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低分子肝素和Galectin-3對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移和增殖的影響

發(fā)布時(shí)間:2019-04-21 15:08
【摘要】:目的探究低分子肝素聯(lián)合半乳糖凝集素-3(Galectin-3)對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)來(lái)源的血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移和增殖的影響。方法密度梯度離心法分離純化SD大鼠骨髓MSCs,取第3代,加入血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(b FGF),體外誘導(dǎo)14 d,進(jìn)行免疫組織熒光染色和電鏡鑒定,用4組不同組合的藥物進(jìn)行干預(yù):低分子肝素組:在細(xì)胞中加入20 mg/L的低分子肝素;Galectin-3組:在細(xì)胞中加入5 mg/L的Galectin-3;聯(lián)合組:在細(xì)胞中加入20 mg/L的低分子肝素和5 mg/L的Galectin-3;對(duì)照組:在細(xì)胞中加入等量PBS緩沖液。使用Ed U摻入法檢測(cè)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖,流式細(xì)胞儀檢測(cè)血管內(nèi)皮細(xì)胞周期,使用劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移,探究在不同條件下對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移和增殖的影響。結(jié)果低分子肝素組、Galectin-3組、聯(lián)合組、對(duì)照組的吸光度(OD490)值分別為(0.285±0.018)、(0.297±0.041)、(0.351±0.016)、(0.233±0.005),這表明聯(lián)合組的血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖情況最為顯著(P0.05);培養(yǎng)24 h的血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移率分別為(42.02±7.62)、(45.82±3.96)、(68.53±11.22)、(34.21±3.99),這表明聯(lián)合組的血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移率最大(P0.05)。結(jié)論低分子肝素聯(lián)合Galectin-3可以顯著提升骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的血管內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和增殖。
[Abstract]:Aim to investigate the effects of low molecular weight heparin (LMWH) combined with galactose lectin 3 (Galectin-3) on migration and proliferation of (MSCs) derived vascular endothelial cells from bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs). Methods SD rat bone marrow MSCs, was isolated and purified by density gradient centrifugation. The third passage was induced with vascular endothelial growth factor (VEGF) (VEGF) and basic fibroblast growth factor (bFGF) (b FGF), for 14 days in vitro. Immunofluorescence staining and electron microscope identification were performed. Four groups of drugs were used for intervention: low molecular weight heparin (LMWH) group: low molecular heparin (LMWH) with 20 mg/L was added to the cells; Galectin-3 group: 5 mg/L Galectin-3; combined group: 20 mg/L low molecular weight heparin (LMWH) group and 5 mg/L Galectin-3; control group (5 mg/L): the same amount of PBS buffer was added to the cells. The proliferation of vascular endothelial cells was detected by Ed U incorporation method, the cell cycle was detected by flow cytometry, and the migration of vascular endothelial cells was detected by scratch test to explore the effects of different conditions on the migration and proliferation of vascular endothelial cells. Results the OD490 values of low molecular weight heparin group, Galectin-3 group, combined group and control group were (0.285 鹵0.018), (0.297 鹵0.041), (0.351 鹵0.016), (0.233 鹵0.005), respectively. This indicated that the proliferation of vascular endothelial cells in the combined group was the most significant (P0.05). The migration rate of vascular endothelial cells was (42.02 鹵7.62), (45.82 鹵3.96), (68.53 鹵11.22), (34.21 鹵3.99) at 24 h, indicating that the combination group had the highest migration rate (P0.05). Conclusion low molecular weight heparin combined with Galectin-3 can significantly enhance the migration and proliferation of vascular endothelial cells derived from bone marrow mesenchymal stem cells.
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院血管外科
【基金】:安徽省自然科學(xué)基金(編號(hào):KJ2013Z115)
【分類(lèi)號(hào)】:R543.5

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2462318


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