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低氧對人微血管內皮細胞HIF-1α表達及生物學行為的影響

發(fā)布時間:2018-10-12 21:11
【摘要】:下肢靜脈曲張目前是一種常見疾病,在我國發(fā)病率較高,嚴重影響人民生活質量,因此對靜脈性潰瘍形成的機制研究有重大的意義。研究目的:研究低氧對人皮膚微血管內皮細胞(human dermal microvascular endothelial cells,HDMEC)遷移、凋亡及HIF-1表達的影響。研究方法:培養(yǎng)人微血管內皮細胞,分為正常氧組(對照組,采取常規(guī)培養(yǎng))和低氧組(實驗組,CoCl_2模擬化學缺氧)。CCK-8細胞生存實驗確定合適處理濃度(200μmol/L CoCl_2),劃痕實驗檢測細胞遷移能力,流式細胞技術觀察細胞凋亡及周期變化;應用RT-PCR和Western Blotting檢測HIF-1α、HIF-1β、VEGF、iNOS基因m RNA和蛋白表達。研究結果:與對照組比較,低氧組細胞遷移能力增加(P0.05),凋亡增多(P0.05),均呈時間依賴性。低氧組HIF-1α、HIF-1β、VEGF、iNOS基因mRNA和蛋白表達均增加(P值均小于0.05),具有一定時間依賴性。研究結論:低氧能增強人皮膚微血管內皮細胞遷移能力,并促進其凋亡,其可能機制與HIF-1α及其下游基因表達升高有關。
[Abstract]:Varicose veins of the lower extremity is a common disease at present. The incidence of varicose veins in China is high, which seriously affects the quality of life of the people, so it is of great significance to study the mechanism of the formation of venous ulcer. Aim: to study the effects of hypoxia on the migration, apoptosis and HIF-1 expression of human microvascular endothelial cells (human dermal microvascular endothelial cells,HDMEC). Methods: human microvascular endothelial cells were cultured and divided into normal oxygen group (control group). The normal culture and hypoxia group (experimental group, CoCl_2 simulated chemical hypoxia) were used. The suitable concentration of CCK-8 cell survival was determined (200 渭 mol/L CoCl_2), the cell migration ability was detected by scratch test, and cell apoptosis and cell cycle change were observed by flow cytometry. HIF-1 偽, HIF-1 尾, VEGF,iNOS gene m RNA and protein expression were detected by RT-PCR and Western Blotting. Results: compared with the control group, the migration ability of hypoxia group increased (P0.05), apoptosis increased (P0.05), all were time-dependent. In hypoxia group, the expression of HIF-1 偽, HIF-1 尾, VEGF,iNOS gene mRNA and protein were all increased (P < 0. 05). Conclusion: hypoxia can enhance the migration and apoptosis of human skin microvascular endothelial cells, which may be related to the increased expression of HIF-1 偽 and its downstream genes.
【學位授予單位】:重慶醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:R543.6

【參考文獻】

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1 李鵬;HIF-1α、P-選擇素及TNF-α基因表達態(tài)與下肢靜脈性皮膚潰瘍生成的相關性研究[D];昆明醫(yī)學院;2011年



本文編號:2267606

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