發(fā)布時(shí)間：2019-03-16 18:42

【摘要】：背景:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植后在宿主惡劣的缺血缺氧微環(huán)境中生存率過(guò)低,限制了其治療急性心肌梗死的療效。目的:探討人血紅素加氧酶1基因修飾的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)缺血缺氧環(huán)境損傷的耐受能力。方法:人血紅素加氧酶1重組腺病毒轉(zhuǎn)染大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,Western blot法確定人血紅素加氧酶1蛋白表達(dá)的最佳時(shí)間;以缺氧無(wú)血清條件模擬體內(nèi)缺血缺氧微環(huán)境培養(yǎng)人血紅素加氧酶1基因修飾的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,采用CCK-8試劑盒和錐蟲(chóng)藍(lán)染色法檢測(cè)缺血缺氧培養(yǎng)12,24,48,72 h的細(xì)胞存活率,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)缺血缺氧培養(yǎng)24 h的細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果與結(jié)論:①在轉(zhuǎn)染后第4天人血紅素加氧酶1蛋白表達(dá)量最多;②錐蟲(chóng)藍(lán)染色法和CCK-8法檢測(cè)人血紅素加氧酶1組缺血缺氧培養(yǎng)12,24,48,72 h的細(xì)胞生存率均高于對(duì)照組(P0.05);③流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)人血紅素加氧酶1組缺血缺氧培養(yǎng)24 h的生存率高于對(duì)照組(P0.05);④結(jié)果表明,人血紅素加氧酶1修飾的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)缺血缺氧環(huán)境損傷的耐受能力明顯增強(qiáng)。
[Abstract]:Background: the survival rate of bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) after transplantation in poor ischemic and anoxic microenvironment of the host is too low, which limits the efficacy of MSCs in the treatment of acute myocardial infarction (AMI). Aim: to investigate the tolerance of rat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) modified with human heme oxygenase-1 gene to hypoxic-ischemic injury. Methods: human heme oxygenase 1 recombinant adenovirus was transfected into rat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) by, Western blot assay to determine the optimal time for the expression of human heme oxygenase 1 protein. Human heme oxygenase 1 gene modified rat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) were cultured under hypoxia-free condition and simulated in vivo. The survival rate of MSCs was detected by CCK-8 kit and trypanosome blue staining at 12,24,48and 72 h after ischemia and hypoxia, and the survival rate of MSCs cultured with heme oxygenase-1 gene was determined by trypanosome blue staining method. Flow cytometry (FCM) was used to detect the apoptosis of the cells cultured under ischemia and hypoxia for 24 h. Results and conclusion: 1 on the 4th day after transfection, the expression of human heme oxygenase-1 protein was the highest; 2Trypanosome blue staining and CCK-8 assay were used to detect the cell survival rate of 12, 24, 48, 72 h culture in heme oxygenase-1 group (P0.05), and the cell survival rate was significantly higher than that in control group (P0.05). 3The 24-hour survival rate of heme oxygenase-1 group was significantly higher than that of control group (P0.05), and the survival rate was significantly higher than that of control group (P0.05). 4. The results showed that human heme oxygenase 1-modified rat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) significantly enhanced their tolerance to ischemia and hypoxia injury in rat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs).
【作者單位】： 廣東省中醫(yī)院珠海醫(yī)院;解放軍第305醫(yī)院;郴州市第一人民醫(yī)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(30971235) 軍隊(duì)“十二五”醫(yī)學(xué)科研基金(2013XL010)~~
【分類(lèi)號(hào)】：R542.22

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本文編號(hào)：2441867