該患者及其家屬的外周靜脈血,采用 候選基因的策略篩查突變位點(diǎn)。利用定點(diǎn)突變技術(shù)在野生型SCN5A質(zhì)粒上構(gòu)建突變質(zhì)粒并瞬 時(shí)轉(zhuǎn)染人腎胚-293 (human embryonic kidney, HEK-293)細(xì)胞。采用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)研 究突變通道的電生理特性,利用激光免疫共聚焦技術(shù)觀察突變蛋白的表達(dá)。結(jié)果先證者,男,55歲,發(fā)作夜間瀕死性呼吸后于第二天工作時(shí)間暈厥。急診心電圖顯示心房顫動(dòng) 。當(dāng)?shù)蒯t(yī)院靜脈輸入胺碘酮后,患者胸前區(qū)V2-V3導(dǎo)聯(lián)表現(xiàn)出顯著的ST段壓低伴有側(cè)壁導(dǎo)聯(lián) 早復(fù)極波。數(shù)分鐘后,該患者發(fā)作電風(fēng)暴。經(jīng)過(guò)基因檢測(cè),我們?cè)谠撃行韵茸C者中檢測(cè)到一 個(gè)未報(bào)道過(guò)的SCN5A基因的移碼突變,C280S*fs61。在轉(zhuǎn)染突變體質(zhì)粒的細(xì)胞中,全細(xì)胞膜片 鉗未記錄到鈉電流,且激光免疫共聚焦成像顯示該突變無(wú)法形成完成的鋼通道蛋白。在共轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中,野生型巧通道的電生理特性并未受到影響,進(jìn)而說(shuō)明鋼離子通道的單倍劑量不足時(shí)造成患者臨床表型的主要原因。結(jié)論本研究在一個(gè)早復(fù)極相關(guān)的特發(fā)性室顫患者中發(fā)現(xiàn)一個(gè)新的“功能喪失”的SCN5A新移碼突 變C280S*fs61,該患者在接受胺碘酮靜推后心電圖上表現(xiàn)為側(cè)壁導(dǎo)聯(lián)早復(fù)極及胸前區(qū)導(dǎo)聯(lián)ST 段壓低。背景致心律失常性右室心肌病(Arrhythmogenic Right Ventricular Cardiomyopathy, ARVC)是 引起年輕人及運(yùn)動(dòng)員出現(xiàn)室性心律失常和心源性猝死的一種常見(jiàn)的遺傳性心臟疾病。左束 支傳導(dǎo)阻滯(left bundle branch block, LBBB)伴電軸向下的室性心律失�？沙霈F(xiàn)于ARVC 和特發(fā)性右室流出道起源的室性心律失常(Right Ventricular Outflow Tract-Idiopathic Ventricular Arrhythmia, RVOT-IVA)兩種基質(zhì)。在臨床上兩種疾病的預(yù)后顯著不同,治療 策略也存在一定的差異。如何早期鑒別兩種心律失常是臨床探討的熱點(diǎn)。目的鑒于ARVC的不良預(yù)后,如何從簡(jiǎn)單易獲得的心電圖上對(duì)二者進(jìn)行初步鑒別,篩選高�；颊呔� 有重要的臨床意義。本研究回顧性比較兩種基質(zhì)下室性心律失常發(fā)作心電圖的的不同。方法本研究入選16例ARVC和45例RVOT-IVA患者(1：3入選)。收集患者臨床病史資料和25mm／s紙 速12導(dǎo)聯(lián)心電圖資料。收集的25mm/s紙速常規(guī)12導(dǎo)聯(lián)心電圖進(jìn)行測(cè)量比較。測(cè)量參數(shù)包括 ：(1)12導(dǎo)聯(lián)QRS波時(shí)程(2)胸前區(qū)移行導(dǎo)聯(lián)(3)12導(dǎo)聯(lián)QRS波頓挫(4)將12導(dǎo)聯(lián)分為側(cè)壁區(qū)、 下壁區(qū)、右室胸前區(qū)和左室胸前區(qū)。并將區(qū)域內(nèi)出現(xiàn)≥2個(gè)相鄰導(dǎo)聯(lián)出現(xiàn)QRS波頓挫為“寬 頓挫QRS波”結(jié)果與RVOT-IVA相比,ARVC患者室性心律失常發(fā)作時(shí)的QRS波時(shí)程更長(zhǎng),在Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ, aVL, aVF, and V1導(dǎo)聯(lián)上這一差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其中Ⅰ導(dǎo)聯(lián)上的差異最大(25.1☆5.8ms)。ARVC胸 前區(qū)移行≥V5發(fā)生率較高(6/16[37.5%] vs. 4/45[8.9%], P＜0.01)。兩組間QRS頓挫的發(fā) 生率(15/16[93.8%]vs.36/45[80.0%],P=0.20)及出現(xiàn)頓挫的導(dǎo)聯(lián)個(gè)數(shù)(2.88±2.0 vs.2.80 ±2.0,P=0.90)并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異�！皩掝D挫QRS波”出現(xiàn)于I導(dǎo)聯(lián)和aVL導(dǎo)聯(lián)在ARVC患者中更 常見(jiàn),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(43.8% vs.13.3%,p=0.011)。結(jié)論較長(zhǎng)的QRS時(shí)程,胸前區(qū)移行較晚及側(cè)壁導(dǎo)聯(lián)出現(xiàn)“寬頓挫QRS波”可用于早期粗略鑒別ARVC 及RVOT-IVA。背景慢性心力衰竭是一種致死致殘率較高的疾病,患病人群逐年增加,且發(fā)病率與患者的年齡呈 正相關(guān)。隨著急性心肌梗死的搶救成功率的提高,缺血心肌病導(dǎo)致的心衰患者逐年增長(zhǎng)。心 源性猝死和泵衰竭是心衰患者死亡的主要原因。近年來(lái),大量研究證據(jù)表明H2S通過(guò)多種信 號(hào)途徑參與心血管系統(tǒng)的生理功能的調(diào)節(jié)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,外源性補(bǔ)充H2S或增加內(nèi)源 性H2S的生成均可以改善急性心梗和心力衰竭動(dòng)物的預(yù)后,具有潛在的治療價(jià)值。目的探索編碼內(nèi)源性H2S生成酶上基因上的遺傳標(biāo)記物與缺血性心肌病所致慢性心衰長(zhǎng)期預(yù)后的 關(guān)系。方法本研究連續(xù)性入選自2005年7月至2009年12月就診于本院的缺血性心肌病所致的慢性心衰患 者944例�；颊逳YHA分級(jí)均為II到Ⅳ級(jí),LUEF≤50%.研究的隨訪截止至2014年8月,以電話和 門診隨訪進(jìn)行,主要終點(diǎn)事件包括全因死亡,心源性猝死和非心源性猝死。經(jīng)過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)后,共 有7個(gè)單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism,SNP)位點(diǎn)在所有入選患者中進(jìn)行 篩查。SNP分型鑒定采用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry, MALD-TOF)的方法進(jìn)行。結(jié)果經(jīng)過(guò)平均65個(gè)月的中位隨訪期后,共有332名(35.17%)患者在隨訪終點(diǎn)發(fā)生死亡事件,包括 123例(37.05%)心源性猝死和209例(62.95%)非心源性猝死。顯性模型下的單因素結(jié)果顯 示,GOT-1基因上的多態(tài)性位點(diǎn)rs2490281在死亡與非死亡組中的分布具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,該位 點(diǎn)位于編碼CAT基因的啟動(dòng)子區(qū)。校正多種危險(xiǎn)因素后,該多態(tài)性位點(diǎn)上的C等位基因可以使 患者發(fā)生全因死亡和非心源性猝死的風(fēng)險(xiǎn)增加(HR 1.608,95% CI 1.155-2.239, P=0.005; HR 1.778,95%CI 1.181-2.676,P=0.006)。多因素回歸分析顯示,rs2490281與較低的基線左 室射血分?jǐn)?shù)水平(LVEF≤35%)具有一定的相關(guān)性(OR 1.783,95% CI 1.099-2.890, P=0.019) 。結(jié)論GOT-1基因上的多態(tài)性位點(diǎn)rs2490281是中國(guó)漢族缺血性心肌病患者全因死亡和非心源性猝 死的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,內(nèi)源性H2S生成酶編碼基因上的多態(tài)性可能會(huì)影響心衰患者的嚴(yán)重程度 及遠(yuǎn)期預(yù)后。
【圖文】：

北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院邐博±研巧生學(xué)位論細(xì)胞膜片巧記錄方法，在電壓錯(cuò)制模式下記錄快速電流。逡逑６．膜片放大器通過(guò)Ａ／Ｄ和Ｄ／Ａ數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換器通計(jì)算機(jī)相連接。刺激信號(hào)機(jī)壓、電流輸入信號(hào)的采集均由軟件ｐＣｌａｍｅｘ邋１０．０控審ｉｊ。玻璃毛胚經(jīng)微電極制化拉制而成。調(diào)節(jié)蘭維操縱器使電極尖端移向細(xì)胞表面，形成高阻封（Ｇｉｇａ邋ｓｅａｌ），封接電阻１ＧＱＷ上。補(bǔ)償快電容并吸破細(xì)胞膜形成全細(xì)胞錄模式。調(diào)節(jié)慢電容補(bǔ)償和串聯(lián)電阻補(bǔ)償７０％－８０％（＾減少瞬時(shí)充放電和巧誤差。信號(hào)經(jīng)截止頻率為ＩＫＨｚ的四階貝塞爾低通濾器濾波。實(shí)驗(yàn)在室２２－２４°Ｃ下進(jìn)行。為了避免通道電流的衰減現(xiàn)象，電極內(nèi)液添加ＡＴＰ，并制實(shí)驗(yàn)在細(xì)胞破膜后的１５分鐘內(nèi)完成。采樣后數(shù)據(jù)儲(chǔ)存在硬盤內(nèi)，１＾１便量分析通道的電生理特性。逡逑巧城}ｒ玲逡逑

患者開始發(fā)作也室顫動(dòng)，共計(jì)發(fā)作６次。給予緊急胸外按壓、電除顫、靜脈逡逑輸入ｅ受體阻滯劑和補(bǔ)充血鐘后得（ｉｊｌ控制。次日復(fù)g９嬉駁繽枷允荊頰擼傻煎義狹埃幔觶痰劑魷衷綹醇�，。而袇嚢区祫┆堰h(yuǎn)窩溝痛撕笪叢儼蹲降劍ㄍ跡常�。辶x希�、基因检n,逡逑由于該先證者無(wú)兄弟姊妹，因此我們對(duì)先證者及其子女進(jìn)行了目前已知的與逡逑Ｂｍｇａｄａ綜合征和早復(fù)極綜合征相關(guān)的１２種致病基因的篩查。在該先證者中，，逡逑我們發(fā)現(xiàn)既往未報(bào)道的ＳＣＮ５Ａ基因的雜合突變。這一突變位于鋼通道第二個(gè)外逡逑顯子，由于編碼基因第８３９位鳥喀巧（Ｇ）的缺失（ｃ．８３９ｄｅｌＧ），導(dǎo)致蛋白第２８０逡逑位的氨基酸由半腕氨酸（ｃｙｓｔｅｉｎｅ，Ｃ）被絲氨酸（Ｓｅｒｉｎｅ，Ｓ）所替化隨后在終止密逡逑２２逡逑
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R541.7;R541.6


本文編號(hào)：2695449