肝豆扶木湯對Wilson病肝纖維化臨床療效觀察及其對TX小鼠肝纖維化的Western blot研究
本文關(guān)鍵詞：肝豆扶木湯對Wilson病肝纖維化臨床療效觀察及其對TX小鼠肝纖維化的Western blot研究
更多相關(guān)文章： 肝豆扶木湯 肝豆?fàn)詈俗冃?/b> 肝纖維化 TX小鼠 Western blot TGF-β1/Smad信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路
【摘要】：目的:(1)對肝豆?fàn)詈俗冃?WD)患者采用不同的治療方案,觀察肝豆扶木湯(GDFMT)對WD肝纖維化患者中醫(yī)證候積分值、肝纖維化血清學(xué)指標(biāo)、肝功能、血清銅藍(lán)蛋白、銅氧化酶、血清銅及24h尿銅等的影響,評價GDFMT治療WD肝纖維化患者的臨床療效,探討GDFMT治療WD肝纖維化的作用機理;(2)采用Western blot法觀察GDFMT在不同藥物濃度、不同治療時間對WD模型TX小鼠肝纖維化的干預(yù)作用,證實GDFMT對WD模型TX小鼠肝纖維化具有逆轉(zhuǎn)作用,闡明GDFMT對WD模型TX小鼠肝纖維化逆轉(zhuǎn)作用的分子機制;為提供逆轉(zhuǎn)WD肝纖維化有效組方。方法:臨床部分:將符合納入標(biāo)準(zhǔn)的60例WD肝纖維化患者隨機分為治療組(GDFMT組)30例,對照組(扶正化瘀膠囊組)30例。治療組予以GDFMT,對照組予以扶正化瘀膠囊,基礎(chǔ)治療2組均予以DMPS驅(qū)銅治療,6天予以靜脈排銅,間歇2天予以補鈣,1療程為8天,共計4療程。對比WD患者治療前后中醫(yī)證候積分值、肝纖維化血清學(xué)指標(biāo)(血清HA、LN、PC-Ⅲ、C-IV)、肝功能(ALT、AST、TP、ALB)、血清銅、血清銅藍(lán)蛋白、血清銅氧化酶及24h尿銅等指標(biāo)變化。實驗部分:144只TX小鼠隨機分為模型組、青霉胺組、丹參組、GDFMT低劑量組、GDFMT中劑量組、GDFMT高劑量組。正常對照組DL小鼠24只。共7組。(1)采用競爭性放免分析法檢測血清HA、LN、PC-Ⅲ、C-IV含量;(2)采用賴氏法檢測血清ALT、AST,考馬斯亮蘭法檢測血清TP、溴甲酚綠法檢測血清ALB;(3)采用Western blot法檢測肝組織TGF-β1、TβRⅠ、TβRⅡ、Smad2、smad3、smad4、smad7蛋白的含量。結(jié)果:(1)臨床部分:1)臨床總療效:經(jīng)過4個療程的治療,治療組dmps聯(lián)合gdfmt臨床總療效明顯優(yōu)于對照組dmps加扶正化瘀膠囊組。2)中醫(yī)證候積分值:兩組患者在治療前中醫(yī)證候積分值無差異(p0.05);與同組治療前相比,2組治療后中醫(yī)證候積分值均降低,具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.01,p0.05);2組治療后組間對比,治療組積分值改善較對照組更明顯(p0.01)。3)血清ha、ln、pc-Ⅲ、c-iv:治療前,2組ha、ln、c-iv、pc-Ⅲ值均無顯著差異(p0.05);治療后組內(nèi)比較,治療組較治療前ha、ln、c-iv、pc-Ⅲ均顯著降低(p0.01),對照組較治療前有下降,且有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.01,p0.05);治療后組間比較,治療組比對照組改善更加明顯,兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.01)。說明肝豆扶木湯具有良好的抗肝纖維化作用。4)肝功能:2組治療前血清alt、ast、tp、alb值均差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05);治療后治療組患者血清alt、ast顯著下降,tp、alb顯著升高,表明治療組治療后肝功能指標(biāo)較治療前顯著改善,有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.01);對照組肝功能指標(biāo)亦較治療前有所改善,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05);2組治療后組間比較,治療組肝功能指標(biāo)(alt、ast、tp、alb)改善情況較對照組更為明顯,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.01)。5)血清銅藍(lán)蛋白、銅氧化酶及血清銅:與同組治療前比較,治療組和對照組血清銅藍(lán)蛋白、銅氧化酶及血清銅治療后均無顯著差異(p0.05);治療后組間比較,2組均無顯著差異(p0.05),表明肝豆扶木湯對wd患者上述三項指標(biāo)均無明顯影響。6)24h尿銅:與同組治療前比較,2組治療后24h尿銅均顯著升高,差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(p0.01);治療后組間比較,每療程末治療組24h尿銅均明顯高于對應(yīng)的對照組(p0.01)。提示肝豆扶木湯能顯著提高wd患者的排銅量。7)心電圖、血常規(guī)、尿常規(guī)、大便常規(guī)及腎功能:2組wd患者治療前后心電圖、血常規(guī)、尿常規(guī)、大便常規(guī)及腎功能未見明顯異常變化。(2)實驗部分:1)血清ha、ln、pc-Ⅲ、c-iv含量:(1)與對應(yīng)的正常組2周、4周、6周組比較,模型組tx小鼠血清ha、ln、pcⅢ、c-iv含量明顯升高(p0.01),提示wd模型tx小鼠存在明顯肝臟損害。(2)與對應(yīng)的模型組2周、4周、6周比較,gdfmt高、中劑量組、丹參組和青霉胺組各組ha、ln、pc-Ⅲ、c-iv均明顯下降(p0.05,p0.01),gdfmt2周血清ha、ln、pc-Ⅲ、c-iv雖均有下降,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。(3)與對應(yīng)的丹參組2周、4周、6周各組比較,gdfmt高、低劑量組各組血清ha、ln、pc-Ⅲ、c-iv與丹參組各組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05,p0.01);gdfmt中劑量組各組與丹參組各組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。(4)與青霉胺組2周、4周、6周比較,gdfmt高、中劑量組各組較對應(yīng)的青霉胺組ha、ln、pc-Ⅲ、c-iv明顯降低(p0.05,p0.01)。(5)gdfmt高劑量組2周、4周、6周組與對應(yīng)的中、低劑量組各組之間兩兩比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05,p0.01)。(6)對應(yīng)的gdfmt2周高、中、低劑量組比較,4周各組血清ha、ln、pc-Ⅲ、c-iv均明顯降低(p0.05)。(7)與對應(yīng)的gdfmt4周高、中、低劑量各組比較,6周各組血清ha、ln、pc-Ⅲ、c-iv均顯著降低(p0.05)。2)血清ast、alt活力:(1)與對應(yīng)的正常組2周、4周、6周組比較,模型組tx小鼠血清alt、ast活力明顯升高(p0.01),提示wd模型tx小鼠存在明顯肝臟損害。(2)與對應(yīng)的模型組2周、4周、6周比較,gdfmt高、中、低劑量組、丹參組和青霉胺組各組alt、ast均下降(p0.05,p0.01)。(3)與對應(yīng)的丹參組2周、4周、6周比較,gdfmt高劑量組各組血清alt、ast活力均較對應(yīng)的丹參組明顯降低(p0.05);gdfmt中劑量組各組與對應(yīng)的丹參組各組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。(4)與對應(yīng)的青霉胺組2周、4周、6周比較,gdfmt高、中劑量組各組與青霉胺組各組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05,p0.01);gdfmt低劑量組各組與對應(yīng)的青霉胺組各組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。(5)gdfmt高劑量組2周、4周、6周組與對應(yīng)的中劑量組和低劑量組各組之間兩兩比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.01,p0.05)。(6)與對應(yīng)的gdfmt2周高、中、低劑量組比較,gdfmt4周各組血清alt、ast活力雖均有不同程度下降,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。(7)與對應(yīng)的gdfmt4周高、中、低劑量組比較,gdfmt6周各組血清alt、ast活力均明顯降低(p0.05)。3)血清tp、alb含量:(1)與對應(yīng)的正常組2周、4周、6周組比較,模型組tx小鼠血清tp、alb含量明顯降低(p0.01),提示wd模型tx小鼠肝臟合成蛋白能力下降,存在明顯肝臟損害現(xiàn)象。(2)與對應(yīng)的模型組2周、4周、6周比較,gdfmt高、中劑量組和丹參組各組tp、alb含量均明顯升高(p0.01),gdfmt低劑量組與青霉胺組2周的tp、alb含量雖有升高,但無統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。(3)與對應(yīng)的丹參組2周、4周、6周比較,gdfmt高劑量組各組血清tp、alb含量均較對應(yīng)的丹參組各組明顯升高(p0.01);gdfmt中劑量組各組與對應(yīng)的丹參組各組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。(4)與對應(yīng)的青霉胺組2周、4周、6周比較,gdfmt高劑量組、中劑量組2周、4周、6周較對應(yīng)的青霉胺組tp、alb含量均明顯增高(p0.01,p0.05)。(5)gdfmt高劑量組與中劑量組、低劑量組之間兩兩比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.01,p0.05)。(6)與對應(yīng)的gdfmt2周高、中、低劑量組比較,gdfmt4周各組血清tp、alb含量均顯著升高(p0.05)。(7)與對應(yīng)的gdfmt4周高、中、低劑量組比較,gdfmt6周各組血清tp、alb含量均顯著升高(p0.05)。4)tgf-β1、tβrⅠ、tβrⅡ、smad2、smad3、smad4、smad7蛋白表達:(1)與對應(yīng)的正常組2周、4周、6周比較,模型組各組的tgf-β1、tβrⅠ、tβrⅡ、smad2、smad3、smad4蛋白表達明顯升高,smad7蛋白表達明顯降低(p0.01),提示wd模型tx小鼠存在明顯肝纖維化。(2)與對應(yīng)的模型組2周、4周、6周比較,gdfmt高、中、低劑量組、丹參組和青霉胺組各組tgf-β1、tβrⅠ、tβrⅡ、smad2、smad3、smad4蛋白表達均減少,smad7蛋白表達則升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05,p0.01)。(3)丹參組2周、4周、6周與對應(yīng)的gdfmt高、低劑量組各組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.01);丹參組2周、4周、6周與對應(yīng)的gdfmt中劑量組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。(4)青霉胺組2周、4周、6周與對應(yīng)的gdfmt高、中劑量組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05,p0.01);青霉胺組2周、4周、6周與對應(yīng)的gdfmt低劑量組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。(5)gdfmt高劑量組2周、4周、6周與對應(yīng)的gdfmt中、低劑量組各組之間兩兩比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05,p0.01)。(6)與對應(yīng)的gdfmt2周高、中、低劑量組比較,tgf-β1、tβrⅠ、tβrⅡ、smad2、smad3、smad4在gdfmt4周各組蛋白表達均明顯降低,smad7蛋白表達則明顯升高(p0.05,p0.01)。(7)與對應(yīng)的gdfmt4周高、中、低劑量組比較,TGF-β1、TβRⅠ、TβRⅡ、Smad2、Smad3、Smad4在GDFMT 6周各組蛋白表達均明顯降低,Smad7蛋白表達則明顯升高(P0.05,P0.01)。結(jié)論:(1)GDFMT能夠有效地改善WD肝纖維化患者的臨床癥狀和體征,改善肝功能(ALT、AST、TP、ALB),增加24h尿銅的排泄。(2)GDFMT能夠有效地降低WD肝纖維化患者血清肝纖維化四項指標(biāo)(HA、LN、PC-III、C-IV),從而發(fā)揮抗纖維化的作用。(3)GDFMT能夠有效地改善WD模型TX小鼠的肝功能;且能降低TX小鼠肝纖維化血清學(xué)指標(biāo)(HA、LN、PC-III、C-IV),說明GDFMT具有良好的抗肝纖維化的作用;且呈量效-時效依賴性。(4)GDFMT能夠調(diào)控TGF-β1及Smads蛋白表達,從而抑制TGF-β1/Smad信號傳導(dǎo)的激活,阻止了肝纖維化的發(fā)生與發(fā)展,且對TGF-β1/Smad信號傳導(dǎo)的調(diào)控呈量效-時效依賴性。
【關(guān)鍵詞】：肝豆扶木湯 肝豆?fàn)詈俗冃?/strong> 肝纖維化 TX小鼠 Western blot TGF-β1/Smad信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路
【學(xué)位授予單位】：安徽中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R575.2;R742.4
【目錄】：
- 中文摘要5-10
- 英文摘要10-18
- 英文縮略詞18-19
- 前言19-22
- 第一部分 肝豆扶木湯對Wilson病肝纖維化臨床療效觀察22-44
- 1 資料和方法22-23
- 2 治療方案23-24
- 3 指標(biāo)觀測24-25
- 4 結(jié)果25-33
- 5 討論33-44
- 第二部分 肝豆扶木湯對TX小鼠肝纖維化的Western blot研究44-79
- 1 實驗材料44-47
- 2 實驗方法47-49
- 3 實驗結(jié)果49-73
- 4 討論73-79
- 結(jié)論79-80
- 參考文獻80-88
- 綜述88-101
- 參考文獻96-101
- 附表101-104
- 個人簡介104-105
- 致謝105
【相似文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 鄒圣強,齊宗利;91例非老年慢性乙型肝炎肝纖維化的診斷[J];中國基層醫(yī)藥;2001年04期
2 曾民德;肝纖維化的診斷和治療[J];肝臟;2001年S1期
3 田養(yǎng)年,鄧淑玲,張武智;中西醫(yī)結(jié)合治療肝纖維化的新進展[J];中國中醫(yī)藥信息雜志;2001年S1期
4 曾民德;肝纖維化的治療及其療效評估[J];中國中西醫(yī)結(jié)合雜志;2002年05期
5 謝彥華,劉春榮;基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑與肝纖維化[J];臨床薈萃;2002年08期
6 李清華,戰(zhàn)淑慧,卞魯巖,秦成勇,勞萍;轉(zhuǎn)化生長因子-β_1和纖溶酶原激活物抑制物-1在肝纖維化中的作用及關(guān)系[J];中華消化雜志;2004年02期
7 王吉耀;重視肝纖維化的基礎(chǔ)與臨床研究[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2005年15期
8 陸倫根,曾民德;肝纖維化的診斷和評估[J];中華肝臟病雜志;2005年08期
9 時昭紅,鄧長生;肝纖維化的防治研究進展[J];國外醫(yī)學(xué)(內(nèi)科學(xué)分冊);2005年03期
10 劉克洲;侯偉;;肝纖維化的治療策略[J];中國中西醫(yī)結(jié)合雜志;2006年01期
中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 劉勇鋼;盧建華;;瘦素與肝纖維化關(guān)系及研究方法探討[A];中華醫(yī)學(xué)會病理學(xué)分會2009年學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2009年
2 袁鳳儀;;淺議中西醫(yī)防治肝纖維化的研究[A];貴州省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會2010年消化系病學(xué)術(shù)交流會暨非酒精性脂肪肝研究進展學(xué)習(xí)班資料匯編[C];2010年
3 杜緒勝;;肝纖維化的中西醫(yī)結(jié)合研究現(xiàn)狀[A];中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會第十六次全國消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2004年
4 趙新顏;王寶恩;賈繼東;;先天性肝纖維化的臨床病理特點[A];中華醫(yī)學(xué)會第十二次全國病毒性肝炎及肝病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2005年
5 李驥;董培紅;金益輝;盧明芹;潘發(fā)奮;王幫松;陳永平;;維生素D受體基因多態(tài)性與肝纖維化關(guān)系初步研究[A];第九次浙江省中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年
6 張磊;李俊;黃成;呂雄文;金涌;朱鵬禮;;肝纖維化逆轉(zhuǎn)的機制研究[A];第十屆全國生化與分子藥理學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2007年
7 徐葉進;;胰島素樣生長因子-1在大鼠肝纖維化組織中的表達及意義[A];2012年浙江省醫(yī)學(xué)會肝病、感染病學(xué)學(xué)術(shù)年會暨浙江省感染科醫(yī)師學(xué)術(shù)年會論文集[C];2012年
8 賈繼東;;肝纖維化的發(fā)生機理及治療進展[A];第6屆全國疑難及重癥肝病大會論文集[C];2011年
9 楊從意;陳英杰;程晶;李群;周大橋;;淺談肝纖維化的臨床研究進展[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會第十三屆內(nèi)科肝膽病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2008年
10 郭宇;曾華強;羅時兵;何麗珍;;中西醫(yī)結(jié)合診療肝纖維化的幾點思考[A];第十八次全國中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年
中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 張昀;肝纖維化可以治療[N];健康報;2005年
2 陳斌;肝纖維化可以逆轉(zhuǎn)嗎？[N];大眾衛(wèi)生報;2007年
3 范又;肝病專家指出治療肝纖維化中醫(yī)藥療效世界領(lǐng)先[N];光明日報;2007年
4 陳黎明;肝纖維化[N];家庭醫(yī)生報;2006年
5 通訊員 陳麗霞邋王懷民 記者 趙鳳華;黃連素可能治肝纖維化[N];科技日報;2008年
6 蔣明邋通訊員 陳麗霞 王懷民;黃連素治療肝纖維化有效果[N];健康報;2008年
7 健康時報記者 劉橋斌;測肝纖維化免穿刺[N];健康時報;2009年
8 解放軍302醫(yī)院肝纖維化無創(chuàng)診療中心 陳國鳳 黃顯斌 整理;肝纖維化檢查進入無創(chuàng)時代[N];健康報;2009年
9 第二軍醫(yī)大學(xué)長征醫(yī)院教授 謝渭芬 整理 王根華;阻斷肝纖維化發(fā)展的鏈條[N];健康報;2010年
10 黃丁毅;福瑞股份：肝纖維化�？泼鎸Α白龃蟆泵}[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2010年
中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 李俊峰;單采血漿所致慢性HCV感染20年自然史及其鞘脂組學(xué)研究[D];蘭州大學(xué);2015年
2 杜靜華;微小RNAs差異表達對非酒精性脂肪性肝炎相關(guān)肝纖維化的影響及分子調(diào)控機制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2016年
3 李紅;探討海珠益肝方從痰論治肝纖維化的作用及機制研究[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2016年
4 涂曉龍;miR-30和lincRNA-p21調(diào)控肝纖維化的作用機制研究[D];南京大學(xué);2016年
5 朱穎煒;轉(zhuǎn)染TIMP-1-shRNA基因的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療大鼠肝纖維化[D];蘇州大學(xué);2016年
6 李楊;磁共振T_2~* mapping成像及分子成像評價大鼠肝纖維化的實驗研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年
7 莊燦皇;基于近二十年文獻中醫(yī)藥治療肝纖維化的方藥規(guī)律研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2016年
8 吳鵬;姜黃素對肝纖維化的保護作用及表觀遺傳學(xué)機制[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2016年
9 石磊;表皮形態(tài)發(fā)生素在HIV與HCV共感染肝纖維化中的作用及機制[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2016年
10 陳利軍;經(jīng)血干細(xì)胞治療肝纖維化及其作用機制[D];浙江大學(xué);2016年
中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 張麗君;水飛薊素聯(lián)合吡喹酮治療小鼠血吸蟲病肝纖維化的實驗研究[D];湖北科技學(xué)院;2015年
2 張美;肝纖維化無創(chuàng)模型對聚乙二醇干擾素α治療HBeAg陽性慢性乙型肝炎療效的預(yù)測價值[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年
3 樓印fE;慢性乙型肝炎肝纖維化無創(chuàng)模型比較研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年
4 高永振;基于超聲射頻時間序列的早期肝纖維化檢測及程度識別研究[D];華南理工大學(xué);2015年
5 李旭;γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（γ-GT）與乙肝表面抗原定量比值對慢性乙型肝炎病毒感染患者纖維化的評價[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年
6 陳小霞;EZH2在肝纖維化中的作用及其部分機制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年
7 謝力駿;2型糖尿病對NAFLD患者肝纖維化進展相關(guān)性研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2015年
8 曾祥華;慢性乙型肝炎肝纖維化的無創(chuàng)診斷與機制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年
9 馮文強;SIRT1在小鼠肝纖維化中的作用及其相關(guān)分子的組學(xué)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年
10 張靜雯;間充質(zhì)干細(xì)胞通過調(diào)控枯否細(xì)胞M1型和M2型改善肝纖維化的實驗研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年
，本文編號：694927
本文鏈接：http://sikaile.net/yixuelunwen/xiaohjib/694927.html
