本文關(guān)鍵詞：黑豆多糖的提取、結(jié)構(gòu)及其對(duì)小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用研究

  更多相關(guān)文章： 黑豆 多糖 結(jié)構(gòu)表征 自由基 抗氧化 護(hù)肝活性

【摘要】：黑豆中不僅含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分,還具有抗氧化、抗炎、抗肥胖、抗糖尿病和抗突變以及抑制低密度脂蛋白的氧化和減少DNA損傷等多種生物活性。本研究采用水提法提取黑豆多糖,并對(duì)其最優(yōu)提取條件、分離純化、結(jié)構(gòu)表征、抗氧化活性及其護(hù)肝活性等進(jìn)行系統(tǒng)研究。(1)通過單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)合響應(yīng)曲面法對(duì)黑豆多糖的提取條件進(jìn)行研究。結(jié)果表明,黑豆多糖最佳的提取條件為：液料比為15 m1/g,提取時(shí)間為6.4 h,提取溫度為92℃,相應(yīng)的最高提取率為2.56%。(2)通過DEAE-纖維素離子交換色譜柱和Sephadex CL-4B瓊脂糖凝膠色譜柱將黑豆多糖分離純化成三個(gè)組分BSPS-1、BSPS-2和BSPS-3,并采用高效體積排阻色譜法測(cè)定多糖純組分的分子量為1.95 × 105Da、3.46 × 105Da和1.88×105Da。(3)通過多種儀器分析法對(duì)黑豆多糖的結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征。多糖溶液的紫外掃描結(jié)果表明BSPS-1、BSPS-2和BSPS-3在260-280 nm的波長(zhǎng)范圍內(nèi)無(wú)最大吸收,說明多糖樣品中無(wú)核酸和蛋白質(zhì)等雜質(zhì)。多糖的紅外光譜分析結(jié)果表明,BSPS-1在1916 cm-1和762 cm-1處的吸收峰說明其具有典型的吡喃葡萄糖殘基；而BSPS-2和BSPS-3在1076 cm-1和1043 cm-1處的峰說明其具有吡喃半乳糖和阿拉伯呋喃糖殘基。采用三甲基硅醚衍生化法對(duì)多糖樣品的單糖組成進(jìn)行分析,結(jié)果表明BSPS-1主要由阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖組成,其摩爾比為1.79：1.00：2.59：26.54：1.01；BSPS-2主要由阿拉伯糖、鼠李糖、木糖、甘露糖和半乳糖組成,其摩爾比為8.10：4.80：9.15：13.38：1；BSPS-3主要由阿拉伯糖、鼠李糖、甘露糖和半乳糖組成,其摩爾比為16.80：3.6：33.66：1。甲基化和GC-MS的結(jié)果表明,BSPS-1主要是由→6)-Glcp-(1--',構(gòu)成的；而BSPS-3的主鏈?zhǔn)怯伞?)-β-D-Galp-(1→構(gòu)成,而T-α-LAraf-(1→、→5)-α-L-Araf-(1→、→2)-α-L-Rhap-(1→和4-O-Me-β-D-GlcAp-(1→與→3)-β-D-Galp-1→等其他殘基則位于側(cè)鏈。1D和2D NMR進(jìn)一步表明,BSPS-1是線性的(1→6)-a-D-葡聚糖,而BSPS-3是Ⅱ型阿拉伯半乳聚糖。(4)對(duì)黑豆多糖的體外抗氧化活性和護(hù)肝作用進(jìn)行了研究。體外抗氧化實(shí)驗(yàn)表明,粗BSPS和其純化組分具有較強(qiáng)的超氧陰離子自由基和DPPH自由基清除活性,其體外抗氧化活性大小的順序?yàn)椋捍諦SPSBSPS-3BSPS-2BSPS-1。體內(nèi)護(hù)肝活性實(shí)驗(yàn)表明,相比于四氯化碳模型組,黑豆多糖處理組不僅可以顯著抑制血清中大冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶水平的升高,而且可以顯著提高肝組織中超氧化物岐化酶、過氧化物酶、谷胱甘肽過氧化物酶、谷胱甘肽還原酶、谷胱甘肽和總抗氧化能力的水平；此外,還可以顯著降低肝組織中的丙二醛水平,而高劑量組黑豆多糖的護(hù)肝效果可與水飛薊素相媲美。研究結(jié)果表明,黑豆多糖具有很好的抗氧化活性,同時(shí),對(duì)四氯化碳誘導(dǎo)的急性肝損傷有潛在的保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：黑豆 多糖 結(jié)構(gòu)表征 自由基 抗氧化 護(hù)肝活性
【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R575
【目錄】：

• 摘要2-4
• Abstract4-10
• 第一章 緒論10-22
• 1.1 黑豆的研究進(jìn)展10-12
• 1.1.1 黑豆的資源分布10
• 1.1.2 黑豆的營(yíng)養(yǎng)成分10-11
• 1.1.3 黑豆中的生物活性成分及其功能11
• 1.1.4 黑豆的開發(fā)與應(yīng)用11-12
• 1.2 多糖的研究進(jìn)展12-15
• 1.2.1 多糖的來(lái)源與分布12
• 1.2.2 多糖的提取、分離和純化12-13
• 1.2.2.1 多糖的提取12-13
• 1.2.2.2 多糖的分離和純化13
• 1.2.3 多糖的結(jié)構(gòu)分析13-14
• 1.2.4 多糖的生物活性14-15
• 1.2.4.1 免疫調(diào)節(jié)活性14
• 1.2.4.2 抗氧化活性14-15
• 1.2.4.3 抗腫瘤活性15
• 1.2.4.4 其他生物活性15
• 1.3 本文研究概述15-16
• 1.3.1 本文的研究目的和意義15
• 1.3.2 本文的主要研究?jī)?nèi)容15-16
• 參考文獻(xiàn)16-22
• 第二章 黑豆多糖的提取條件優(yōu)化22-32
• 2.1 引言22
• 2.2 材料與方法22-24
• 2.2.1 試驗(yàn)材料、試劑與儀器設(shè)備22-23
• 2.2.2 黑豆多糖的提取23
• 2.2.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)23-24
• 2.2.3.1 單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)23
• 2.2.3.2 Box-Behnken(BB)試驗(yàn)設(shè)計(jì)23-24
• 2.2.3.3 試驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)分析24
• 2.3 結(jié)果與討論24-30
• 2.3.1 單因素試驗(yàn)結(jié)果與分析24-27
• 2.3.1.1 液料比對(duì)粗多糖提取率的影響24-25
• 2.3.1.2 提取時(shí)間對(duì)粗多糖提取率的影響25
• 2.3.1.3 提取溫度對(duì)粗多糖提取率的影響25-26
• 2.3.1.4 提取次數(shù)對(duì)粗多糖提取率的影響26-27
• 2.3.2 BBD試驗(yàn)結(jié)果與分析27-30
• 2.4 本章小結(jié)30
• 參考文獻(xiàn)30-32
• 第三章 黑豆多糖的分離純化32-39
• 3.1 引言32
• 3.2 材料與方法32-34
• 3.2.1 試驗(yàn)材料、試劑與儀器設(shè)備32
• 3.2.2 試驗(yàn)方法32-34
• 3.2.2.1 DEAE-纖維素色譜法初步分離32-33
• 3.2.2.2 Sepharose CL-4B瓊脂糖凝膠柱層析法進(jìn)一步純化33
• 3.2.2.3 多糖組分的純度鑒定和分子量測(cè)定33-34
• 3.3 結(jié)果與討論34-37
• 3.3.1 粗多糖的DEAE-纖維素柱層析34
• 3.3.2 多糖組分F-1和F-2的Sepharose CL-4B瓊脂糖凝膠柱層析34-35
• 3.3.3 多糖組分BSPS-1、BSPS-2和BSPS-3的純度鑒定和分子量測(cè)定35-37
• 3.4 本章小結(jié)37
• 參考文獻(xiàn)37-39
• 第四章 黑豆多糖的結(jié)構(gòu)鑒定39-58
• 4.1 引言39
• 4.2 材料與方法39-41
• 4.2.1 試驗(yàn)材料、試劑與儀器設(shè)備39-40
• 4.2.2 紫外光譜分析40
• 4.2.3 紅外光譜分析40
• 4.2.4 單糖組分分析40
• 4.2.5 甲基化反應(yīng)及GC-MS分析40-41
• 4.2.6 核磁共振分析41
• 4.3 結(jié)果與討論41-55
• 4.3.1 BSPS-1、BSPS-2和BSPS-3的紫外吸收光譜圖分析41-42
• 4.3.2 BSPS-1、BSPS-2和BSPS-3的紅外光譜圖分析42-43
• 4.3.3 BSPS-1、BSPS-2和BSPS-3的單糖組分分析43-45
• 4.3.4 BSPS-1和BSPS-3的甲基化與GC-MS分析45
• 4.3.5 BSPS-1和BSPS-3的核磁共振圖譜分析45-55
• 4.3.5.1 BSPS-1的核磁共振圖譜分析45-50
• 4.3.5.2 BSPS-3的核磁共振分析50-55
• 4.4 本章小結(jié)55-56
• 參考文獻(xiàn)56-58
• 第五章 黑豆多糖的體外抗氧化活性及其對(duì)小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用58-70
• 5.1 引言58
• 5.2 材料與方法58-61
• 5.2.1 試驗(yàn)材料、試劑與儀器設(shè)備58-59
• 5.2.2 黑豆多糖組分的體外抗氧化活性的測(cè)定59-60
• 5.2.2.1 超氧陰離子自由基清除活性的測(cè)定59
• 5.2.2.2 DPPH自由基清除活性的測(cè)定59-60
• 5.2.3 黑豆多糖的護(hù)肝活性測(cè)定60-61
• 5.2.3.1 動(dòng)物試驗(yàn)分組與設(shè)計(jì)60
• 5.2.3.2 生理生化指標(biāo)測(cè)定60
• 5.2.3.3 統(tǒng)計(jì)分析60-61
• 5.3 結(jié)果與討論61-66
• 5.3.1 黑豆多糖的體外抗氧化活性61-62
• 5.3.1.1 超氧陰離子自由基清除活性61
• 5.3.1.2 DPPH自由基清除活性61-62
• 5.3.2 黑豆多糖對(duì)CCl_4誘導(dǎo)的急性肝損傷的保護(hù)作用62-66
• 5.3.2.1 黑豆多糖對(duì)小鼠體重和肝臟指數(shù)的影響62-63
• 5.3.2.2 黑豆多糖對(duì)小鼠血清中ALT、AST和AKP的影響63-64
• 5.3.2.3 黑豆多糖對(duì)小鼠肝組織中抗氧化酶活性的影響64-65
• 5.3.2.4 黑豆多糖對(duì)小鼠肝組織中MDA、GSH和T-AOC的影響65-66
• 5.4 本章小結(jié)66-67
• 參考文獻(xiàn)67-70
• 致謝70
• 基金資助70-71
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文71-72

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 溫小媛;黑豆多糖的提取、結(jié)構(gòu)及其對(duì)小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2016年

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本文編號(hào)：700276