本文關(guān)鍵詞：黃芪多糖對THP-1及HepG2細胞PCSK9表達的影響研究

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【摘要】：目的:研究黃芪多糖(APS)在THP-1及HepG2細胞內(nèi)對人前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素9(PCSK9)表達的影響,并初步探討其機制。方法:體外培養(yǎng)THP-1單核/巨噬細胞及Hep G2肝癌細胞,CCK-8檢測出APS作用的最適藥物濃度。實驗分兩部分,第一部分,以THP-1細胞為實驗對象,分組:對照(Control)組,低密度脂蛋白(LDL)組,LDL+黃芪多糖(APS)組,LDL+PPAR-β/δ激動劑(GW0742)組,LDL+PPAR-β/δ抑制劑(GSK0660)+APS組。細胞免疫熒光定位PCSK9的表達,實時熒光定量PCR(RT-PCR)及蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot)檢測各組細胞PCSK9、低密度脂蛋白受體(LDLR)、PPAR-β/δ的表達量。第二部分,以Hep G2細胞為實驗對象,分組:Control組,APS組,GW0742組,APS+GSK0660組。激光共聚焦技術(shù)檢測不同組細胞對Dil-LDL的吸收率,RT-PCR及Western Blot檢測各組細胞PCSK9、低密度脂蛋白受體(LDLR)、PPAR-β/δ的表達量。結(jié)果:第一部分:1)CCK-8結(jié)果顯示APS作用THP-1細胞的最適濃度為400ug/ml;2)RT-PCR及Western Blot結(jié)果均提示LDL組PCSK9表達較Control組增高,LDL+APS組及LDL+GW0742組較LDL組明顯降低,LDL+GSK0660+APS組較LDL+APS及LDL+GW0742組表達升高(P0.05);3)對于LDLR的蛋白表達量,LDL組較Control組減弱,LDL+APS及LDL+GW0742組較LDL組升高,LDL+GSK0660+APS較LDL+APS及LDL+GW0742組明顯降低(P0.05);而基因表達水平上,LDL組、LDL+APS組、LDL+GW0742組及LDL+GSK0660+APS組均較Control組降低(P0.05),其中上述前四組間LDLR基因表達無明顯差異(P0.05);4)在基因及蛋白表達水平,LDL+APS及LDL+GW0742組較Control組PPAR-β/δ的表達升高,而LDL+GSK0660+APS組較LDL+APS及LDL+GW0742組又明顯降低(P0.05),LDL組與Control組表達則未見明顯差異(P0.05)。第二部分:1)CCK-8結(jié)果顯示APS作用HepG2細胞的最適濃度為600ug/ml;2)激光共聚焦結(jié)果提示APS組及GW0742組Dil-LDL的吸收較Control增加,GSK0660組則較前兩組降低;3)RT-PCR及Western Blot結(jié)果顯示APS及GW0742組較Control組PCSK9表達降低,APS+GSK0660組較APS組、GW0742組PCSK9表達升高(P0.05)。4)在蛋白表達水平,APS及GW0742組較Control組LDLR的表達增加,APS+GSK0660組則較APS組、GW0742組表達降低(P0.05);基因水平上幾組間表達無明顯差異(P0.05)。5)基因及蛋白表達水平均提示APS組PPAR-β/δ的表達較Control組增高,APS+GSK0660組則較APS組、GW0742組表達降低(P0.05)。結(jié)論:APS可降低THP-1及GepG2細胞PCSK9的表達,從而增加LDLR的表達,且PPAR-β/δ可能是APS作用于PCSK9的通路之一。
【關(guān)鍵詞】：黃芪多糖 前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素9 過氧化物酶體增殖物激活受體β 動脈粥樣硬化
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R54
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照4-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-12
• 第一部分 黃芪多糖對THP-1 細胞PCSK9表達的影響研究12-28
• 1.主要試驗材料及儀器12-14
• 2.實驗方法14-21
• 3.實驗結(jié)果21-26
• 4.討論26-28
• 第二部分 黃芪多糖對HepG2肝癌細胞PCSK9表達的影響研究28-39
• 1.主要試驗材料及儀器28-30
• 2.實驗方法30-32
• 3.實驗結(jié)果32-37
• 4.討論37-39
• 全文總結(jié)39-40
• 參考文獻40-43
• 文獻綜述43-53
• 參考文獻49-53
• 致謝53-54
• 攻讀碩士學(xué)位期間完成的論文54

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7 林t，

本文編號：1068016