本文關(guān)鍵詞：丙型肝炎病毒河北株E2蛋白胞外核心區(qū)的真核表達(dá)及應(yīng)用

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【摘要】：目的真核細(xì)胞表達(dá)丙型肝炎病毒(HCV)河北株E2蛋白胞外核心區(qū)(E2c)并利用E2c蛋白檢測(cè)HCV患者血清中特異性抗E2蛋白抗體水平。方法以HCV1b型(河北株)基因序列為基礎(chǔ),設(shè)計(jì)HCV1b E2c基因序列并通過基因拼接的方法合成;將含有組織型纖溶酶原激活物(t PA)信號(hào)肽的E2c擴(kuò)增產(chǎn)物克隆入p CI-neo真核表達(dá)載體,獲得p CI-tpa-1b E2c載體;將p CI-tpa-1b E2c真核表達(dá)載體轉(zhuǎn)染HEK293T細(xì)胞,收集細(xì)胞上清后進(jìn)行濃縮及純化,Western blot法鑒定蛋白特異性;以獲得E2c蛋白為抗原,建立基于雪花蓮凝集素(GNA)的改良ELISA檢測(cè)HCV患者血清特異性抗E2c抗體水平。結(jié)果成功利用真核表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)獲得E2c蛋白,建立了GNA改良ELISA檢測(cè)HCV患者血清中抗E2蛋白抗體的方法。結(jié)論成功在HEK293T細(xì)胞表達(dá)HCV-1b E2c蛋白并進(jìn)行了臨床應(yīng)用。
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院傳染科;第四軍醫(yī)大學(xué)微生物學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 丙型肝炎病毒(HCV) E蛋白胞外核心區(qū)(Ec)蛋白 真核表達(dá) 基于雪花蓮凝集素的改良ELISA
【基金】：十二五傳染病重大專項(xiàng)(2013ZX10004609)
【分類號(hào)】：R512.63
【正文快照】： 丙型病毒性肝炎(hepatitis C)嚴(yán)重危害人類健康,其病原體是丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)。全球HCV感染者約為1.3~1.7億,每年新增30~40萬感染人數(shù)[1]。HCV感染后極易慢性化,可導(dǎo)致肝纖維化、肝硬化、肝癌[2-3]。HCV屬于黃病毒科嗜肝病毒屬,其單正鏈RNA全長(zhǎng)約為9600個(gè)核

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1 李曉瑤;鄒淑慧;夏方娜;楊小平;余克花;劉金輝;;不同基因型丙型肝炎病毒E1、E2蛋白生物信息學(xué)分析[J];南昌大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2014年07期

2 ;[J];;年期

，

本文編號(hào)：734850