【摘要】：目的:本研究通過(guò)篩選噬血細(xì)胞性淋巴組織細(xì)胞增生癥(Hemophagocytic lymphohistiocytosis,HLH)患者血漿中差異性miRNA表達(dá)譜,尋找與HLH疾病發(fā)生相關(guān)的miRNA,并分析其表達(dá)水平與臨床實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的相關(guān)性,初步探討異常表達(dá)的miRNA在HLH發(fā)病機(jī)制中的作用。方法:收集2017年1月~2019年2月在南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院血液科首次確診的28例HLH患者的血漿,所有患者均符合HLH-2004指南的診斷標(biāo)準(zhǔn)。同期收集15例健康體檢者的血漿,性別和年齡與HLH患者匹配。應(yīng)用基因芯片技術(shù)檢測(cè)并篩選HLH患者血漿中差異性表達(dá)的miRNA,并采用熒光定量PCR檢測(cè)血漿中miR-125a-3p和miR-320a的表達(dá)水平。運(yùn)用SPSS軟件分析miR-125a-3p和miR-320a表達(dá)水平與臨床指標(biāo)的相關(guān)性,受試者工作特征曲線(ROC曲線)評(píng)估m(xù)iR-125a-3p和miR-320a對(duì)HLH的診斷價(jià)值。結(jié)果:1、28例HLH患者均表現(xiàn)為發(fā)熱、脾大及血清鐵蛋白升高,64.29%的患者存在噬血現(xiàn)象,全血細(xì)胞減少的患者占96.43%,僅有35.71%的患者表現(xiàn)為低纖維蛋白原血癥,sCD25升高的患者約82.14%。HLH患者的年齡和性別與對(duì)照組無(wú)差異(P=0.399)。2、基因芯片篩查結(jié)果顯示,在HLH患者血漿中共篩選出差異性表達(dá)的miRNA有24個(gè),與正常人比較,有20個(gè)miRNA的表達(dá)顯著上調(diào),4個(gè)miRNA的表達(dá)顯著下調(diào)。3、HLH患者和對(duì)照組血漿中miR-125a-3p的表達(dá)水平分別為7.21±1.48和1.53±0.34,與正常人相比,HLH患者血漿中miR-125a-3p的表達(dá)上調(diào),差異有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P(27)0.001);miR-320a在HLH患者血漿中的表達(dá)水平較正常人明顯上調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(5.83±1.59和1.33±0.31,P(27)0.001)。4、血漿miR-125a-3p的表達(dá)水平與HLH患者的臨床資料相關(guān)性分析顯示,miR-125a-3p的表達(dá)與患者的性別、年齡、噬血現(xiàn)象、Fbg及sCD25等指標(biāo)無(wú)顯著相關(guān)性。miR-125a-3p的表達(dá)與實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)WBC和ANC呈負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別為(r(28)-0.463,p=0.013)和(r(28)-0.435,p=0.021)。血漿miR-320a的表達(dá)水平與LDH(r(28)0.531,p(28)0.004)和SCr(r(28)0.623,p=0.0004)呈正相關(guān),miR-320a的表達(dá)與性別、年齡、噬血現(xiàn)象、Fbg及sCD25等指標(biāo)無(wú)相關(guān)性。5、ROC曲線分析顯示,miR-125a-3p和miR-320a運(yùn)用于HLH的診斷時(shí),其曲線下面積(AUC)分別為0.783和0.719,敏感性分別為78.6%和53.6%,特異性分別為66.7%和93.3%,最佳臨界值分別為1.61和3.03。結(jié)論:1、HLH患者血漿中存在特異性的miRNA表達(dá)譜,為HLH的發(fā)病及診斷提供了新靶點(diǎn)。2、血漿miR-125a-3p和miR-320a在HLH患者中的表達(dá)明顯上調(diào),提示miR-125a-3p和miR-320a可能與HLH的發(fā)病密切相關(guān)。3、血漿miR-125a-3p的表達(dá)上調(diào)與HLH患者的WBC和ANC數(shù)量相關(guān)性明顯,提示miR-125a-3p可能參與了HLH細(xì)胞因子的產(chǎn)生及免疫細(xì)胞的活化;miR-320a表達(dá)上調(diào)越明顯,HLH患者肝、腎功能損害的程度越高,表明miR-320a促進(jìn)炎癥反應(yīng)。4、miR-125a-3p和miR-320a可能是診斷HLH的潛在生物標(biāo)志物。
【圖文】：

第 3 章 結(jié)果3.2基因芯片結(jié)果利用基因芯片技術(shù)，我們將 11 例 HLH 患者的血漿樣本作為病例組，3 例健康體檢者血漿樣本作為對(duì)照組，進(jìn)行 miRNA 表達(dá)的檢測(cè)。對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化分析后形成了 miRNA 的表達(dá)譜，芯片類(lèi)聚類(lèi)圖如圖 1 所示，與健康對(duì)照組相比，其中有 20 個(gè) miRNA 的表達(dá)上調(diào)，4 個(gè) miRNA 的表達(dá)下調(diào)（見(jiàn)表 7）。

圖 2：qRT-PCR 擴(kuò)增曲線圖（A：miR-125a-3p，B：miR-320a）A B圖 3：qRT-PCR 溶解曲線圖（A：miR-125a-3p，B：miR-320a）3.4 miR-125a-3p和miR-320a在HLH患者和對(duì)照組中表達(dá)水平的比較表8所示，HLH患者miR-125a-3p的表達(dá)量為7.21±1.48，miR-320a的表達(dá)量為5.83±1.59，而健康對(duì)照者miR-125a-3p的表達(dá)量為1.53±0.34，miR-320a的表達(dá)量為1.33±0.31。與健康對(duì)照組相比，miR-125a-3p和miR-320a在HLH患者中表達(dá)明顯上調(diào)（P 0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R55

【參考文獻(xiàn)】

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1 張艷;高志勇;喻新建;陸道培;;臍血干細(xì)胞移植治療契東綜合征合并噬血一例及文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[J];中華血液學(xué)雜志;2017年11期

2 武文一;沈賢;薛向陽(yáng);閆競(jìng)一;劉志;陳哲京;;胃癌組織miR-125a-5p和miR-125a-3p表達(dá)及其與臨床病理特征的關(guān)系[J];溫州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2010年03期

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本文編號(hào)：2618001