本文關鍵詞：血管周圍脂肪組織在尼古丁誘導血管內皮細胞炎癥反應中的作用

  更多相關文章： 脂肪細胞 內皮細胞 尼古丁 炎癥反應

【摘要】：目的:吸煙是動脈粥樣硬化最重要的危險因素之一,煙霧中的尼古丁(Nicotine)被認為是引起心血管損害的主要物質之一。以往研究主要集中在吸煙通過直接損傷血管內皮從而引發(fā)動脈粥樣硬化,近年來,多項研究證實血管周圍脂肪組織(Perivascular adipose tissue,PVAT)可分泌多種細胞因子,參與PVAT與血管之間的內環(huán)境調節(jié)作用。因此我們提出假設:尼古丁刺激后的血管損傷除了尼古丁對血管內皮的直接損傷外,可能還存在通過尼古丁的刺激后PVAT內分泌及旁分泌功能改變,造成細胞因子和炎癥因子的分泌異常,進而影響血管壁本身的結構與功能,最終促進內膜損傷。因此,我們設計了本課題來研究尼古丁刺激條件下體外培養(yǎng)的血管周圍脂肪細胞的脂肪因子及炎性因子水平的變化,證實上述改變對血管內皮細胞炎癥反應的影響方法:首先單獨培養(yǎng)脂肪細胞,將尼古丁稀釋成終濃度為10-6mol/l、10-7 mol/l、10-8 mol/l。分別用上述三個濃度的尼古丁處理脂肪細胞24小時后提取上清,用ELISA檢測IL-1β,IL-6,TNF-α和脂聯(lián)素的分泌量。利用同樣濃度的尼古丁處理內皮細胞24小時后提取上清,用ELISA檢測IL-1β,IL-6,TNF-α的分泌量。最后利用transwell培養(yǎng)板構建脂肪細胞-內皮細胞共培養(yǎng)體系后,用10-6 mol/l濃度的尼古丁處理脂肪細胞-內皮細胞共培養(yǎng)體系。Western-blot方法檢測NF-kB-p65的磷酸化水平,粘附因子VCAM-1、ICAM-1表達水平,再給予NF-kB抑制劑PDTC預處理共培養(yǎng)體系1小時后ELISA檢測共培養(yǎng)體系中IL-1β,IL-6,TNF-α和脂聯(lián)素的分泌量,Western-blot方法檢測粘附因子VCAM-1,ICAM-1表達水平。結果:尼古丁單獨刺激脂肪細胞后,脂聯(lián)素的表達量隨尼古丁濃度的增加顯著降低(P0.05),IL-1β和IL-6的表達量在尼古丁濃度為10-6、10-7mol/l時顯著增加(P0.01),10-8 mol/l濃度時,表達量相對于對照組無變化(P0.05)。尼古丁濃度為10-7、10-8 mol/l時,TNF-α的表達量相對于對照組無變化(P0.05),10-6mol/l時,表達量相對于對照組有顯著增加(P0.01)。尼古丁單獨刺激內皮細胞后,IL-1β和IL-6的表達量隨著尼古丁濃度的增加而增加(P0.05)。而TNF-α的表達在各尼古丁處理組間無變化(P0.05)。尼古丁刺激脂肪細胞-內皮細胞共培養(yǎng)系統(tǒng)后,IL-1β和IL-6的表達量相對于單獨培養(yǎng)組有顯著上升(P0.05)、TNF-α的表達量相對于單獨培養(yǎng)脂肪組和內皮組其表達量也有顯著上升。(P0.05)、脂聯(lián)素的表達量相對于單獨培養(yǎng)脂肪細胞組分泌量進一步下降,且具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。Western blot結果顯示脂肪細胞-內皮細胞共培養(yǎng)組的NF-kB p65的表達高于單獨培養(yǎng)脂肪細胞組和單獨培養(yǎng)內皮細胞組(P0.01),脂肪細胞-內皮細胞共培養(yǎng)組的VCAM-1、ICAM-1表達高于單獨培養(yǎng)內皮細胞組(P0.01)。NF-kB抑制劑PDTC(100um)預處理脂肪細胞-內皮細胞共培養(yǎng)體系1小時后,脂肪細胞-內皮細胞共培養(yǎng)系統(tǒng)IL-1β、IL-6和TNF-α的表達量相對于對照組有顯著上升(P0.05),共培養(yǎng)+PDTC培養(yǎng)組IL-1β、IL-6和TNF-α的表達量相對于共培養(yǎng)組有明顯下降趨勢(P0.05)。脂聯(lián)素的表達量,共培養(yǎng)+PDTC培養(yǎng)組相對于共培養(yǎng)組其表達量有顯著上升(P0.05),且具有統(tǒng)計學意義。Western blot結果顯示經(jīng)尼古丁刺激后,共培養(yǎng)+PDTC培養(yǎng)組相對于共培養(yǎng)組VCAM-1、ICAM-1表達量顯著降低。(P0.01)。結論:尼古丁的刺激可改變PVAT內分泌及旁分泌功能改變,造成細胞因子和炎癥因子脂聯(lián)素、IL-1β、IL-6和TNF-α的異常分泌,進而加劇內皮細胞炎癥反應,最終導致內膜功能障礙。尼古丁能激活炎癥信號分子NF-k B來促進脂肪細胞-內皮細胞共培養(yǎng)體系促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α的異常分泌、粘附分子VCAM-1、ICAM-1的表達,為進一步可否通過阻斷NF-kB信號通路來減輕尼古丁刺激對PVAT的損傷效應,并達到穩(wěn)定內皮細胞炎癥反應最終減輕內膜功能障礙提供了一個新的思路。
【關鍵詞】：脂肪細胞 內皮細胞 尼古丁 炎癥反應
【學位授予單位】：河北北方學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R54
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 英文縮寫9-10
• 前言10-13
• 材料與方法13-29
• 結果29-35
• 附圖35-52
• 討論52-59
• 結論59-60
• 參考文獻60-65
• 綜述 脂肪因子與心血管疾病的關系65-79
• 參考文獻71-79
• 致謝79-80
• 個人簡歷80

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 衛(wèi)朝霞,劉永波;一種新的內皮細胞分離方法[J];河南職工醫(yī)學院學報;2003年03期

2 任德成;胡娟娟;張均田;杜冠華;;血管內皮細胞損傷機制研究[J];醫(yī)學研究通訊;2003年10期

3 潘虹;王庭槐;;內皮細胞caveolae,caveolin-1的生理功能[J];醫(yī)學綜述;2006年22期

4 殷觀梅;;血管內皮細胞生長抑制因子研究進展[J];河北醫(yī)藥;2008年12期

5 劉寶宜,陳鐵鎮(zhèn),張寶庚,宋繼業(yè);動脈粥樣硬化形成過程中內皮細胞病變的研究(摘要)——主動脈內皮細胞平掙,掃描電鏡及透射電鏡的觀察[J];中國醫(yī)科大學學報;1981年S1期

6 劉寶宜,陳鐵鎮(zhèn),張寶庚,宋繼業(yè);動脈粥樣硬化形成過程中內皮細胞的形態(tài)學變化的研究(主動脈內皮細胞平鋪技術,掃描電鏡及透射電鏡的方法)[J];中國醫(yī)科大學學報;1982年03期

7 張連元;;動脈粥樣硬化發(fā)病機理中平滑肌和內皮細胞的機能[J];煤礦醫(yī)學;1983年04期

8 劉懷瓊;李德馨;;內皮細胞的功能與休克的關系[J];國外醫(yī)學.麻醉學與復蘇分冊;1985年04期

9 何澤涌;;關于內皮細胞研究的某些進展[J];山西醫(yī)藥雜志;1987年03期

10 何澤涌;;關于內皮細胞研究的某些進展[J];山西醫(yī)藥雜志;1987年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 應大君;陳衛(wèi)軍;周丁華;;內皮細胞機械感受功能的實驗研究[A];面向21世紀的科技進步與社會經(jīng)濟發(fā)展（下冊）[C];1999年

2 鄧紅;李懿萍;來茂德;;高糖環(huán)境細胞間相互作用對內皮細胞產(chǎn)生活性氧和血管內皮細胞生長因子的影響[A];中華醫(yī)學會病理學分會2005年學術年會論文匯編[C];2005年

3 林萍章;PualJ.Pearson;RaymondCartier;KazuhiroHashimoto;HartzellV.Schaff;;內膜再生過程中,內皮細胞之反應[A];海峽兩岸電子顯微學討論會論文專集[C];1991年

4 趙彭濤;李志超;董明清;賈斌;張莉莉;;LPS對培養(yǎng)的BPAECsⅠ型Na~+/H~+交換器活性的影響[A];第六次全國缺氧和呼吸病理生理學術會議論文摘要匯編[C];2003年

5 熊建瓊;朱佩芳;王正國;蔣建新;;髓樣分化蛋白-2在內毒素與內皮細胞結合中的作用[A];第十一次全國急診醫(yī)學學術會議暨中華醫(yī)學會急診醫(yī)學分會成立二十周年慶典論文匯編[C];2006年

6 王心華;甄永蘇;;烯二炔類抗生素力達霉素抑制內皮細胞生長和誘導內皮細胞凋亡[A];2000全國腫瘤學術大會論文集[C];2000年

7 李彥榮;應晨江;易海維;衣衛(wèi)杰;孟依;劉烈剛;孫秀發(fā);;綠茶多酚對牛內皮細胞窖蛋白-1表達的影響[A];湖北省、武漢市營養(yǎng)學會第十一屆學術會議論文匯編[C];2007年

8 蔡紹皙;張莉;韓亞剛;蔣稼歡;;流動腔底面內皮細胞圖型化研究與圖像處理[A];第十次中國生物物理學術大會論文摘要集[C];2006年

9 汪毅;陳允欽;;高密度脂蛋白與內皮功能[A];第六次全國中西醫(yī)結合心血管會學術會議論文匯編[C];2002年

10 馬向紅;黃體鋼;楊萬松;周麗娟;;四氫生物喋呤對內皮細胞產(chǎn)生一氧化氮和超氧陰離子的影響[A];中華醫(yī)學會心血管病分會第八次全國心血管病學術會議匯編[C];2004年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 ;中藥抗血栓機理及對內皮細胞的生物醫(yī)學研究取得佳績[N];科技日報;2000年

2 趙軍;耳毒性藥物對耳蝸螺旋動脈平滑肌和內皮細胞電生理特性的影響項目[N];科技日報;2007年

3 華朋;熱愛老年事業(yè) 投身老年醫(yī)藥[N];中國老年報;2000年

4 高國起;提升ACE2活性可消退動脈硬化斑塊[N];中國醫(yī)藥報;2010年

5 佳愉;中藥善調理 降壓重保腎[N];中國中醫(yī)藥報;2009年

6 劉道安;保護動脈內膜 減少冠心病發(fā)生[N];中國醫(yī)藥報;2005年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 白云城;LPS調控靜脈內皮細胞膜形態(tài)及通透性引發(fā)血栓形成的實驗研究[D];昆明醫(yī)科大學;2015年

2 宋恩;內皮細胞源性KLF15調控TM激活蛋白C抗凝血途徑及MCP-1介導炎性反應影響DVT形成的實驗研究[D];昆明醫(yī)科大學;2015年

3 宋凱;口腔癌—內皮細胞融合的分子調控機制及潛在作用[D];武漢大學;2014年

4 張可滿;氧化型LDL對血管內皮細胞的誘導激活[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2000年

5 賈素潔;內源性一氧化氮合酶抑制物與內皮細胞通訊功能障礙及（口山）酮的保護作用[D];中南大學;2007年

6 郭志堅;晚期糖基化終產(chǎn)物修飾的蛋白質對人血管內皮細胞的病理生物學作用及其機制的研究[D];第一軍醫(yī)大學;2002年

7 肖暉;內皮細胞硫酸乙酰肝素蛋白聚糖與細胞粘附關系的實驗研究[D];山西醫(yī)科大學;2005年

8 李毅;活化蛋白C對脂多糖誘導內皮細胞活化的影響[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2002年

9 陳麗華;一種新的內皮細胞可誘導性粘附分子的表達調變及功能研究[D];第四軍醫(yī)大學;2000年

10 鄭敏哲;初探內皮細胞膜微粒（EMPs）于體外對內皮細胞功能及凋亡的影響[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2008年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王冰;Y盒結合蛋白-1C末端結構域調節(jié)血管新生的機制研究[D];河北大學;2015年

2 米雪楠;MicroRNAs對血管內皮細胞衰老及血管功能影響的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2015年

3 王媛;Ti表面四種生物分子功能修飾層的對比研究[D];西南交通大學;2015年

4 潘芝娟;抗HLA抗體對異基因造干細胞移植預后的影響及其機制研究[D];蘇州大學;2015年

5 邵潔;TNFAIP8L1在動脈粥樣硬化中的作用研究[D];山東大學;2015年

6 蘇立男;TRPV1對內皮細胞增殖、遷移能力的影響及相關機制[D];四川醫(yī)科大學;2015年

7 王超楠;血管周圍脂肪組織在尼古丁誘導血管內皮細胞炎癥反應中的作用[D];河北北方學院;2015年

8 范禎禎;高壓氧對實驗兔腦血流量及腦血管內皮細胞凋亡影響的實驗研究[D];蘭州大學;2015年

9 高雪;環(huán)境因子對內皮細胞影響及相關磷脂圖譜的建立[D];天津大學;2007年

10 陳瑤;IGF-1對受損血管內皮細胞的影響及機制研究[D];重慶醫(yī)科大學;2011年

，

本文編號：1101094