【摘要】：目的:C型鈉尿肽(C-type natriureticpeptid,CNP)是鈉尿肽家族成員之一。有研究表明,CNP對心肌細胞具有抗肥大和纖維化的作用。然而,CNP對血管緊張素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)誘導連接蛋白失調的作用尚不清楚。本研究利用離體搏動的大鼠心房研究CNP對Ang Ⅱ誘導心房肌組織連接蛋白失調的作用及其機制。方法:采用大鼠離體搏動的心房灌流裝置,選用AngⅡ制備心房肌連接蛋白失調模型,并用CNP干預模型,然后利用蛋白印跡技術(western blot,WB)檢測連接蛋白失調相關蛋白表達變化。結果:過量的Ang Ⅱ顯著上調核轉錄因子NF-κB和AP-1,激活轉化生長因子-β1(growth factor-beta 1,TGF-β1),從而增加膠原蛋白 Ⅰ(CollagenⅠ)和基質金屬蛋白酶2(matrixmetalloproteinases,MMP2)的表達,最終導致心肌纖維化和連接蛋白40(Connexin40,Cx40)及Cx43的顯著下調。而CNP可完全阻斷AngⅡ對核轉錄因子、TGF-β1、Collagen Ⅰ、MMP2、Cx40及Cx43表達的作用,并伴有腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)的明顯激活。CNP的這種作用可被KT5823(protein kinase G,PKG的抑制劑)和百日咳毒素(pertussis toxin;natriuretic peptide C receptor,NPR-C 的抑制劑)所阻斷。結論:CNP可通過NPR-B和NPR-C激活AMPK信號通路,從而抵制Ang Ⅱ誘導的心房肌纖維化和連接蛋白表達失調的作用。表明,CNP-NPR-AMPK信號通路有望成為干預心肌連接蛋白失調性疾病的治療策略。
【圖文】：

延邊大學碩士學位論文邐實驗材料與方法逡逑圖２．心房灌流過程示意圖逡逑２．５．３蛋白免疫印跡分析逡逑２．５．３．１實驗原理逡逑蛋白免疫印跡（Ｗｅｓｔｅｒｎ邋ｂｌｏｔ，邋ＷＢ）實驗是將電泳分離后的細胞或組逡逑織總蛋白質從凝膠轉移到固相支持物ＰＶＤＦ膜上。以固相載體上的蛋白逡逑質或多肽作為抗原，與對應的抗體（一抗）起免疫反應，再與酶或同位素逡逑標記的第二抗體起反應，，經過底物顯色以檢測電泳分離的特異性目的基逡逑因表達的蛋白成分。逡逑２＿５．３．２總蛋白的提取逡逑將置于－８０邋°Ｃ條件保存的心房肌組織取出，用眼科剪去除多余組織，逡逑置于含有裂解液（ＲＩＰＡ邋３００ｐｌ＋ＰＭＳＦ邋３＾１）的高溫滅菌的ＥＰ管中，剪碎，逡逑低溫下勻漿數次（確保每次勻漿的時間、速度和次數都一致），以上操作逡逑均應保證在冰上進行，且操作需快速完成。隨后以１５０００邋ｒｐｍ速度在４邋°Ｃ逡逑條件下離心３次
【學位授予單位】：延邊大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R541

【參考文獻】

相關期刊論文 前1條

1 陳蓉;謝梅林;;異丙腎上腺素致小鼠心肌纖維化模型的制備及評價[J];中國藥理學通報;2014年09期

相關博士學位論文 前1條

1 丁大植;C型鈉尿肽對心房機械活動的影響及其機制探討[D];延邊大學;2010年

相關碩士學位論文 前1條

1 簡悅;二甲雙胍調節(jié)AMPK/NF-κB信號通路對大鼠肺纖維化的影響[D];遵義醫(yī)學院;2017年

本文編號：2673653