發(fā)布時(shí)間：2017-12-10 02:28

  本文關(guān)鍵詞：除組織中高豐度蛋白對(duì)蛋白鑒定的影響及心肌梗死尿蛋白質(zhì)組分析

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【摘要】：研究目的分析免疫沉淀去除組織樣品中血清高豐度蛋白對(duì)組織蛋白質(zhì)組鑒定的影響。研究方法人的甲狀腺和垂體組織樣品經(jīng)去除12種血清高豐度蛋白抗體柱處理后,得到的低豐度蛋白樣品和未處理樣品分別進(jìn)行液質(zhì)聯(lián)用分析,以及多肽和蛋白質(zhì)水平的定性和定量分析。研究結(jié)果人的甲狀腺和垂體樣品中血清高豐度蛋白分別被除去了92.11%±12.87%和78%±25%。所鑒定到的多肽和蛋白與未處理樣品相比,甲狀腺組織鑒定到的非冗余多肽提高了70%、蛋白鑒定數(shù)提高了16.5%,垂體鑒定到的非冗余多肽提高了21.9%,蛋白鑒定數(shù)無(wú)明顯變化。研究結(jié)論免疫沉淀去除組織中的血清高豐度蛋白法可以顯著的提高組織樣品的多肽和蛋白鑒定效率,且更適用于血管密集的樣品。研究目的：心肌梗死是一種發(fā)病率和死亡率很高的疾病,對(duì)心肌梗死的治療花費(fèi)大量的人力物力。然而由于缺少高靈敏度快速的方法,很難進(jìn)行心肌梗死的早期診斷。尋找有效可靠的心肌梗死生物標(biāo)志物是很有必要的。本研究分析了來(lái)自ST間期提高的心肌梗死患者(首次發(fā)病12小時(shí)內(nèi)和經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈治療后7天)的尿蛋白質(zhì)組和血漿蛋白質(zhì)組,來(lái)尋找心肌梗死潛在的生物標(biāo)志物。研究方法及結(jié)果：通過(guò)同位素標(biāo)記相對(duì)和絕對(duì)定量方法(iTRAQ)和2D-LC-MS/MS分析方法,1684個(gè)尿蛋白和468個(gè)血漿蛋白被定量。將175個(gè)尿的差異蛋白和47個(gè)血漿差異蛋白合并,一共得到216個(gè)心肌梗死差異蛋白。根據(jù)功能分析,這些蛋白主要參加了凝血系統(tǒng),線(xiàn)粒體功能障礙和動(dòng)脈粥樣硬化信號(hào)通路。應(yīng)用蛋白印記方法(Western blot)驗(yàn)證了纖維蛋白酶原gamma鏈(FGG),細(xì)胞色素C (CYCS)和載脂蛋白A1 (APOA1)的改變。通過(guò)二元邏輯回歸分析,尿的FGG和CYCS聯(lián)合用于心肌梗死的診斷可以達(dá)到76.9%的靈敏度和100%特異性,受試者工作特征曲線(xiàn)的曲線(xiàn)下面積達(dá)到0.893。研究結(jié)論：通過(guò)對(duì)比尿和血漿中差異蛋白功能,發(fā)現(xiàn)尿和血漿可以從不同方面反映心肌梗死的病理學(xué)改變。因此將尿蛋白質(zhì)組和血漿蛋白質(zhì)組的生物標(biāo)志物結(jié)合,可能會(huì)為心肌梗死的診斷提供更多的信息。
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R542.22

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