本文關鍵詞：新生大鼠心臟telocytes的形態(tài)特性及其多向分化潛能

  更多相關文章： Telocytes 神經(jīng)細胞 起搏細胞 原代培養(yǎng) 多向分化誘導

【摘要】：背景Telocytes(TCs)是一種新型的間質(zhì)細胞,存在于人和嚙齒類動物的多個器官。目前關于TCs的研究大多局限于形態(tài)學和成脂、成骨研究較多,但是否具備神經(jīng)細胞分化潛能和心起搏細胞的特性卻知之甚少。我們旨在研究TCs是否具有多向分化的潛能,及其類似神經(jīng)細胞的形態(tài)和其功能之間的聯(lián)系。這對進一步研究TCs的特性及其生物功能具有重要的意義。目的研究新生大鼠心TCs的形態(tài)學特征,驗證其是否具有神經(jīng)細胞、神經(jīng)膠質(zhì)細胞的特性并探討其是否具多向分化潛能,為開發(fā)利用TCs進一步提供細胞學證據(jù)。方法1采用酶消化法分離、培養(yǎng)新生大鼠原代心臟TCs細胞,并通過差速貼壁法對其進行純化。在倒置顯微鏡以及活細胞工作站下觀測細胞的生長狀態(tài),記錄培養(yǎng)過程中TCs的形態(tài)變化。2通過HE染色、免疫組織化學技術、免疫熒光染色技術,觀察TCs vimintin和CD34的表達,對體外培養(yǎng)的TCs進行鑒定。3在掃描電鏡下觀察體外培養(yǎng)的TCs的形態(tài),在透射電鏡下觀察新生大鼠心臟組織TCs的形態(tài)及其與周圍鄰近細胞的關系。4利用成骨誘導液、成脂誘導液和5a Za分別對心臟TCs進行成骨、成脂和成心肌誘導。并用茜素紅染色、油紅O染色、以及免疫熒光技術對誘導后的心臟TCs進行鑒定。5利用成神經(jīng)誘導液對心臟TCs進行成神經(jīng)誘導,免疫熒光技術檢測未誘導和誘導后的TCs對神經(jīng)細胞和神經(jīng)膠質(zhì)細胞的蛋白表達。6免疫熒光技術檢測TCs對心臟起搏細胞特異性標記蛋白HCN4的表達。結(jié)果1新生大鼠心臟TCs狀態(tài)好、純度高。2免疫組織化學檢測顯示TCs細胞質(zhì)內(nèi)陽性表達vimentin,且vimentinCD34共表達。3掃描電鏡顯示TCs由胞體和突起組成。胞體呈橢圓,較小。突起1-5個不等。突起長短不一,突起上有間斷性膨大,呈念珠狀。根據(jù)伸出的突起數(shù)量不同,細胞體呈現(xiàn)為梭形、紡錘形和星形等。4透射電鏡下顯示新生大鼠的心肌組織中存在較多的TCs。TCs的胞體直徑約為9-15μm。細胞核,呈橢圓形,胞核/胞質(zhì)的比例相對較大。胞質(zhì)內(nèi)細胞器豐富,存在微管、中間絲、微絲、細肌絲等細胞骨架結(jié)構(gòu)。細胞膜上有小凹。自胞體伸出數(shù)個粗細不等的突起,可長達1000μm。在突起的膨大處內(nèi)含線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細胞器。TCs與心肌細胞、成纖維細胞、內(nèi)皮細胞、周細胞等均用緊密的接觸。5 TCs成骨誘導21天后茜素紅染色陽性,成脂誘導第14天細胞油紅O染色陽性,成心肌誘導4周后CTn T免疫熒光染色陽性。6原代培養(yǎng)的TCs免疫熒光檢測NSE、GFAP、OX42、CNpase表達陰性,成神經(jīng)誘導液誘導7天后的TCs不表達GFAP。7 HCN4表達陰性。結(jié)論大鼠心TCs具有成骨、成脂、成心肌的潛能。但未發(fā)現(xiàn)具有向神經(jīng)細胞分化的潛能。也不具備心起搏細胞的特性。
【關鍵詞】：Telocytes 神經(jīng)細胞 起搏細胞 原代培養(yǎng) 多向分化誘導
【學位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R54
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-12
• 實驗材料與方法12-25
• 結(jié)果25-28
• 討論28-30
• 小結(jié)30-31
• 附圖31-37
• 參考文獻37-42
• 綜述：Telocytes的研究進展42-65
• 參考文獻53-65
• 附錄：常見英文縮寫65-66
• 攻讀學位期間發(fā)表文章情況66-67
• 致謝67-68
• 個人簡歷68

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 呂遠遠;孫飆;馬繼政;;不同強度游泳訓練對大鼠心臟形態(tài)和功能的影響[J];南京體育學院學報(自然科學版);2007年01期

2 張穎;望文楨;;大鼠心臟采血的幾點體會[J];實驗動物科學;2008年01期

3 姜岳明;;鎘和食物硒對飼以高銅飼料的大鼠心臟細胞溶質(zhì)和線粒體抗氧化防御系統(tǒng)的影響[J];國外醫(yī)學(衛(wèi)生學分冊);1988年05期

4 郭豫濤,陳慶偉;老年充血性心力衰竭大鼠心臟胰島素樣生長因子1自分泌系統(tǒng)的研究[J];中華老年醫(yī)學雜志;2003年06期

5 禹更生，陳明哲，，韓啟德;大鼠心臟不同部位α1腎上腺素受體亞型的分布[J];北京醫(yī)科大學學報;1994年04期

6 秦世貞,俞啟福,李慶棣,趙云濤,馬貴喜,郝唯蔚;高溫、噪聲及兩者結(jié)合對大鼠心臟擴張素的影響[J];中華航空醫(yī)學雜志;1996年01期

7 梁雪清,羅超權,劉麗,劉建斌,于立身,王燁,曹穎;篩選大鼠心臟離心訓練相關差異表達基因[J];中國病理生理雜志;2002年11期

8 李艷清,劉敏,邢華雄,張寧仔;大鼠心臟功能改變時心臟β-腎上腺素能受體的變化[J];中國病理生理雜志;1991年01期

9 程增江,杜澤涵,李紅昕,董華進,馮銳,李光玉;等容大鼠心臟機械功能與能量代謝的同步觀測[J];軍醫(yī)進修學院學報;1999年02期

10 李兆萍,唐朝樞,蘇靜怡;Mn~(2+)對離體大鼠心臟缺鈉—復鈉損傷的作用[J];北京醫(yī)科大學學報;1989年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 封光華;張喜平;;丹參對重癥急性胰腺炎與阻塞性黃疸大鼠心臟的保護作用[A];2009年浙江省外科學學術年會論文匯編[C];2009年

2 徐小惠;劉毅;胡燕;金滿文;;五甲基槲皮素對麻醉大鼠心臟缺血-再灌注損傷的作用[A];2008心血管藥理學術研討會論文匯編[C];2008年

3 徐振平;郭志坤;;大鼠心臟連接蛋白43表達的增齡變化[A];中國動物學會全國顯微與亞顯微形態(tài)科學（細胞及分子顯微技術科學）分會第十一次學術研討會論文摘要集[C];2002年

4 崔小珠;陸耀飛;;游泳大鼠心臟結(jié)構(gòu)機能變化與內(nèi)源性胰島素樣生長因子-1的關系[A];2002年第9屆全國運動醫(yī)學學術會議論文摘要匯編[C];2002年

5 張瑤;李麗麗;徐燕;;骨髓間充質(zhì)干細胞移植對異丙腎上腺素損傷大鼠心臟功能和纖維化的影響及可能的機制[A];第十三次全國心血管病學術會議論文集[C];2011年

6 張雪巖;彭瑞云;高亞兵;王水明;董霽;張靜;徐新萍;王少霞;趙黎;左紅艷;王麗峰;姚斌偉;胡韶華;王惠;;抗輻靈對微波輻射致大鼠心臟損傷保護作用的探索研究[A];第八屆全國生物醫(yī)學體視學學術會議、第十一屆全軍軍事病理學學術會議、第七屆全軍定量病理學學術會議論文（摘要）匯編[C];2012年

7 郭煒;陳楠;陳瑩瑩;沈岳良;夏強;;線粒體K_(ATP)通道開放對冷保存大鼠心臟的作用及機制研究?[A];中國生理學會第五屆全國心血管、呼吸和腎臟生理學學術會議論文摘要匯編[C];2005年

8 牛麗麗;祝善俊;張樹林;崔振雙;劉建國;徐則昌;賀峰;孫琪;鄭敏;裴雪濤;;同種異體骨髓間充質(zhì)干細胞在大鼠心臟的遷移及分化特點[A];中華醫(yī)學會心血管病分會第八次全國心血管病學術會議匯編[C];2004年

9 胡R

本文編號：1128397