【摘要】：目的:探究牛磺熊去氧膽酸(TUDCA)通過調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(ER stress),抑制血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)去分化,減少新生內(nèi)膜增生率,最終抑制支架內(nèi)再狹窄的發(fā)生,并探究這一作用是通過ER stress下游的IRE1/XBP1通路得以實(shí)現(xiàn)的。方法與結(jié)果:細(xì)胞實(shí)驗(yàn):通過細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)、MTT以及western blotting來評(píng)估TUDCA對(duì)ER stress以及VSMCs表型轉(zhuǎn)化的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明不同濃度的TUDCA(10-1000μmol/L)能顯著抑制由PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMCs的增殖和遷移,并降低ER stress IRE1/XBP1 通路中相關(guān)蛋白標(biāo)記物(IRE1,XBP1,KLF4 和 GRP78 等)的蛋白表達(dá)水平,并且這一效應(yīng)具有濃度依賴性。動(dòng)物實(shí)驗(yàn):給18只新西蘭雄性大白兔喂養(yǎng)致動(dòng)脈粥樣硬化飲食,誘導(dǎo)動(dòng)脈粥樣硬化形成。隨機(jī)分為3組:BMS組(植入裸支架)、BMS+TUDCA組(植入裸支架+口服TUDCA)和Firebird組(植入火鳥支架),在上述新西蘭大白兔的左頸總動(dòng)脈植入相應(yīng)支架。在第28天對(duì)動(dòng)物實(shí)施安樂死,收獲帶支架的左頸總動(dòng)脈用于掃描電子顯微鏡(SEM),HE染色和免疫組化。結(jié)果表明,3組動(dòng)物的左頸總動(dòng)脈支架表面均被新生內(nèi)膜覆蓋,但與 Firebird 組(1.90±0.1mm2)和 BMS 組(2.3±0.1mm2)相比,BMS+TUDCA組(1.6±0.2mm2)的新生內(nèi)膜面積顯著減少,同樣,BMS+TUDCA組的新生內(nèi)膜增生率最低,其次是Firebird組,而BMS組的新生內(nèi)膜增生率最高(BMS+TUDCA 28±4%,Firebird 35±7%,BMS 40±1%;P0.001)。此外,與 BMS 組相比,口服TUDCA的BMS+TUDCA組,其ER stress中IRE1/XBP1通路的相關(guān)蛋白表達(dá)水平也被明顯抑制。結(jié)論:TUDCA能抑制VSMCs的去分化,減輕新生內(nèi)膜增生率,從而降低支架內(nèi)再狹窄可能,并且這種機(jī)制是通過下調(diào)IRE1/XBP1信號(hào)通路來實(shí)現(xiàn)的。
【圖文】：

用不同濃度的ＴＵＤＣＡ邋（１０，１００和１０００ｍｍｏｌ／Ｌ）預(yù)處理ＶＳＭＣｓ，然后用逡逑ＰＤＧＦ－ＢＢ邋（２０ｎｇ／ｍＬ）干預(yù)２４小時(shí)。正如通過劃痕實(shí)驗(yàn)和ＭＴＴ測定所ｉ乎估的，逡逑ＴＵＤＣＡ以濃度依賴性的方式抑制ＰＤＧＦ－ＢＢ誘導(dǎo)的ＶＳＭＣｓ的增殖和遷移（圖１Ａ逡逑和邋ＩＢ，邋Ｐ＜０．０５）。逡逑Ａ：１邋—一逡逑Ｍ邐咖躲邋ｉｏ１＾邐ｆ邋ｆ逡逑／邋／邋／邋／逡逑－１邐３邐／邋／邋／逡逑％邐＾邐？．邐ＫＫ５Ｐ－８８邐、邐＾逡逑Ｉ邐ＴＵＤＣＡ邋１０邋ｍｍｏＳ／Ｌ逡逑Ｑ邋ｌ邋０ＪＳ１邐ＴＵＤＣＡ邋１００邋ｆｎｍｏｌＡ逡逑Ｗ邐Ｉ邐一一＾邐ＴＵＤＣＡ邐１０００ｍｍｏｌ／ｉ逡逑１２Ｓ邐ｓ＊？邐；＞？逡逑圖１邋ＴＵＤＣＡ抑制ＰＤＧＦ－ＢＢ誘導(dǎo)的ＶＳＭＣｓ去分化。對(duì)照組：ＶＳＭＣｓ沒有任何逡逑干預(yù)；ＰＤＧＦ－ＢＢ：邋ＶＳＭＣｓ邋用邋ＰＤＧＦ－ＢＢ邋（２０ｎｇ／ｍＬ）干預(yù)；ＴＵＤＣＡ：邋ＶＳＭＣｓ邋用不逡逑８逡逑

組（植入火鳥支架），在其左側(cè)頸總動(dòng)脈中分別植入ＢＭＳ和火鳥支架，４周后取逡逑出帶有支架的動(dòng)脈用于ＳＥＭ，邋ＨＥ和免疫組織化學(xué)染色。ＳＥＭ顯示所有支架表面逡逑均被新生內(nèi)膜完全覆蓋，并且可從血管的橫截面看到支架（圖４Ａ）。增加掃描電逡逑子顯微鏡的放大倍數(shù)，分別攝取了來自支架近端和遠(yuǎn)端區(qū)域的代表性圖像，分別逡逑顯示為內(nèi)皮細(xì)胞，平滑肌細(xì)胞，，表面血栓和炎性細(xì)胞。（圖４Ｂ）。逡逑、…．ｍ邋＾邋二逡逑ＢＭＳ邐ＢＭＳ＋ＴＵＤＣＡ邐Ｆｉｒｓｂｉｒｄ逡逑ｂ邋ｉＮ邐

本文編號(hào)：2605772