本文關鍵詞：除組織中高豐度蛋白對蛋白鑒定的影響及心肌梗死尿蛋白質組分析

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【摘要】：研究目的分析免疫沉淀去除組織樣品中血清高豐度蛋白對組織蛋白質組鑒定的影響。研究方法人的甲狀腺和垂體組織樣品經(jīng)去除12種血清高豐度蛋白抗體柱處理后,得到的低豐度蛋白樣品和未處理樣品分別進行液質聯(lián)用分析,以及多肽和蛋白質水平的定性和定量分析。研究結果人的甲狀腺和垂體樣品中血清高豐度蛋白分別被除去了92.11%±12.87%和78%±25%。所鑒定到的多肽和蛋白與未處理樣品相比,甲狀腺組織鑒定到的非冗余多肽提高了70%、蛋白鑒定數(shù)提高了16.5%,垂體鑒定到的非冗余多肽提高了21.9%,蛋白鑒定數(shù)無明顯變化。研究結論免疫沉淀去除組織中的血清高豐度蛋白法可以顯著的提高組織樣品的多肽和蛋白鑒定效率,且更適用于血管密集的樣品。研究目的：心肌梗死是一種發(fā)病率和死亡率很高的疾病,對心肌梗死的治療花費大量的人力物力。然而由于缺少高靈敏度快速的方法,很難進行心肌梗死的早期診斷。尋找有效可靠的心肌梗死生物標志物是很有必要的。本研究分析了來自ST間期提高的心肌梗死患者(首次發(fā)病12小時內(nèi)和經(jīng)皮冠狀動脈治療后7天)的尿蛋白質組和血漿蛋白質組,來尋找心肌梗死潛在的生物標志物。研究方法及結果：通過同位素標記相對和絕對定量方法(iTRAQ)和2D-LC-MS/MS分析方法,1684個尿蛋白和468個血漿蛋白被定量。將175個尿的差異蛋白和47個血漿差異蛋白合并,一共得到216個心肌梗死差異蛋白。根據(jù)功能分析,這些蛋白主要參加了凝血系統(tǒng),線粒體功能障礙和動脈粥樣硬化信號通路。應用蛋白印記方法(Western blot)驗證了纖維蛋白酶原gamma鏈(FGG),細胞色素C (CYCS)和載脂蛋白A1 (APOA1)的改變。通過二元邏輯回歸分析,尿的FGG和CYCS聯(lián)合用于心肌梗死的診斷可以達到76.9%的靈敏度和100%特異性,受試者工作特征曲線的曲線下面積達到0.893。研究結論：通過對比尿和血漿中差異蛋白功能,發(fā)現(xiàn)尿和血漿可以從不同方面反映心肌梗死的病理學改變。因此將尿蛋白質組和血漿蛋白質組的生物標志物結合,可能會為心肌梗死的診斷提供更多的信息。
【學位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R542.22

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