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AngⅡ通過(guò)AT1R降低大鼠心肌細(xì)胞中Angptl2的表達(dá)

發(fā)布時(shí)間:2017-10-29 17:27

  本文關(guān)鍵詞:AngⅡ通過(guò)AT1R降低大鼠心肌細(xì)胞中Angptl2的表達(dá)


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【摘要】:心力衰竭是多種疾病的終末階段,死亡率極高。隨著人口老齡化進(jìn)程的發(fā)展和社會(huì)壓力的增加,心力衰竭的發(fā)病率逐年上升并呈現(xiàn)出發(fā)病年齡年輕化的趨勢(shì),給社會(huì)及家庭帶來(lái)嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)和精神負(fù)擔(dān)。而心肌肥厚作為心力衰竭發(fā)生、發(fā)展的基礎(chǔ),已經(jīng)成為探究心力衰竭發(fā)病機(jī)制及尋找新的治療手段的研究重點(diǎn)。因此,探究心肌肥厚相關(guān)發(fā)病機(jī)制,尋找新的治療靶點(diǎn)是降低心力衰竭發(fā)病率和死亡率的關(guān)鍵。研究目的:本實(shí)驗(yàn)旨在探究血管緊張素Ⅱ (Angiotensin Ⅱ, Ang Ⅱ)對(duì)大鼠心肌細(xì)胞中血管生成素樣蛋白2(Angiopoietin-like protein 2, Angptl2)水平的影響。在此基礎(chǔ)上,進(jìn)一步探究AngⅡ影響Angptl2變化的可能機(jī)制。研究方法:1.選用正常Wistar大乳鼠(3天以內(nèi))30只;2.分離純化大乳鼠心肌細(xì)胞,接種至培養(yǎng)板,待細(xì)胞穩(wěn)定貼壁后,將細(xì)胞分為正常對(duì)照組,100nmol/LAngⅡ刺激組(0h、6h、24h、48h),24h AngⅡ刺激組(Onmol/L.50nmol/L、100nmol/L、200nmol/L), AngⅡ (100nmol/L,24h) +losartan (10-4mol/L), normal+losartan (10-4mol/L), AngⅡ (100nmol/L,24h)+ PD123319 (10-4mol/L), normal+PD123319 (10-4mol/L)。3.收集各組細(xì)胞培養(yǎng)基;提取各組蛋白、RNA;固定24孔板各處理組細(xì)胞。4.應(yīng)用細(xì)胞免疫熒光法鑒定心肌細(xì)胞;應(yīng)用ELISA法檢測(cè)各組培養(yǎng)中Angptl2的表達(dá)水平;應(yīng)用細(xì)胞免疫熒光法、Western Blot技術(shù)、RT-PCR法分別在細(xì)胞、蛋白和基因水平檢測(cè)各組Angptl2的表達(dá)量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:1.心肌細(xì)胞的鑒定:細(xì)胞貼壁第二天,顯微鏡下心肌細(xì)胞呈不規(guī)則形狀、聚集成簇生長(zhǎng),并以一定的節(jié)律跳動(dòng),同時(shí),視野中可見(jiàn)長(zhǎng)梭形細(xì)胞,為心臟成纖維細(xì)胞;倒置熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞免疫熒光結(jié)果,心肌細(xì)胞胞漿中高表達(dá)肌動(dòng)蛋白a (a-SMA),而心臟成纖維細(xì)胞基本不表達(dá)a-SMAo心肌細(xì)胞純度約為94%。2. AngⅡ?qū)ngptl2表達(dá)量的影響:通過(guò)對(duì)AngⅡ在不同濃度、不同時(shí)間條件下對(duì)Angptl2的表達(dá)量的作用的研究,確定100nmol/L AngⅡ刺激24小時(shí)時(shí),Angptl2的表達(dá)量較對(duì)照組下降最明顯(P0.05)。3.AT1R和AT2R拮抗劑的作用:在100nmol/L AngⅡ刺激24h條件下,AngII+ losartan組中Angptl2的表達(dá)量較AngⅡ組明顯增加(P0.05),而normal+ losartan組和normal+PD123319組中Angptl2的表達(dá)量與正常對(duì)照組相比無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05); AngⅡ+PD123319組中Angptl2的表達(dá)量較AngⅡ組無(wú)明顯變化(P0.05)。結(jié)論及意義:1. AngⅡ在較低濃度時(shí)可以下調(diào)心肌細(xì)胞中Angptl2的表達(dá)量。2. AngⅡ可以通過(guò)AT1R調(diào)控心肌細(xì)胞中Angptl2的表達(dá)。3. Angptl2可能在心肌肥厚的調(diào)控中發(fā)揮關(guān)鍵作用。
【關(guān)鍵詞】:血管生成素樣蛋白2(Angptl2) 血管緊張素Ⅱ 血管緊張素Ⅱ1型受體(AT1R) 心肌細(xì)胞 心肌肥厚
【學(xué)位授予單位】:山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R541.6
【目錄】:
  • 中文摘要6-8
  • 英文摘要8-10
  • 符號(hào)說(shuō)明10-12
  • 前言12-14
  • 材料與方法14-25
  • 結(jié)果25-28
  • 討論28-32
  • 結(jié)論32-33
  • 附圖表33-41
  • 參考文獻(xiàn)41-45
  • 綜述45-53
  • 參考文獻(xiàn)50-53
  • 致謝53-54
  • 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的文章54-55
  • 學(xué)位論文評(píng)閱及答辯情況表55

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 王淑亞;AngⅡ通過(guò)AT1R降低大鼠心肌細(xì)胞中Angptl2的表達(dá)[D];山東大學(xué);2016年

2 王吉英;乳腺炎小鼠ANGPTL2,,3及相關(guān)炎癥因子的基因表達(dá)變化[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

3 杜幸;血清Angptl2水平與2型糖尿病大血管并發(fā)癥的相關(guān)性研究[D];蘇州大學(xué);2014年



本文編號(hào):1113982

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