【摘要】：[背景]炎癥浸潤和基質(zhì)降解是腹主動脈瘤(abdominal aortic aneurysm,AAA)兩大重要的病理機(jī)制。巨噬細(xì)胞和主動脈平滑肌細(xì)胞是參與AAA形成最重要的細(xì)胞,可以通過分泌基質(zhì)金屬蛋白(matrix metalloproteinases,MMPs)和炎性因子,誘導(dǎo)AAA的發(fā)生發(fā)展。吸煙是引起AAA重要并可控的因素。由alpha7煙堿乙酰膽堿能受體(alpha7 nicotine acetylcholine receptor,α7-nAChR)和傳出迷走神經(jīng)、神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿組成的膽堿能抗炎通路可抑制炎癥反應(yīng),治療炎癥性疾病。[目的]本研究目的是明確α7-nAChR(采用選擇性激動劑PNU-282987)是否影響尼古丁誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞(RAW264.7細(xì)胞)和主動脈平滑肌細(xì)胞(MOVAS細(xì)胞)MMPs和炎性因子的分泌及研究其潛在可能的分子機(jī)制。[方法和結(jié)果]首先,給予RAW264.7和MOVAS細(xì)胞10 ng/ml的尼古丁刺激0,10,20,30,60和120 min。其次,給予0,1,10,100ng/ml尼古丁刺激RAW264.7和MOVAS細(xì)胞30 min。結(jié)果顯示,尼古丁誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞ERK1/2和c-Jun的磷酸化蛋白的表達(dá)。MEK1/2高度選擇性抑制劑U0126抑制尼古丁誘導(dǎo)ERK1/2磷酸化蛋白的高表達(dá),進(jìn)而下調(diào)了尼古丁誘導(dǎo)c-Jun的磷酸化及MMP-9,MMP-2,MCP-1和RANTES蛋白和mRNA的高表達(dá)。同樣的,尼古丁可以顯著提高了MOVAS細(xì)胞的c-Jun磷酸化蛋白的表達(dá)水平,促進(jìn)了MMP-9,MMP-2,MCP-1和RANTES蛋白和mRNA的表達(dá)。予PNU-282987預(yù)處理RAW264.7和MOVAS細(xì)胞后,發(fā)現(xiàn)尼古丁誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞ERK1/2和c-Jun磷酸化及MOVAS細(xì)胞c-Jun磷酸化明顯受到抑制。進(jìn)而,尼古丁誘導(dǎo)的MMP-9,MMP-2,MCP-1和RANTES蛋白和mRNA的高表達(dá)顯著下調(diào)。[結(jié)論] α7-nAChR在巨噬細(xì)胞中通過調(diào)節(jié)ERK1/2/AP-1(c-Jun)信號通路抑制尼古丁誘導(dǎo)MMP-9,MMP-2,MCP-1和RANTES表達(dá)的上調(diào),在主動脈平滑肌細(xì)胞中通過調(diào)節(jié)AP-1(c-Jun)信號傳導(dǎo)抑制尼古丁誘導(dǎo)MMP-9,MMP-2,MCP-1和RANTES表達(dá)的上調(diào)。α7-nAChR激動劑有望成為AAA新的治療方案。
【圖文】：

圖 1. 尼古丁誘導(dǎo) RAW264.7 細(xì)胞磷酸化 ERK1/2 和 c-Jun 蛋白的高表達(dá)。A）10 ng/ml 尼古丁刺激 RAW264.7 細(xì)胞 0，10，20，30，60 和 120 min。（E）0，0 和 100ng/ml 尼古丁刺激 RAW264.7 細(xì)胞 30 min。收集細(xì)胞裂解產(chǎn)物，用 Western b測定 p-ERK1/2，ERK1/2，p-c-Jun，c-Jun，p-p65 和 p65 的蛋白水平。p-ERK1/2（B 和），p-c-Jun（C 和 G）和 p-p65（D 和 H）的條帶灰度值（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）使用圖像 J 進(jìn)行測定，所有測量值均來自三個(gè)獨(dú)立的不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，GAPDH 作為實(shí)驗(yàn)內(nèi)參。

2 U0126 抑制尼古丁誘導(dǎo) RAW264.7 細(xì)胞 ERK1/2 和 c-Jun 的激活以及 MMP-9，MMP-，MCP-1 和 RANTES 蛋白和 mRNA 表達(dá)的上調(diào)。（A）先予 10μm 和 20μm U0126 預(yù)處理 RAW264.7 細(xì)胞 30 min，再予 10ng/ml 尼古丁刺激 30 min。用 Western blot 測定 p-ERK1/2，ERK1/2，p-c-Jun 和 c-Jun 蛋白水平。（D）先予 10μm 和 20μm U0126 預(yù)處理AW264.7 細(xì)胞 30 min，再予 10ng/ml 尼古丁刺激 3 h。采用 Western blot 測定 MMP-9，MMP-2，MCP-1 和 RANTES 蛋白水平。Western blot 蛋白條帶（B，C 和 E-H）灰度值（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）使用圖像 J 軟件進(jìn)行測定。MMP-9 (I) ，，MMP-2 (J) ，MCP-1 (K)和
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R543.16

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 胡連鋒;周文琳;;結(jié)核及肺癌所致胸腔積液中MCP-1、RANTES的表達(dá)水平及臨床意義[J];癌癥進(jìn)展;2016年12期

2 邵雷;陳雄;黃紅霞;黃耿;李萍華;何成文;潘富林;;尿RANTES水平與狼瘡腎炎病理類型的相關(guān)性研究[J];數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志;2016年08期

3 徐偉樂;馬輝;齊海亮;王娜;李輝;;RANTES基因多態(tài)性與結(jié)核性膿胸發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系[J];河北醫(yī)藥;2015年09期

4 聶倫;吳文言;;RANTES衍生物與HIV-1進(jìn)入抑制劑[J];中國生物工程雜志;2013年02期

5 車建華;劉倩;;趨化因子RANTES生物學(xué)特性及在子宮內(nèi)膜異位癥中的作用初探[J];中國優(yōu)生與遺傳雜志;2012年05期

6 曾秀華;周明;魯愛民;王春平;許學(xué)嵐;石瑾秋;;RANTES基因多態(tài)性與子宮內(nèi)膜異位癥的相關(guān)性研究[J];中國優(yōu)生與遺傳雜志;2012年07期

7 段梅;;趨化性因子RANTES作用的研究[J];中國醫(yī)學(xué)工程;2011年09期

8 周靜;韓素萍;劉嘉茵;;趨化因子RANTES與子宮內(nèi)膜異位癥[J];國外醫(yī)學(xué)(婦產(chǎn)科學(xué)分冊);2007年01期

9 姚玲;龔衛(wèi)娟;;RANTES拮抗劑的研究進(jìn)展[J];國際免疫學(xué)雜志;2006年03期

10 ;RANTES gene single nucleotide polymorphisms and expression in patients with chronic hepatitis B virus infection[J];Chinese Medical Journal;2005年11期

相關(guān)會議論文 前10條

1 Lihan Wang;Xinyang Hu;Shoude Zhang;Xu Xin;Jianan Wang;;Association of the CCR5Δ32 polymorphism and its ligand RANTES-403G/A polymorphism with coronay artery disease: a meta-analysis[A];中華醫(yī)學(xué)會第十五次全國心血管病學(xué)大會論文匯編[C];2013年

2 鄒和群;王國勤;姚娟;王沛;;單核細(xì)胞趨化因子1和RANTES在慢性同種移植腎病中的表達(dá)及意義[A];“中華醫(yī)學(xué)會腎臟病學(xué)分會2004年年會”暨“第二屆全國中青年腎臟病學(xué)術(shù)會議”論文匯編[C];2004年

3 柳志文;李鳳娥;陳建生;;口腔扁平苔蘚組織中RANTES表達(dá)的研究[A];中華口腔醫(yī)學(xué)會第六屆全國口腔黏膜病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2004年

4 包琪;宗曉明;潘燕;戚向敏;;正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的活性調(diào)節(jié)蛋白(RANTES)在口腔扁平苔蘚中的表達(dá)[A];第七屆全國口腔黏膜病暨第五屆口腔中西醫(yī)結(jié)合大會論文匯編[C];2008年

5 楊麗霞;齊峰;;聯(lián)合檢測MCP-1、RANTES趨化因子在急性冠狀動脈綜合征診治中的變化及意義[A];第十三次全國心血管病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2011年

6 王麗珩;曹正鋒;劉丹;錢莉;龔衛(wèi)娟;季明春;;雙表達(dá)外源性4-1BBL／RANTES的K562細(xì)胞活化外周血淋巴細(xì)胞的研究[A];中國免疫學(xué)會第五屆全國代表大會暨學(xué)術(shù)會議論文摘要[C];2006年

7 時(shí)鵬;屈洪黨;李強(qiáng);陳育華;李倩倩;謝靜;;帕金森病患者血清RANTES及炎癥因子的水平及其臨床意義[A];華東六省一市第二十三次神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議暨2016年浙江省神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2016年

8 李臻;孫質(zhì)健;馬斌芳;張金山;張遠(yuǎn)強(qiáng);;趨化因子RANTES在人和小鼠附睪內(nèi)的表達(dá)及功能初探[A];中國解剖學(xué)會第十一屆全國組織學(xué)與胚胎學(xué)青年學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2009年

9 成煥吉;具楊花;李亞男;劉麗;;呼吸道合胞病毒感染對哮喘小鼠RANTES表達(dá)的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會第十三屆全國兒科呼吸學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2012年

10 李臻;孫質(zhì)健;趙潔;張遠(yuǎn)強(qiáng);;β-趨化性細(xì)胞因子RANTES及其受體在人附睪中的表達(dá)[A];中國生理學(xué)會2007年消化內(nèi)分泌生殖學(xué)術(shù)研討會論文摘要匯編[C];2007年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前1條

1 ;漢族人群RANTES基因多態(tài)性與艾滋病病毒－1感染關(guān)系的初步研究[N];中國醫(yī)藥報(bào);2003年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 劉麗萍;α7-nAChR抑制尼古丁誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞和主動脈平滑肌細(xì)胞MMP-9，MMP-2，MCP-1和RANTES表達(dá)的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2018年

2 張煒煒;RANTES在顱內(nèi)外動脈粥樣硬化發(fā)生中的作用研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2010年

3 劉雪林;趨化因子RANTES基因多態(tài)性及其在HIV-1感染和發(fā)病中的作用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2004年

4 李臻;β-趨化性細(xì)胞因子CCL5/RANTES促進(jìn)巨噬細(xì)胞對凋亡細(xì)胞的吞噬[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2004年

5 史業(yè)輝;表達(dá)可溶性TGF-βRⅡ胞外區(qū)和RANTES基因的腺病毒載體構(gòu)建以及聯(lián)合用于腫瘤治療的實(shí)驗(yàn)研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2004年

6 李丹;RANTES與SARS-CoV、HIV-1感染的初步研究[D];浙江大學(xué);2005年

7 王旭東;表達(dá)分泌型sTβRⅡ胞外區(qū)-RANTES融合基因重組腺病毒的構(gòu)建及抗腫瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2005年

8 李瑩;RANTES與SPARC基因在角膜移植排斥反應(yīng)中的表達(dá)[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2000年

9 李軍;趨化因子MIP-1α、RANTES及其受體CCR5在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的表達(dá)及來氟米特的相關(guān)研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2003年

10 王浩洋;PAR2介導(dǎo)的中性粒細(xì)胞乳鐵蛋白和IL-8的釋放以及嗜酸性粒細(xì)胞IL-5，IL-6和RANTES的釋放[D];汕頭大學(xué);2006年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 王春雪;VEGF-A、MCP-1及RANTES在血液透析患者自體動靜脈內(nèi)瘺狹窄部位表達(dá)的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2017年

2 馬斌芳;RANTES受體在人附睪中的表達(dá)及功能研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2016年

3 張松林;毛細(xì)支氣管炎患兒T細(xì)胞亞群、ICAM-1及RANTES檢測意義的研究[D];鄭州大學(xué);2010年

4 唐曦平;狼瘡性腎炎患者血、尿RANTES研究的意義[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2005年

5 羅方;白介素-1β刺激人眼球后成纖維細(xì)胞表達(dá)和分泌RANTES的實(shí)驗(yàn)研究[D];鄭州大學(xué);2004年

6 鹿梁燕;顳葉癲癇大鼠海馬結(jié)構(gòu)中RANTES的表達(dá)[D];中南大學(xué);2013年

7 吳學(xué)寶;豬瘟病毒影響RANTES產(chǎn)生分子機(jī)制的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

8 朱加進(jìn);雷公藤甲素對糖尿病大鼠腎臟RANTES的影響[D];浙江中醫(yī)藥大學(xué);2013年

9 王艷偉;PRRSV感染激活RANTES產(chǎn)生的信號通路研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

10 李明暉;趨化因子MCP-1、RANTES在結(jié)核性與惡性胸腔積液中的表達(dá)及臨床價(jià)值[D];浙江大學(xué);2008年

本文編號：2627783