本文關(guān)鍵詞：房顫相關(guān)HCN4基因新突變的識(shí)別及功能研究

  更多相關(guān)文章： 心房顫動(dòng) 分子遺傳學(xué) 鉀離子通道 HCN4 細(xì)胞電生理

【摘要】：背景:心房顫動(dòng),簡(jiǎn)稱房顫,是臨床上最為常見的心律失常,具有較高的致殘率與致死率。研究發(fā)現(xiàn)部分房顫有其遺傳學(xué)基礎(chǔ)。近年來的研究發(fā)現(xiàn),編碼心臟超極化激活鉀離子通道(If通道)的基因HCN4突變可導(dǎo)致竇房結(jié)功能障礙,其中一部分突變攜帶者伴發(fā)房顫,提示房顫與HCN4基因變異有關(guān)。目的:識(shí)別房顫相關(guān)HCN4基因新突變,揭示其導(dǎo)致房顫的細(xì)胞電生理學(xué)機(jī)制。方法:收集120例無血緣關(guān)系的特發(fā)性房顫患者和200名健康對(duì)照者的臨床資料和血標(biāo)本,抽提基因組DNA。通過PCR反應(yīng)擴(kuò)增候選基因HCN4的全部編碼區(qū)和剪接位點(diǎn)序列,通過PCR-測(cè)序和序列比對(duì)發(fā)現(xiàn)HCN4基因變異。通過測(cè)序分析HCN4基因變異在特發(fā)性房顫患者和健康對(duì)照者中的頻率分布和多物種HCN4蛋白序列比對(duì)分析突變氨基酸在物種進(jìn)化上的保守性,以識(shí)別出新的特發(fā)性房顫相關(guān)HCN4基因突變。應(yīng)用分子克隆技術(shù)克隆野生型HCN4基因,通過定位誘變獲得突變型HCN4基因。利用基因重組技術(shù)構(gòu)建野生型和突變型HCN4基因的真核表達(dá)載體,利用脂質(zhì)體將重組載體分別轉(zhuǎn)染COS-7細(xì)胞,應(yīng)用膜片鉗在細(xì)胞水平研究HCN4基因突變對(duì)心臟If通道電生理特性的影響,以揭示HCN4基因突變導(dǎo)致房顫的細(xì)胞電生理機(jī)制。結(jié)果:在l例特發(fā)性房顫伴竇性心動(dòng)過緩患者的HCN4基因發(fā)現(xiàn)了新的錯(cuò)義突變,其所編碼的If通道蛋白HCN4的第600位的天冬氨酸變?yōu)楣劝彼?p.D600E)。在200例健康對(duì)照者均未發(fā)現(xiàn)任何HCN4基因突變。多物種HCN4基因編碼氨基酸序列比對(duì)分析顯示第600位的天冬氨酸在進(jìn)化上高度保守,計(jì)算機(jī)軟件預(yù)測(cè)提示HCN4基因p.D600E變異可能是致病性突變。膜片鉗研究發(fā)現(xiàn),HCN4基因p.D600E突變可加速If通道的失活過程,使If通道的可利用率減低,進(jìn)而使竇房結(jié)的自律性減慢,導(dǎo)致竇性心動(dòng)過緩的發(fā)生,同時(shí)易化房顫的發(fā)生。結(jié)論:HCN4基因p.D600E雜合錯(cuò)義突變?yōu)閷?dǎo)致房顫的新突變,可加速If通道的失活過程,使If通道可利用率減低,導(dǎo)致竇性心動(dòng)過緩和房顫的發(fā)生。
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R541.75

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 袁桂儀;伍衛(wèi);周淑嫻;張玉玲;雷娟;;構(gòu)建人HCN4基因重組腺病毒載體及其對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的感染效率[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2009年45期

2 付勇;劉慧;于風(fēng)旭;廖斌;毛亮;鄧明彬;李新;;風(fēng)濕性心臟病心房顫動(dòng)HCN4基因mRNA表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究[J];臨床心血管病雜志;2012年11期

3 王妮娜;劉如秀;;竇房結(jié)細(xì)胞起搏基因HCN4的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2011年10期

4 楊新春;易方方;蔡軍;江洪;林國(guó)生;蔣學(xué)俊;楊波;胡莉華;;腺病毒介導(dǎo)HCN4通道基因過度表達(dá)構(gòu)建生物起搏器的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華心血管病雜志;2007年03期

5 童敏;楊向軍;韓蓮花;李紅霞;趙欣;周亞峰;蔣文平;;HCN4轉(zhuǎn)染大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞重建起搏離子通道I_f[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2010年07期

6 ;[J];;年期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 范新榮;王超;劉漢雄;鄧曉奇;蔡琳;;胺碘酮對(duì)HCN4通道蛋白表達(dá)及電藥理學(xué)特性的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)心電生理和起搏分會(huì)第十次全國(guó)學(xué)術(shù)年會(huì)會(huì)議匯編[C];2012年

2 周亞鋒;楊向軍;李紅霞;蔣文平;;HCN4慢病毒轉(zhuǎn)染基質(zhì)干細(xì)胞構(gòu)建起搏樣細(xì)胞的體外研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第11次心血管病學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2009年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 譚琛;SCN5A與HCN4基因單核苷酸多態(tài)性與病態(tài)竇房結(jié)綜合征的關(guān)聯(lián)研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2005年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 王倩;房顫相關(guān)HCN4基因新突變的識(shí)別及功能研究[D];上海交通大學(xué);2015年

2 萬瑞峰;白藜蘆醇對(duì)HCN4參與編碼的超極化激活的陽(yáng)離子通道的抑制作用[D];武漢科技大學(xué);2011年

3 張玉;大鼠心肌梗死后梗死周邊區(qū)HCN2、HCN4、KCNE1及KCNE2表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2009年

，

本文編號(hào)：1165057