【摘要】：目的觀察應(yīng)激狀態(tài)下大鼠心肌細(xì)胞快激活延遲整流鉀電流(I_(Kr))的改變。方法 40只雄性SD大鼠隨機(jī)分為4組(n=10):對(duì)照組、力竭組、噪聲組、復(fù)合組。力竭組采用力竭游泳作為應(yīng)激原,噪聲組采用白噪聲作為應(yīng)激原,復(fù)合組采用力竭游泳+白噪聲作為應(yīng)激原,分別制備應(yīng)激動(dòng)物模型。采用Langendorff裝置逆向灌流膠原酶分離大鼠心室肌細(xì)胞,應(yīng)用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)記錄應(yīng)激對(duì)大鼠單個(gè)心室肌細(xì)胞I_(Kr)電流和門(mén)控機(jī)制的影響。結(jié)果與對(duì)照組相比,力竭組和噪聲組大鼠心室肌細(xì)胞I_(Kr)尾電流(I_(Kr,tail))密度均明顯增加(P0.01),而復(fù)合組大鼠心室肌細(xì)胞I_(Kr,tail)密度與力竭組和噪聲組相比明顯增加(P0.01),且作用呈電壓依賴性。門(mén)控機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)力竭組、噪聲組及復(fù)合組與對(duì)照組相比均可以使I_(Kr,tail)半失活電壓(V_(1/2,inact))右移,同時(shí)使失活后恢復(fù)時(shí)間常數(shù)縮短(P0.01)。同時(shí),與對(duì)照組相比,力竭組、噪聲組及復(fù)合組對(duì)I_(Kr,tail)的穩(wěn)態(tài)激活、快速失活常數(shù)及其電壓依賴性影響差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論應(yīng)激刺激可增加大鼠心肌細(xì)胞I_(Kr)電流,可能是應(yīng)激誘發(fā)心律失常的細(xì)胞電生理基礎(chǔ)之一。
【圖文】：

pCLAMP10.4處理，多組間數(shù)據(jù)比較用單因素方差分析，組間進(jìn)一步兩兩比較用SNK-q檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1力竭及噪聲對(duì)IKr電流密度的影響與對(duì)照組相比，IKr,step和IKr,tail在力竭運(yùn)動(dòng)及噪聲分別刺激后均有所增加，而此現(xiàn)象在力竭運(yùn)動(dòng)和噪聲聯(lián)合刺激后尤為嚴(yán)重。在+50mV時(shí)，與對(duì)照組相比，力竭組、噪聲組、復(fù)合組IKr,tail的電流密度均明顯增加(P<0.01，n=10)，而復(fù)合組IKr,tail的電流密度與力竭組、噪聲組相比明顯增加(P<0.01，n=10)，可見(jiàn)力竭+噪聲復(fù)合刺激對(duì)電流密度影響最大(圖1)。圖1不同程度的應(yīng)激刺激對(duì)IKr電流的影響Fig.1EffectsofES,WNandES+WNonIKrcurrentA.Representativecurrenttracesrecordedfromthecellsafterstimulatingbydifferentlevelsofstress;B.Atthetestpotentialof+50mV,thecurrentdensityofIKr,tailincreasedfrom25.12±3.45pA/pFto45.14±5.45pA/pFintheexhaustiveswimminggroup,50.43±7.43pA/pFinthewhitenoisestimulationand83.35±7.06pA/pFafterexhaustiveswimmingandwhitenoisestimulation(n=10).(1)P<0.01comparedwithCtrlgroup;(2)P<0.01comparedwithESgroup;(3)P<0.01comparedwithWNgroup+60mV,2000ms 50mV 40mV,3000ms 90mV2000pA500msCtrlESWNES+WN9080706050403020100IrK(p/pAF)CtrlESWNES+WN(1)(1)(1)(2)(3)AB

MedJChinPLA,Vol.42,No.8,August1,20176952.2力竭運(yùn)動(dòng)及噪聲對(duì)IKr電流的電壓依賴性作用IKr,step因具備內(nèi)向整流性，在刺激電位>0mV時(shí)逐漸減少，形成倒鐘型電壓依賴特征，而IKr,tail隨刺激脈沖電壓的正移電流而增加，當(dāng)刺激電位>+20mV時(shí)達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。兩種電流在力竭運(yùn)動(dòng)、噪聲單獨(dú)應(yīng)激及力竭運(yùn)動(dòng)和噪聲聯(lián)合刺激后均增加，尤其是在 30~+20mV的時(shí)間依賴性電流和>0mV時(shí)的尾電流成分增加更明顯，提示兩種刺激對(duì)IKr電流的效應(yīng)在一定的電壓范圍內(nèi)存在電壓依賴性特征(P<0.05或P<0.01，圖2)。2.3力竭運(yùn)動(dòng)及噪聲對(duì)IKr電流穩(wěn)態(tài)激活和穩(wěn)態(tài)失活曲線的作用在兩種應(yīng)激條件分別或聯(lián)合作用下，IKr,tail的穩(wěn)態(tài)激活曲線均無(wú)明顯改變；而電流的穩(wěn)態(tài)失活曲線在力竭運(yùn)動(dòng)及噪聲兩種應(yīng)激條件分別或聯(lián)合作用下明顯右移。與對(duì)照組相比，力竭組、噪聲組和復(fù)合組的IKr,tail半失活電壓(V1/2,inact)均明顯減小(P<0.01)，而復(fù)合組V1/2,inact與力竭組和噪聲組相比均明顯減小(P<0.01)；與對(duì)照組相比，應(yīng)激后各組穩(wěn)態(tài)激活曲線的曲線斜率(k值)變化不大。相同去極化電壓刺激時(shí)，應(yīng)激后電流失活過(guò)程明顯減慢(圖3)。2.4力竭運(yùn)動(dòng)及噪聲對(duì)IKr快失活時(shí)間常數(shù)的影響在兩種應(yīng)激條件分別或聯(lián)合作用下，IKr,tail電流的激活時(shí)間常數(shù)在 20~+60mV的電壓內(nèi)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，，提示應(yīng)激對(duì)電流快失活時(shí)間過(guò)程影響不大(圖4)。2.5力竭運(yùn)動(dòng)及噪聲對(duì)IKr電流失活后恢復(fù)時(shí)間常數(shù)的作用無(wú)論在力竭運(yùn)動(dòng)及噪聲應(yīng)激條件的分別或者聯(lián)合作用下，IKr,tail電流在各電壓下的快速失活后恢復(fù)常數(shù)值均有所下降，尤其以力竭運(yùn)動(dòng)及噪聲聯(lián)合作用時(shí)為甚，此現(xiàn)象在 80~ 50mV范圍內(nèi)更為明顯(圖5)。圖2不同程度的應(yīng)激刺激對(duì)IKr電壓依賴性電
【作者單位】： 河北北方學(xué)院研究生院;解放軍總醫(yī)院心內(nèi)科;解放軍252醫(yī)院心內(nèi)科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81170177,81470542,81570349) 全軍醫(yī)學(xué)科技“十二五”科研項(xiàng)目(CBJ13J002)~~
【分類(lèi)號(hào)】：R541.7

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2 祝~=驤;iJ梊霞;洃克琴;崔素英;文允摪;

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