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低氧對(duì)人微血管內(nèi)皮細(xì)胞HIF-1α表達(dá)及生物學(xué)行為的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-10-12 21:11
【摘要】:下肢靜脈曲張目前是一種常見疾病,在我國(guó)發(fā)病率較高,嚴(yán)重影響人民生活質(zhì)量,因此對(duì)靜脈性潰瘍形成的機(jī)制研究有重大的意義。研究目的:研究低氧對(duì)人皮膚微血管內(nèi)皮細(xì)胞(human dermal microvascular endothelial cells,HDMEC)遷移、凋亡及HIF-1表達(dá)的影響。研究方法:培養(yǎng)人微血管內(nèi)皮細(xì)胞,分為正常氧組(對(duì)照組,采取常規(guī)培養(yǎng))和低氧組(實(shí)驗(yàn)組,CoCl_2模擬化學(xué)缺氧)。CCK-8細(xì)胞生存實(shí)驗(yàn)確定合適處理濃度(200μmol/L CoCl_2),劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力,流式細(xì)胞技術(shù)觀察細(xì)胞凋亡及周期變化;應(yīng)用RT-PCR和Western Blotting檢測(cè)HIF-1α、HIF-1β、VEGF、iNOS基因m RNA和蛋白表達(dá)。研究結(jié)果:與對(duì)照組比較,低氧組細(xì)胞遷移能力增加(P0.05),凋亡增多(P0.05),均呈時(shí)間依賴性。低氧組HIF-1α、HIF-1β、VEGF、iNOS基因mRNA和蛋白表達(dá)均增加(P值均小于0.05),具有一定時(shí)間依賴性。研究結(jié)論:低氧能增強(qiáng)人皮膚微血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移能力,并促進(jìn)其凋亡,其可能機(jī)制與HIF-1α及其下游基因表達(dá)升高有關(guān)。
[Abstract]:Varicose veins of the lower extremity is a common disease at present. The incidence of varicose veins in China is high, which seriously affects the quality of life of the people, so it is of great significance to study the mechanism of the formation of venous ulcer. Aim: to study the effects of hypoxia on the migration, apoptosis and HIF-1 expression of human microvascular endothelial cells (human dermal microvascular endothelial cells,HDMEC). Methods: human microvascular endothelial cells were cultured and divided into normal oxygen group (control group). The normal culture and hypoxia group (experimental group, CoCl_2 simulated chemical hypoxia) were used. The suitable concentration of CCK-8 cell survival was determined (200 渭 mol/L CoCl_2), the cell migration ability was detected by scratch test, and cell apoptosis and cell cycle change were observed by flow cytometry. HIF-1 偽, HIF-1 尾, VEGF,iNOS gene m RNA and protein expression were detected by RT-PCR and Western Blotting. Results: compared with the control group, the migration ability of hypoxia group increased (P0.05), apoptosis increased (P0.05), all were time-dependent. In hypoxia group, the expression of HIF-1 偽, HIF-1 尾, VEGF,iNOS gene mRNA and protein were all increased (P < 0. 05). Conclusion: hypoxia can enhance the migration and apoptosis of human skin microvascular endothelial cells, which may be related to the increased expression of HIF-1 偽 and its downstream genes.
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:R543.6

【參考文獻(xiàn)】

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3 常光其;陳翠菊;陳忠;董國(guó)祥;段志泉;符偉國(guó);戈小虎;谷涌泉;管珩;郭平凡;郭曙光;郭偉;姜維良;蔣米爾;金畢;金輝;金星;景在平;賴傳善;李鳴;李曉強(qiáng);李毅清;李震;林勇杰;劉冰;劉昌偉;劉長(zhǎng)建;劉鵬;馬杰;潘松齡;時(shí)德;舒暢;譚最;王勁松;王深明;王玉琦;汪忠鎬;吳丹明;吳慶華;吳向未;辛世杰;葉建榮;苑超;張柏根;張福先;張鴻坤;張紀(jì)蔚;張小明;趙紀(jì)春;趙渝;周晗;;慢性下肢靜脈疾病診斷與治療中國(guó)專家共識(shí)[J];中國(guó)血管外科雜志(電子版);2014年03期

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本文編號(hào):2267606

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