目的探討糖原合酶激酶3β(GSK-3β)抑制劑氯化鋰對內(nèi)皮祖細(xì)胞增殖的作用機(jī)制。方法密度梯度離心法分離大鼠骨髓源性內(nèi)皮祖細(xì)胞,體外培養(yǎng)7天后分別給予不同濃度氯化鋰(5、10、20、40 mmol/L)以抑制內(nèi)皮祖細(xì)胞的GSK-3β活性。分別采用鏡下計(jì)數(shù)法及四氮唑溴鹽比色法測定內(nèi)皮祖細(xì)胞增殖能力,熒光激活細(xì)胞分離儀分析各組內(nèi)皮祖細(xì)胞的細(xì)胞周期變化。采用蛋白印跡法測定Wnt信號通路中磷酸化GSK-3β、β-連環(huán)蛋白及細(xì)胞周期蛋白D1的蛋白表達(dá)。結(jié)果氯化鋰在一定濃度范圍內(nèi)可劑量依賴性地增加內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量。與對照組比較,不同濃度氯化鋰組(5、10、20 mmol/L)內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量顯著增加(P0.05,n=5)。四氮唑溴鹽比色法檢測氯化鋰各濃度組內(nèi)皮祖細(xì)胞在490 nm處吸光度值與對照組比較差異有顯著性(P0.05,n=5)。熒光激活細(xì)胞分離儀分析顯示氯化鋰組細(xì)胞周期S期較對照組顯著增加(P0.05,n=3)。蛋白印跡法測定表明,與對照組比較氯化鋰可顯著增加磷酸化GSK-3β、β-連環(huán)蛋白及細(xì)胞周期蛋白D1的蛋白表達(dá)(P0.05,n=3)。結(jié)論 GSK-3β抑制劑氯化鋰可通過激活Wnt信號通路顯著促進(jìn)內(nèi)皮祖細(xì)胞的增殖能力。



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