【摘要】：目的:研究NOD樣受體蛋白3(NLRP3)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)在大鼠心肌缺血再灌注(IR)損傷模型中的表達(dá)變化。方法:選擇雄性SD大鼠60只,設(shè)置IR組30只和假手術(shù)組30只。IR組在呼吸機(jī)輔助呼吸的前提下,開胸擠出心臟,結(jié)扎前降支主干1h,再灌注1h,建立大鼠IR模型。假手術(shù)組穿線但不結(jié)扎前降支主干,余操作同IR組。造模成功后將心臟組織進(jìn)行免疫組織化學(xué)檢測NLRP3的含量,ELISA檢測心肌IL-6表達(dá)情況。結(jié)果:IR組NLRP3較假手術(shù)組明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=55.138,P0.05);IR組IL-6樣本濃度較假手術(shù)組明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=68.106,P0.05);對于2個變量進(jìn)行線性相關(guān)分析,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(R=0.989,P0.05),兩者存在正相關(guān)性。結(jié)論:大鼠心肌IR損傷后NLRP3炎性體表達(dá)增加,激活先天免疫系統(tǒng),促進(jìn)IL-6的表達(dá)增多。
【圖文】：

喬石，等．ＮＬＲＰ３在大鼠急性心肌缺血再灌注免疫損傷中的作用ＱＩＡＯＳｈｉ，ｅｔａｌ．ＦｕｎｃｔｉｏｎｏｆＮＯＤｌｉｋｅｒｅｃｅｐｔｏｒｐｒｏｔｅｉｎ３ｉｎａｃｕｔｅｍｙｏｃａｒｄｉａｌｉｓｃｈｅｍｉａｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ鼠臺；露出氣管并進(jìn)行氣管插管，在呼吸機(jī)輔助呼吸的前提下（潮氣量１５ｍｌ，呼吸頻率３０次／ｍｉｎ），開胸擠出心臟，用０號線結(jié)扎前降支主干。將ＢＬ－４２０ｓ生物試驗(yàn)系統(tǒng)連接于大鼠的４肢，并記錄心電圖的表現(xiàn)情況（圖１）。見Ⅱ?qū)?lián)ＳＴ段弓背向上抬高后，迅速將心臟放回胸腔內(nèi)，擠出胸腔內(nèi)殘存氣體及血液，簡易縫合胸腔、肌肉及皮膚。缺血１ｈ后，再次開胸，用顯微外科剪剪開結(jié)扎線，觀察心電圖ＳＴ段是否回落及是否出現(xiàn)再灌注心律失常。假手術(shù)組用０號線穿過前降支主干，但并不結(jié)扎，余操作同ＩＲ組。圖１結(jié)扎前降支主干后心電圖表現(xiàn)Ｆｉｇｕｒｅ１ＥＣＧａｆｔｅｒｌｉｇａｔｉｏｎ１．３．２ＥＬＩＳＡ染色再灌注１ｈ后，再次開胸分離出所有大鼠的心臟，從主動脈弓水平剪下心臟，用冰０．９％氯化鈉溶液沖洗干凈后置于干凈培養(yǎng)皿中，于冰箱預(yù)冷約８ｍｉｎ，取出后棄去心尖部及心底部。剩余心肌組織，按心底到心尖方向分成４等份。將第１、３份標(biāo)本用于石蠟切片的制作。第２、４份心肌標(biāo)本置于離心裝置內(nèi)，離心２０ｍｉｎ，取上清液作為檢測對象，按照ＢｌｕｅＧｅｎｅ公司生產(chǎn)的試劑盒（ＩＬ－６）的說明書進(jìn)行檢測，最后每孔加入終止液５０μｌ，終止反應(yīng)，此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色，確保酶標(biāo)板底沒有水滴及孔內(nèi)沒有氣泡后，立即用酶標(biāo)儀在４５０ｎｍ波長測量各孔的光

喬石，等．ＮＬＲＰ３在大鼠急性心肌缺血再灌注免疫損傷中的作用ＱＩＡＯＳｈｉ，ｅｔａｌ．ＦｕｎｃｔｉｏｎｏｆＮＯＤｌｉｋｅｒｅｃｅｐｔｏｒｐｒｏｔｅｉｎ３ｉｎａｃｕｔｅｍｙｏｃａｒｄｉａｌｉｓｃｈｅｍｉａｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ鼠臺；露出氣管并進(jìn)行氣管插管，在呼吸機(jī)輔助呼吸的前提下（潮氣量１５ｍｌ，呼吸頻率３０次／ｍｉｎ），開胸擠出心臟，用０號線結(jié)扎前降支主干。將ＢＬ－４２０ｓ生物試驗(yàn)系統(tǒng)連接于大鼠的４肢，并記錄心電圖的表現(xiàn)情況（圖１）。見Ⅱ?qū)?lián)ＳＴ段弓背向上抬高后，迅速將心臟放回胸腔內(nèi)，擠出胸腔內(nèi)殘存氣體及血液，簡易縫合胸腔、肌肉及皮膚。缺血１ｈ后，再次開胸，用顯微外科剪剪開結(jié)扎線，觀察心電圖ＳＴ段是否回落及是否出現(xiàn)再灌注心律失常。假手術(shù)組用０號線穿過前降支主干，但并不結(jié)扎，余操作同ＩＲ組。圖１結(jié)扎前降支主干后心電圖表現(xiàn)Ｆｉｇｕｒｅ１ＥＣＧａｆｔｅｒｌｉｇａｔｉｏｎ１．３．２ＥＬＩＳＡ染色再灌注１ｈ后，再次開胸分離出所有大鼠的心臟，從主動脈弓水平剪下心臟，用冰０．９％氯化鈉溶液沖洗干凈后置于干凈培養(yǎng)皿中，于冰箱預(yù)冷約８ｍｉｎ，取出后棄去心尖部及心底部。剩余心肌組織，按心底到心尖方向分成４等份。將第１、３份標(biāo)本用于石蠟切片的制作。第２、４份心肌標(biāo)本置于離心裝置內(nèi)，離心２０ｍｉｎ，取上清液作為檢測對象，按照ＢｌｕｅＧｅｎｅ公司生產(chǎn)的試劑盒（ＩＬ－６）的說明書進(jìn)行檢測，最后每孔加入終止液５０μｌ，終止反應(yīng)，，此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色，確保酶標(biāo)板底沒有水滴及孔內(nèi)沒有氣泡后，立即用酶標(biāo)儀在４５０ｎｍ波長測量各孔的光
【作者單位】： 內(nèi)蒙古科技大學(xué)包頭醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院心功能科;內(nèi)蒙古科技大學(xué)包頭醫(yī)學(xué)院;
【分類號】：R54

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本文編號：2533578