本文關(guān)鍵詞：中央杏仁核對(duì)胃運(yùn)動(dòng)的調(diào)控作用及其在束縛—浸水應(yīng)激反應(yīng)中的活動(dòng)特征

  更多相關(guān)文章： 束縛-浸水應(yīng)激 中央杏仁核 胃運(yùn)動(dòng) 迷走復(fù)合體 胃粘膜損傷 c-Fos表達(dá) 神經(jīng)元放電

【摘要】：“束縛-浸水”是一種特殊的生理-心理復(fù)合應(yīng)激處理方式。通過(guò)將大鼠束縛固定,并浸入冷水中,動(dòng)物在制動(dòng)和低溫2種外部應(yīng)激因素的綜合干預(yù)下,能在極短的時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生迷走神經(jīng)介導(dǎo)的胃運(yùn)動(dòng)亢進(jìn)、胃酸分泌增多以及胃粘膜損傷和潰瘍形成等胃的機(jī)能障礙和病理現(xiàn)象。研究表明,延髓胃腸初級(jí)中樞——迷走復(fù)合體(dorsal vagal complex,DVC)神經(jīng)元的活動(dòng)亢進(jìn)以及迷走神經(jīng)的介導(dǎo),是束縛-浸水應(yīng)激(restraint water-immersion stress,RWIS)引起的應(yīng)激性胃機(jī)能亢進(jìn)及胃粘膜損傷的重要機(jī)制。研究還表明,邊緣前腦的廣泛區(qū)域在應(yīng)激中的神經(jīng)元c-Fos表達(dá)增強(qiáng),但這些腦區(qū)在RWIS誘導(dǎo)的應(yīng)激反應(yīng)中扮演的角色尚未完全明了。中央杏仁核(central nucleus of amygdala,CEA)作為邊緣應(yīng)激環(huán)路的重要結(jié)構(gòu),在多種應(yīng)激反應(yīng)中表現(xiàn)出核團(tuán)神經(jīng)元活動(dòng)的增強(qiáng),并顯著影響下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)(hypothalamic-pituitary-adrenocortical,HPA)軸的活動(dòng)。在發(fā)揮適應(yīng)性的調(diào)控作用同時(shí),CEA興奮也可能是某些應(yīng)激性功能障礙或疾病的發(fā)生機(jī)制。既往研究表明不同應(yīng)激對(duì)動(dòng)物CEA的興奮誘導(dǎo)具有特異性。但是,就誘導(dǎo)出特殊胃病理?yè)p傷的復(fù)合應(yīng)激方式——RWIS而言,應(yīng)激引起的CEA神經(jīng)元活動(dòng)的特征如何?與其他應(yīng)激反應(yīng)有何不同?在RWIS所致的應(yīng)激性胃機(jī)能障礙中扮演何種角色?這些或鮮見(jiàn)報(bào)道,或仍無(wú)定論。另外,CEA和胃腸機(jī)能的初級(jí)調(diào)控中樞——DVC間存在密切纖維聯(lián)系,因此對(duì)胃的運(yùn)動(dòng)和分泌等機(jī)能具有調(diào)控效應(yīng)。關(guān)于電刺激CEA對(duì)胃運(yùn)動(dòng)的調(diào)控效應(yīng)的研究,不同時(shí)期的報(bào)道結(jié)論并不一致:早期報(bào)道為興奮效應(yīng),后期有報(bào)道稱(chēng)以抑制效應(yīng)為主。應(yīng)激狀態(tài)下的胃運(yùn)動(dòng)異�？赡苁菍�(dǎo)致各種胃腸疾病的重要外周原因——比如胃運(yùn)動(dòng)亢進(jìn)被認(rèn)為是動(dòng)物應(yīng)激性胃潰瘍產(chǎn)生的最主要因素,而胃運(yùn)動(dòng)抑制引起胃的排空延遲,臨床見(jiàn)于功能性消化不良和腸易激綜合癥。因此,明確CEA對(duì)胃運(yùn)動(dòng)的調(diào)控效應(yīng)是確定其在應(yīng)激性胃機(jī)能障礙中角色性質(zhì)的重要前提之一�；谏鲜龃嬖诘膯�(wèn)題,我們進(jìn)行了以下2個(gè)方面的實(shí)驗(yàn)研究。首先,鑒于cea內(nèi)部結(jié)構(gòu)的異質(zhì)性,我們?cè)趨^(qū)分cea內(nèi)、外側(cè)亞核的基礎(chǔ)上重新評(píng)價(jià)了cea的胃運(yùn)動(dòng)調(diào)控效應(yīng)。主要通過(guò)電生理實(shí)驗(yàn)技術(shù),我們比較了電刺激內(nèi)、外側(cè)cea對(duì)胃運(yùn)動(dòng)以及dvc神經(jīng)元放電的影響效應(yīng)。結(jié)果表明,電刺激內(nèi)側(cè)cea(medialsubdivisionofcea,mcea)引起胃運(yùn)動(dòng)的興奮,而電刺激外側(cè)cea(lateralsubdivisionofcea,lcea)引起胃運(yùn)動(dòng)的抑制;電刺激mcea抑制孤束核內(nèi)側(cè)亞核(medialsubdivisionofnucleustractussolitarious,mnts)的神經(jīng)元放電、興奮迷走背核(dorsalmotornucleusofvagus,dmv)的神經(jīng)元放電,而電刺激lcea對(duì)mnts和dmv的神經(jīng)元放電的影響效應(yīng)相反。mcea和lcea對(duì)胃運(yùn)動(dòng)以及dvc神經(jīng)元的相反效應(yīng)可以用cea內(nèi)部的gaba能抑制環(huán)路來(lái)解釋,但直接證據(jù)還有待進(jìn)一步通過(guò)實(shí)驗(yàn)獲得。其次,基于上述發(fā)現(xiàn)的內(nèi)、外側(cè)cea對(duì)胃運(yùn)動(dòng)的不同調(diào)控效應(yīng),考慮到電刺激興奮神經(jīng)核團(tuán)和應(yīng)激過(guò)程中神經(jīng)核的實(shí)際活動(dòng)之間的不同,我們觀(guān)察了cea神經(jīng)元在rwis中的具體活動(dòng)特征,具體包括2個(gè)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:在第一個(gè)實(shí)驗(yàn)中,大鼠被隨機(jī)分為非應(yīng)激組,束縛應(yīng)激(restraintstress,rs)組和rwis組,主要利用免疫組化技術(shù)和記錄神經(jīng)元放電技術(shù),比較了大鼠內(nèi)、外側(cè)cea神經(jīng)元的c-fos表達(dá)、神經(jīng)元放電頻率和放電間隔的變異系數(shù)(coefficientofvariation,cv)等。結(jié)果表明,只有rwis引起胃粘膜損傷;rwis引起cea的神經(jīng)元活動(dòng)增強(qiáng);rwis引起的cea神經(jīng)元活動(dòng)特征不同于單純r(jià)s,具體包括:1)兩種應(yīng)激均誘導(dǎo)lcea的神經(jīng)元活動(dòng)顯著增強(qiáng),但rwis大鼠lcea神經(jīng)元的c-fos表達(dá)顯著強(qiáng)于rs;2)mcea神經(jīng)元的活動(dòng)增強(qiáng)僅見(jiàn)于rwis大鼠;3)rwis大鼠cea神經(jīng)元放電規(guī)律性增強(qiáng),表現(xiàn)為cv顯著低于非應(yīng)激和rs大鼠。在第二個(gè)實(shí)驗(yàn)中,大鼠被隨機(jī)分為非應(yīng)激組,rwis1h組、rwis3h組,rs1h組,rs3h組,利用免疫組化雙標(biāo)技術(shù),我們觀(guān)察了cea中促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(corticotrophin-releasinghormone,crh)能神經(jīng)元在rwis中的c-fos表達(dá)特征,并用放免法測(cè)定了反映hpa軸活動(dòng)的促腎上腺皮質(zhì)激素(adrenocorticotrophichormone,acth)和皮質(zhì)酮(corticosterone,cort)的血漿濃度。結(jié)果表明,復(fù)合了束縛和寒冷2種因素的rwis,cea中crh神經(jīng)元的c-fos表達(dá)顯著增強(qiáng),且在不同時(shí)間段均超過(guò)單純束縛的相關(guān)應(yīng)激反應(yīng),類(lèi)似報(bào)道此前未見(jiàn)。該結(jié)果反映了復(fù)合應(yīng)激的誘導(dǎo)效應(yīng)并非每種應(yīng)激效應(yīng)的簡(jiǎn)單疊加(據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,單獨(dú)寒冷應(yīng)激抑制crh神經(jīng)元活動(dòng))。上述cea中crh神經(jīng)元的活動(dòng)在rwis中隨應(yīng)激時(shí)間延長(zhǎng)而增強(qiáng),而在rs中隨應(yīng)激時(shí)間延長(zhǎng)而減弱。我們的實(shí)驗(yàn)還表明,兩種應(yīng)激均誘導(dǎo)了大鼠HPA軸活動(dòng)的增強(qiáng),應(yīng)激相同時(shí)間段的血漿ACTH和CORT濃度的比較結(jié)果表明,RWIS大鼠的HPA軸活動(dòng)顯著強(qiáng)于RS大鼠。而且,當(dāng)應(yīng)激從1h持續(xù)到3h時(shí),RWIS大鼠的HPA軸活動(dòng)呈顯著增強(qiáng)趨勢(shì),表現(xiàn)為ACTH和CORT的血漿濃度繼續(xù)顯著升高;而同時(shí)RS大鼠的HPA活動(dòng)卻呈現(xiàn)顯著減弱的趨勢(shì)。RWIS中,CEA的CRH神經(jīng)元和HPA軸的活動(dòng)之間呈現(xiàn)出明顯的互相促進(jìn)的效應(yīng)。上述有關(guān)RWIS誘導(dǎo)的CEA神經(jīng)元的活動(dòng)特征的描述,為闡明CEA介導(dǎo)RWIS應(yīng)激反應(yīng)的中樞機(jī)制提供了必要的資料。綜上所述,我們研究發(fā)現(xiàn),電刺激內(nèi)、外側(cè)CEA對(duì)胃運(yùn)動(dòng)分別具有興奮和抑制的相反調(diào)控效應(yīng);RWIS過(guò)程中,大鼠表現(xiàn)出CEA內(nèi)、外側(cè)亞核神經(jīng)元活動(dòng)增強(qiáng)(lCEA的活動(dòng)強(qiáng)于m CEA)、CEA中CRH神經(jīng)元活動(dòng)的增強(qiáng)以及HPA軸活動(dòng)的增強(qiáng)等特點(diǎn),且和單純RS的應(yīng)激效應(yīng)存在顯著不同。綜合這些效應(yīng)及相關(guān)研究結(jié)論來(lái)分析,其中m CEA神經(jīng)元活動(dòng)增強(qiáng),可能引起胃運(yùn)動(dòng)興奮,對(duì)應(yīng)激過(guò)程中的胃粘膜是具有“損傷”意義的;而l CEA神經(jīng)元的興奮、CRH神經(jīng)元的興奮以及HPA軸的活動(dòng)增強(qiáng)等,對(duì)于應(yīng)激過(guò)程中的胃粘膜均是(或非常可能是)具有“保護(hù)”意義的。相關(guān)實(shí)驗(yàn)結(jié)果反映出CEA在應(yīng)激調(diào)控中所扮演角色的復(fù)雜性。因此,雖然CEA神經(jīng)元活動(dòng)增強(qiáng)和應(yīng)激性胃潰瘍同時(shí)發(fā)生在RWIS大鼠,但輕言二者之間存在“因果”關(guān)系顯然為時(shí)過(guò)早。CEA在應(yīng)激性胃粘膜損傷中的作用以及RWIS致胃粘膜損傷的中樞機(jī)制均有待進(jìn)一步研究。
【關(guān)鍵詞】：束縛-浸水應(yīng)激 中央杏仁核 胃運(yùn)動(dòng) 迷走復(fù)合體 胃粘膜損傷 c-Fos表達(dá) 神經(jīng)元放電
【學(xué)位授予單位】：山東師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R57
【目錄】：

• 中文摘要7-10
• Abstract10-14
• 英文縮略詞表14-18
• 文獻(xiàn)綜述 杏仁核與應(yīng)激性胃腸疾病18-50
• 1 杏仁核的研究進(jìn)展18-29
• 1.1 “杏仁核”的組成和相關(guān)命名18-19
• 1.2 杏仁核內(nèi)外纖維聯(lián)系19-25
• 1.2.1 杏仁核內(nèi)部纖維聯(lián)系20-21
• 1.2.2 杏仁核的傳入纖維聯(lián)系21-23
• 1.2.3 杏仁核的傳出纖維聯(lián)系23-25
• 1.3 杏仁核相關(guān)遞質(zhì)/調(diào)制和受體25-29
• 1.3.1 γ氨基丁酸和谷氨酸25-26
• 1.3.2 精氨酸加壓素（arginine-vasopressin，AVP）和催產(chǎn)素（oxytocin，OXT）及其受體26-27
• 1.3.3 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素（corticotrophin releasing hormone, CRH）及其受體27-28
• 1.3.4 神經(jīng)肽 Y（neuropeptide Y, NPY）及其受體28
• 1.3.5 膽囊收縮素 k（cholecystokinin, CCK）及其受體28
• 1.3.6 多巴胺28
• 1.3.7 其他28-29
• 2 杏仁核和應(yīng)激性胃腸疾病29-38
• 2.1 應(yīng)激引起胃腸機(jī)能障礙29-30
• 2.2 杏仁核與應(yīng)激性胃潰瘍30-34
• 2.2.1 杏仁核不同部位在胃潰瘍形成中扮演不同角色30-31
• 2.2.2 中央杏仁核(CEA)中不同遞質(zhì)與胃潰瘍31-33
• 2.2.3 胃潰瘍形成中CEA角色研究的思考33-34
• 2.3 杏仁核對(duì)腸易激綜合征(IBS)的影響34-38
• 2.3.1 IBS的“序曲”：應(yīng)激和焦慮34-35
• 2.3.2 杏仁核過(guò)度活動(dòng)可能是引起焦慮和IBS的重要中樞機(jī)制35-36
• 2.3.3 杏仁核調(diào)控胃腸活動(dòng)和內(nèi)臟感覺(jué)的神經(jīng)解剖基礎(chǔ)36
• 2.3.4 杏仁核活動(dòng)引起IBS癥候群的相關(guān)神經(jīng)-內(nèi)分泌機(jī)制研究36-38
• 參考文獻(xiàn)38-50
• 實(shí)驗(yàn)研究50-114
• 實(shí)驗(yàn)一 CEA不同亞核對(duì)胃運(yùn)動(dòng)和延髓迷走復(fù)合體神經(jīng)元的調(diào)控效應(yīng)50-69
• 1 引言50-51
• 2 材料和方法51-60
• 2.1 材料準(zhǔn)備51-54
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物51
• 2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器及其來(lái)源51-52
• 2.1.3 主要試劑及配制方法52-53
• 2.1.4 放電記錄電極(玻璃微電極)的制備53
• 2.1.5 刺激電極的制備53-54
• 2.1.6 胃內(nèi)置水囊裝置的制備54
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法54-60
• 2.2.1 安放胃運(yùn)動(dòng)記錄裝置55
• 2.2.2 腦立體定位準(zhǔn)備55
• 2.2.3 大鼠CEA的電刺激方案55-56
• 2.2.4 大鼠DVC神經(jīng)元放電記錄56-57
• 2.2.5 組織學(xué)鑒定57-59
• 2.2.6 數(shù)據(jù)分析59-60
• 3 結(jié)果60-63
• 3.1 電刺激mCEA、1CEA對(duì)胃運(yùn)動(dòng)的影響60-61
• 3.2 電刺激mCEA和1CEA對(duì)DMV放電的影響61-62
• 3.3 電刺激mCEA和1CEA對(duì)mNTS放電的影響62-63
• 4 討論63-65
• 4.1 mCEA和1CEA的相反調(diào)控效應(yīng)63
• 4.2 CEA通過(guò)DVC介導(dǎo)調(diào)控胃運(yùn)動(dòng)63-65
• 參考文獻(xiàn)65-69
• 實(shí)驗(yàn)二 CEA神經(jīng)元在大鼠束縛-浸水應(yīng)激(RWIS)中的活動(dòng)特征69-95
• 1 引言69-70
• 2 材料和方法70-78
• 2.1 材料準(zhǔn)備70-75
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物70
• 2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器及其來(lái)源70-71
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑及配制方法71-75
• 2.1.4 放電記錄電極(玻璃微電極)的制備75
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法75-78
• 2.2.1 分組及模型制備75
• 2.2.2 CEA神經(jīng)元放電記錄及組織學(xué)鑒定75-76
• 2.2.3 胃組織取材及腦切片的制備76
• 2.2.4 腦組織c-Fos表達(dá)的免疫組織化學(xué)染色76-77
• 2.2.5 胃粘膜損傷的評(píng)估77-78
• 2.2.6 數(shù)據(jù)分析78
• 3 結(jié)果78-89
• 3.1 RWIS引起的胃粘膜損傷78-80
• 3.2 DVC神經(jīng)元的Fos表達(dá)80-82
• 3.3 CEA神經(jīng)元的Fos表達(dá)82-85
• 3.4 內(nèi)外側(cè)CEA神經(jīng)元的放電85-89
• 4 討論89-91
• 參考文獻(xiàn)91-95
• 實(shí)驗(yàn)三 中央杏仁核CRH神經(jīng)元及HPA軸在大鼠RWIS中的活動(dòng)特征95-113
• 1 引言95-96
• 2 材料和方法96-100
• 2.1 材料準(zhǔn)備96-98
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物96
• 2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器及其來(lái)源96-97
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑及配制方法97-98
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法98-100
• 2.2.1 分組及模型制備98
• 2.2.2 免疫組化雙標(biāo)實(shí)驗(yàn)98-99
• 2.2.3 血ACTH和CORT水平測(cè)定99-100
• 2.2.4 胃粘膜損傷的評(píng)估100
• 2.2.5 數(shù)據(jù)分析100
• 3 結(jié)果100-107
• 3.1 RWIS引起的胃粘膜損傷100-101
• 3.2 CEA中CRH神經(jīng)元的Fos表達(dá)101-105
• 3.3 ACTH和CORT的測(cè)量結(jié)果105-107
• 4 討論107-109
• 4.1 CEA的CRH神經(jīng)元在RWIS中的活動(dòng)107
• 4.2 RWIS引起的HPA軸反應(yīng)107-108
• 4.3 HPA軸,CRH和應(yīng)激性胃潰瘍108-109
• 參考文獻(xiàn)109-113
• 實(shí)驗(yàn)小結(jié)113-114
• 展望114-115
• 攻讀學(xué)位期間完成的工作115-116
• 致謝116

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4 常蘭蘭;艾洪濱;;向大鼠迷走背核微量注射加壓素對(duì)胃運(yùn)動(dòng)和胃酸分泌的影響[A];中國(guó)生理學(xué)會(huì)第23屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨生理學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要文集[C];2010年

5 莫?jiǎng)χ?王承黨;;胃腸激素對(duì)胃運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)消化病學(xué)分會(huì)——2005年全國(guó)胃腸激素學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2005年

6 王述菊;孫國(guó)杰;吳緒平;胡和平;杜艷軍;孔立紅;;孤束核在針刺“內(nèi)關(guān)”調(diào)節(jié)胃運(yùn)動(dòng)中的作用研究[A];中國(guó)針灸學(xué)會(huì)2009學(xué)術(shù)年會(huì)論文集（上集）[C];2009年

7 王景杰;黃裕新;王鍵;邱建勇;;c-fos在電針調(diào)控胃運(yùn)動(dòng)中的表達(dá)及其意義[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)2001年全國(guó)胃電圖和胃腸動(dòng)力研討會(huì)論文摘要集[C];2001年

8 王進(jìn)海;羅金燕;郭曉燕;;環(huán)境低頻噪音對(duì)大鼠胃運(yùn)動(dòng)功能的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)消化病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（上冊(cè)）[C];2007年

9 劉曉真;許蓬娟;孫�；�;艾洪濱;;損毀大鼠下丘腦腹內(nèi)側(cè)核對(duì)束縛-浸水應(yīng)激狀態(tài)下丘腦Fos表達(dá)及胃運(yùn)動(dòng)的影響[A];中國(guó)生理學(xué)會(huì)第23屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨生理學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要文集[C];2010年

10 周呂;袁勃;王禮建;張春s，

本文編號(hào)：689624