發(fā)布時(shí)間：2017-10-24 08:06

  本文關(guān)鍵詞：高血壓藥物相關(guān)基因的突變檢測(cè)方法研究與應(yīng)用

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【摘要】：個(gè)體化醫(yī)學(xué)作為一種新的醫(yī)學(xué)理念,是21世紀(jì)臨床醫(yī)學(xué)的發(fā)展趨勢(shì),因其在病人使用藥物之前,對(duì)患者的某些藥物相關(guān)基因進(jìn)行檢測(cè),不但可以降低患者醫(yī)療成本、改善藥物療效,同時(shí)還可以最大限度地避免藥物不良反應(yīng)的發(fā)生。針對(duì)以上考慮,本文借助焦磷酸測(cè)序平臺(tái)及PCR-電泳技術(shù),對(duì)高血壓藥物相關(guān)基因及K-ras基因進(jìn)行檢測(cè)方法研究,主要工作如下：第二章：ADRB1是β1腎上腺受體阻斷藥的作用靶點(diǎn),ADRB1基因型突變雜合子(Gly389Arg)和突變純合子(Arg389Arg)對(duì)β1受體阻斷藥較為敏感,而野生純合子(Gly389Gly)對(duì)藥物不敏感。對(duì)ADRB1基因型進(jìn)行檢測(cè)可幫助高血壓患者選擇合適的藥物。本文采用焦磷酸測(cè)序技術(shù),檢測(cè)高血壓患者ADRB1基因多態(tài)性,并采用毛細(xì)管電泳測(cè)序技術(shù)對(duì)本文中建立的焦磷酸測(cè)序方法進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。結(jié)果顯示該方法檢測(cè)正確率為100%,可以作為科研或臨床中ADRB1 Arg389G1y基因多態(tài)性檢測(cè)的一種新的檢測(cè)方法。通過對(duì)184例高血壓患者的ADRB1 Arg389G1y等位基因進(jìn)行多態(tài)性檢測(cè),結(jié)果顯示G1y389G1y基因型的頻率為924%,Arg389G1y基因型的頻率為38.04%, Arg389Arg基因型的頻率為52.72%。第三章：細(xì)胞色素氧化酶P450 2C9(CYP2C9)(Ile359Leu359)突變導(dǎo)致CYP2C9酶活性在不同個(gè)體間存在差異。CYP2C9*3突變可降低E3174的血藥濃度,導(dǎo)致洛沙坦降壓效果減弱；CYP2C9*3突變可增加纈沙坦和厄貝沙坦的血藥濃度,導(dǎo)致纈沙坦和厄貝沙坦降壓效果增強(qiáng)。對(duì)CYP2C9*3基因多態(tài)性進(jìn)行檢測(cè)可以指導(dǎo)高血壓患者合理用藥。本文采用焦磷酸測(cè)序技術(shù),檢測(cè)高血壓患者CYP2C9*3基因多態(tài)性,并采用毛細(xì)管電泳測(cè)序技術(shù)對(duì)本文中建立的焦磷酸測(cè)序方法進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。結(jié)果顯示該方法檢測(cè)正確率為100%,可以作為科研或臨床中CYP2C9*3基因多態(tài)性檢測(cè)的一種新的檢測(cè)方法。通過對(duì)184例高血壓患者的CYP2C9*3等位基因進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示*1/*3基因型的頻率為7.6%,*1/*1基因型的頻率為92.4%。而*3/*3基因型沒有出現(xiàn),與前人的研究結(jié)果一致。第四章：在人體內(nèi),血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)水平受控于ACE基因,不同的ACE基因型ACE水平的差異明顯,ACE基因多態(tài)性對(duì)血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑(ACEI)的降壓效應(yīng)可產(chǎn)生顯著的影響,不同ACE I/D基因型的個(gè)體對(duì)特定ACEI類藥物的敏感性顯著不同。為了取得最好的療效,選擇藥物之前應(yīng)該明確患者的ACE I/D基因型。本文采用PCR-電泳分析方法檢測(cè)高血壓患者ACE I/D多態(tài)性,并采用毛細(xì)管電泳測(cè)序技術(shù)對(duì)該P(yáng)CR-電泳分析方法進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。結(jié)果顯示該方法檢測(cè)正確率為100%,可以作為科研或臨床中ACE I/D基因多態(tài)性檢測(cè)的一種新的檢測(cè)方法。通過對(duì)184例高血壓患者的ACE I/D多態(tài)性進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示I/I基因型頻率為44.57%,I/D基因型頻率為40.76%,D/D基因型頻率為14.67%。第五章：表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)是西妥昔單抗(Cetuximab)的作用靶點(diǎn),K-ras基因突變的患者使用西妥昔單抗的療效降低甚至無(wú)效。K-ras基因最常見的突變發(fā)生在在1號(hào)外顯子的第12位密碼子[35GA、35GT、35GC、34GA、34GT、34GC]和第13位密碼子[38GA]上(約占突變的90%),另外,有約5%的突變位于2號(hào)外顯子的第61位密碼子上。檢測(cè)K-ras基因突變可以預(yù)測(cè)患者使用西妥昔單抗的療效。本文采用焦磷酸測(cè)序技術(shù)檢測(cè)K-ras基因突變,并通過室間質(zhì)評(píng)對(duì)該焦磷酸測(cè)序方法進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。結(jié)果顯示該方法通過了室間質(zhì)評(píng)驗(yàn)證,其檢測(cè)正確率為100%,可以作為科研或臨床中K-ras基因突變檢測(cè)的一種新的檢測(cè)方法。通過對(duì)230例結(jié)直腸癌標(biāo)本進(jìn)行K-ras基因焦磷酸測(cè)序,發(fā)現(xiàn)K-ras基因總突變率為14.34%,低于以往學(xué)者的報(bào)道數(shù)據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：高血壓 β1腎上腺受體 細(xì)胞色素氧化酶P4502C9 血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 K-ras基因 基因多態(tài)性檢測(cè)
【學(xué)位授予單位】：長(zhǎng)沙理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R440;R544.1
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本文編號(hào)：1087820