【摘要】：目的:用ox LDL處理后含大量脂質(zhì)的小鼠巨噬細(xì)胞為泡沫細(xì)胞,視為動脈粥樣硬化形成過程,檢測促動脈粥樣硬化環(huán)境下巨噬細(xì)胞自噬功能的變化,以及黃連素對其調(diào)節(jié)作用及其分子機(jī)制。方法:培養(yǎng)小鼠巨噬細(xì)胞J774A.1,構(gòu)建泡沫細(xì)胞模型,將細(xì)胞隨機(jī)分為5組,分別是正常對照組,25ng/μl氧化低密度脂蛋白(ox LDL)組,50ng/μl ox LDL組,75ng/μl ox LDL組,100ng/μlox LDL組:分別用油紅O檢測細(xì)胞脂質(zhì)含量,用CD36作為巨噬細(xì)胞脂質(zhì)代謝的標(biāo)志蛋白,收集蛋白,Westren-blot檢測CD36的變化。為研究黃連素對巨噬細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白Beclin-1、LAMP、P53、Bcl-2的m RNA表達(dá)的影響,將細(xì)胞隨機(jī)分為5組,正常對照組,6.25μM黃連素(BBR)組,12.5μM BBR組,25μM BBR組,50μM BBR組,分別提取總RNA,逆轉(zhuǎn)錄成c DNA,Real Time PCR檢測自噬相關(guān)蛋白Beclin-1、LAMP、P53、Bcl-2的m RNA表達(dá)的變化。更深一步研究BBR對泡沫細(xì)胞脂質(zhì)累積以及自噬功能的影響,將細(xì)胞隨機(jī)分為4組,正常對照組,75 ng/μlox LDL組,75 ng/μlox LDL+25μMBBR組,75 ng/μlox LDL+25μM BBR+氯喹30μM(CQ)組,收集蛋白,Westren-blot檢測自噬標(biāo)志蛋白P62,LC3的變化,以及CD36的變化。結(jié)果:1.油紅O染色結(jié)果顯示,在50 ng/μl、75 ng/μl、100 ng/μl ox LD濃度下脂質(zhì)含量超過細(xì)胞體積的50%,Westren-blot結(jié)果顯示,CD36在ox LDL濃度為25 ng/μl,50 ng/μl,75 ng/μl明顯升高,在100 ng/μl濃度下升高不明顯。表明泡沫細(xì)胞造模成功。2.Beclin-1的m RNA表達(dá)水平在BBR25μM的濃度下增加最明顯,LAMP在12.5μM、25μM明顯增加,BBR12.5μM的濃度下增加最明顯,P53的m RNA表達(dá)水平在BBR25μM明顯增加,Bcl-2的m RNA表達(dá)水平在BBR6.25μM、12.5μM、25μM、50μM均明顯增加。3.加入BBR后LC3Ⅱ/LC3Ⅰ稍有增加,P62稍有減少,加入BBR后CD36減少。結(jié)論:BBR可以增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的自噬,并通過增強(qiáng)自噬,促進(jìn)巨噬細(xì)胞的脂質(zhì)代謝,減少泡沫細(xì)胞的形成。
【學(xué)位授予單位】：寧波大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R543.5

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 廖成水;毛福超;程相朝;;巨噬細(xì)胞極化在微生物感染中的作用研究進(jìn)展[J];中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào);2019年03期

2 邢士剛;;巨噬細(xì)胞在慢性阻塞性肺疾病發(fā)病機(jī)制中的作用研究[J];中國實(shí)用醫(yī)藥;2019年12期

3 徐曉偉;魏建超;劉珂;邵東華;李蓓蓓;曹瑞兵;陳溥言;馬志永;胡敬東;邱亞峰;;不同激活狀態(tài)的巨噬細(xì)胞對流行性乙型腦炎病毒感染的影響[J];中國動物傳染病學(xué)報(bào);2019年02期

4 付威;姜英;王婷玉;張赫;董佳琦;萬朋;;巨噬細(xì)胞極化與腫瘤的研究進(jìn)展[J];吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報(bào);2019年02期

5 巢汝;黃靚;屈順林;張弛;;巨噬細(xì)胞能量代謝與動脈粥樣硬化[J];生命的化學(xué);2018年03期

6 崔凡;穰真;王有為;楊戈;;AIDS患者巨噬細(xì)胞對白念珠菌的吞噬和滅活功能研究[J];中國麻風(fēng)皮膚病雜志;2017年04期

7 孟董超;王東;宋娟;盧彥珍;;巨噬細(xì)胞極化在冠狀動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展中的作用研究進(jìn)展[J];長治醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2017年02期

8 李雪巖;楊玉玉;陳君;;中藥抗巨噬細(xì)胞泡沫化的研究進(jìn)展[J];藥學(xué)與臨床研究;2017年05期

9 袁鋒;尚茹茹;張錦;溫婷;李愛萍;劉曉紅;;巨噬細(xì)胞極化與動脈粥樣硬化[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2015年22期

10 高雙英;吳靜;楊貴麗;;結(jié)腸癌腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞的浸潤和MMP-2的表達(dá)、血管生成關(guān)系的研究[J];中國免疫學(xué)雜志;2016年03期

相關(guān)會議論文 前10條

1 姚芳苡;黃自坤;傅穎媛;;人巨噬細(xì)胞極化相關(guān)長鏈非編碼RNA表達(dá)譜篩選及研究[A];第十二屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會摘要匯編[C];2017年

2 李枋;霏李杰;;扶正解毒方對共培養(yǎng)體系下腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞表型變化影響的實(shí)驗(yàn)研究[A];第一屆青年中西醫(yī)結(jié)合腫瘤學(xué)術(shù)論壇論文集[C];2015年

3 白力;張文蘭;竇晶莉;王永福;;組蛋白修飾與巨噬細(xì)胞極化的關(guān)系[A];第十屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會匯編[C];2015年

4 史玉玲;王又明;豐美福;;巨噬細(xì)胞激活作用的研究[A];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會第五次會議論文摘要匯編[C];1992年

5 程相朝;毛福超;廖成水;;巨噬細(xì)胞極化形成的影響因素研究進(jìn)展[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會動物微生態(tài)學(xué)分會第五屆第十三次全國學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2018年

6 曾嬌;;巨噬細(xì)胞極化對炎癥性疾病的影響[A];第十三屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會摘要匯編[C];2018年

7 李小鵬;張倫理;;巨噬細(xì)胞極化現(xiàn)象與結(jié)核病的關(guān)系[A];中華醫(yī)學(xué)會2014全國微生物學(xué)與免疫學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2014年

8 陳羅泉;萬曉朋;韓泉;王青青;;白細(xì)胞介素27在巨噬細(xì)胞抗病毒天然免疫應(yīng)答中的作用研究[A];浙江省免疫學(xué)會第十次學(xué)術(shù)大會論文集[C];2016年

9 馬曉媛;田李星;靳賀;梁華平;;創(chuàng)傷/燒傷后單核—巨噬細(xì)胞變化及調(diào)節(jié)措施研究進(jìn)展[A];2015第十一屆全國中西醫(yī)結(jié)合災(zāi)害醫(yī)學(xué)大會、江蘇省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會第二屆災(zāi)害醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議、中華衛(wèi)生應(yīng)急電子雜志第二屆編委會會議暨2015江蘇國際醫(yī)療器械科技博覽會學(xué)術(shù)論文集[C];2015年

10 馬翠卿;胡光磊;尹曉琳;胡潔;楊建嶺;王秀榮;魏林;;A族鏈球菌誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞壞死而非凋亡[A];河北省免疫學(xué)會第六次免疫學(xué)大會資料匯編[C];2010年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 主持人 王建新;巨噬細(xì)胞的多面人生[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2015年

2 通訊員 李靜 記者 胡德榮;惡性腫瘤巨噬細(xì)胞未必皆“惡人”[N];健康報(bào);2014年

3 張化;新技術(shù)有望延長血小板保存期[N];中國醫(yī)藥報(bào);2003年

4 張化;半乳糖可延長血小板保存期[N];中國醫(yī)藥報(bào);2003年

5 蘭克;以嘗試用巨噬細(xì)胞治癱瘓[N];科技日報(bào);2000年

6 記者 張家偉;巨噬細(xì)胞水平影響血壓高低[N];健康報(bào);2019年

7 記者 房琳琳;“別吃我”! 癌細(xì)胞還有第二種方式對巨噬細(xì)胞這樣說[N];科技日報(bào);2017年

8 本報(bào)記者 張曄 通訊員 蔡心軼 張翰文;肥胖傷肝？原來是巨噬細(xì)胞在作怪[N];科技日報(bào);2016年

9 唐穎 倪兵 陳代杰;巨噬細(xì)胞泡沫化抑制劑研究快步進(jìn)行[N];中國醫(yī)藥報(bào);2006年

10 侯嘉 何新鄉(xiāng);硒的神奇功能[N];中國食品質(zhì)量報(bào);2003年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 李華;結(jié)核分枝桿菌誘導(dǎo)的人巨噬細(xì)胞蛋白質(zhì)組研究及快生菌構(gòu)建探索[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2017年

2 范婷婷;TIPE2調(diào)控調(diào)節(jié)性T細(xì)胞胸腺外遷及M2巨噬細(xì)胞極化的分子機(jī)制研究[D];中國科學(xué)院大學(xué)(中國科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院);2018年

3 成雪;酪蛋白糖肽抑制巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)的分子機(jī)制研究[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

4 邵柏棕;巨噬細(xì)胞β-arrestin-1在動脈粥樣硬化和多發(fā)性硬化中的作用及機(jī)制研究[D];中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué);2018年

5 施翔翔;巨噬細(xì)胞CCL20和IL-17的調(diào)控機(jī)制及其與冠心病的關(guān)系研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2018年

6 朱啟金;高糖刺激巨噬細(xì)胞源外泌體對腎小球系膜細(xì)胞的作用及機(jī)制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2018年

7 呂丹;緩釋Ⅵ型膠原誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞極化促進(jìn)大鼠坐骨神經(jīng)缺損再生的應(yīng)用研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2017年

8 譚炳合;Lgr4介導(dǎo)的巨噬細(xì)胞極化在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用及機(jī)制研究[D];華東師范大學(xué);2016年

9 于瀚卿;肝癌細(xì)胞對巨噬細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號傳遞及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激巨噬細(xì)胞外泌體對肝癌細(xì)胞凋亡的影響和機(jī)制[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2018年

10 岳瑞超;MAP誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)的巨噬細(xì)胞凋亡及其對小鼠感染M.bovis的影響[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2019年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 高夢娜;β型葉酸受體陽性巨噬細(xì)胞作為肝纖維化分期診療標(biāo)志物及SPECT成像的應(yīng)用[D];廈門大學(xué);2017年

2 丁丁;人CD163+巨噬細(xì)胞通過IL-17A調(diào)節(jié)動脈粥樣硬化的研究[D];廈門大學(xué);2017年

3 張金夏;巨噬細(xì)胞ATP6V0d2在肥胖病程發(fā)展中的作用[D];華中科技大學(xué);2018年

4 胡丹麗;激肽釋放酶-1過表達(dá)通過選擇性調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞的極化延緩心臟衰老[D];華中科技大學(xué);2018年

5 吳曉玲;TFF2調(diào)控脂多糖誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞活化并拮抗炎癥的功能與機(jī)制[D];廈門大學(xué);2017年

6 陳建閃;鋅、NAC對雞巨噬細(xì)胞鎘中毒的保護(hù)作用[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2017年

7 密泗宇;黃連素對動脈粥樣硬化中巨噬細(xì)胞自噬功能調(diào)控機(jī)制的研究[D];寧波大學(xué);2018年

8 王義乾;骨髓誘導(dǎo)分化巨噬細(xì)胞的制備及組蛋白甲基化修飾對巨噬細(xì)胞釋放IL-6和TNF-α的影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

9 劉英光;GPR120受體在巨噬細(xì)胞功能調(diào)節(jié)中的作用[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2018年

10 高弘斐;外周血間充質(zhì)干細(xì)胞對巨噬細(xì)胞和Th17/Treg細(xì)胞平衡的體外調(diào)節(jié)研究[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2018年

，

本文編號：2655051