本文關(guān)鍵詞：缺氧誘導(dǎo)因子-1α與缺氧復(fù)氧條件下NLRP3炎癥小體激活的關(guān)系

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【摘要】：目的:研究缺氧誘導(dǎo)因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)與缺氧復(fù)氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)條件下人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞NLRP3炎癥小體激活的關(guān)系。方法:(1)建立人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞缺氧/復(fù)氧模型;(2)采用Western Blot分別檢測缺氧和復(fù)氧不同時間后HIF-1α與NLRP3的表達(dá)情況,選出蛋白表達(dá)最高的缺氧和復(fù)氧時間點;(3)在選取的缺氧復(fù)氧時間點分兩部分進(jìn)行實驗。第一部分:①正常組;②H/R組;③H/R+HIF-1α抑制劑YC-1組;④H/R+HIF-1α激動劑DMOG組;第二部分:①正常組;②H/R組;③H/R+si RNA陰性對照組;④H/R+HIF-1αsi RNA組;⑤H/R+HIF-1α空載質(zhì)粒組;⑥H/R+HIF-1α過表達(dá)質(zhì)粒組;(4)采用Western Blot和熒光定量PCR檢測各組HIF-1α、NLRP3、ASC、caspase-1的蛋白和m RN A表達(dá)情況。ELISA檢測各組細(xì)胞因子IL-18的表達(dá)量。結(jié)果:(1)在缺氧復(fù)氧條件下,人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HIF-1α、NLRP3蛋白表達(dá)較正常組明顯升高,在缺氧16h和復(fù)氧8h兩者表達(dá)最為顯著。(2)加入YC-1預(yù)處理的缺氧復(fù)氧組,HIF-1α、NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表達(dá)較單純?nèi)毖鯊?fù)氧組明顯降低(P0.05),HIF-1αm RNA水平無變化(P0.05),NLRP3、ASC、caspase-1 m RNA表達(dá)較缺氧復(fù)氧組明顯降低(P0.05),IL-18分泌量較缺氧復(fù)氧組明顯減少(P0.05);加入DMOG預(yù)處理的缺氧復(fù)氧組,HIF-1α、NLRP3、ASC、caspase-1蛋白及m RNA表達(dá)較缺氧復(fù)氧組均明顯升高(P0.05),且IL-18分泌量較單純?nèi)毖鯊?fù)氧組明顯增多(P0.05)。(3)沉默HIF-1α后進(jìn)行缺氧復(fù)氧處理,HIF-1α、NLRP3、ASC、caspase-1蛋白及m RNA表達(dá)較缺氧復(fù)氧組均明顯降低(P0.05),IL-18分泌量較缺氧復(fù)氧組明顯減少(P0.05);過表達(dá)HIF-1α后進(jìn)行缺氧復(fù)氧處理,HIF-1α、NLRP3、ASC、caspase-1蛋白及m RNA表達(dá)較缺氧復(fù)氧組均明顯升高(P0.05),IL-18分泌量較缺氧復(fù)氧組明顯增多(P0.05)。結(jié)論:(1)缺氧復(fù)氧條件下,人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HIF-1α以及NLRP3炎癥小體表達(dá)明顯升高。(2)缺氧復(fù)氧條件下抑制HIF-1α表達(dá),NLRP3炎癥小體表達(dá)明顯降低。(3)缺氧復(fù)氧條件下誘導(dǎo)HIF-1α表達(dá),NLRP3炎癥小體表達(dá)明顯升高。(4)HIF-1α參與人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞缺氧復(fù)氧過程中NLRP3炎癥小體的激活。
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R541.4

【參考文獻(xiàn)】

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1 陳偉偉;高潤霖;劉力生;朱曼璐;王文;王擁軍;吳兆蘇;胡盛壽;;中國心血管病報告2013概要[J];中國循環(huán)雜志;2014年07期

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本文編號：1228950