1.慢性腦缺血后腦組織AQP9的表達(dá)變化及其機(jī)制研究 2.AQP9在糖尿病肝臟中的表達(dá)變化及其機(jī)制研究
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【摘要】:第一部分慢性腦缺血后腦組織AQP9的表達(dá)變化及其機(jī)制研究目的觀察慢性腦缺血后腦組織中AQP9和MAPK信號通路相關(guān)分子的表達(dá)變化,探討AQP9在慢性腦缺血后的作用及其相關(guān)調(diào)控機(jī)制。方法成年健康雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠80只,隨機(jī)分為對照組和慢性腦缺血1、3和6月組,每組各20只。雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎法(2-vo法)建立大鼠慢性腦缺血模型,Morris水迷宮和高架十字迷宮(elevated plus maze,EPM)檢測大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力和焦慮情緒的變化,HE染色觀察腦組織形態(tài)學(xué)的改變,干濕重法檢測腦含水量,LD試劑盒檢測腦組織乳酸含量,免疫熒光(Immunofluorence)檢測AQP9的表達(dá)分布變化,免疫印跡(Western Blotting)測定AQP9,JNK、ERK和p38的表達(dá)變化。結(jié)果行為學(xué)結(jié)果顯示,慢性腦缺血后大鼠在水迷宮實(shí)驗(yàn)中逃避潛伏期和游泳路徑長于對照組(P0.05),高架十字實(shí)驗(yàn)中開臂和閉臂的次數(shù)(P0.05)、開閉次數(shù)百分比(P0.05)和開臂時間百分比(P0.05)均增加;HE染色發(fā)現(xiàn)慢性腦缺血組腦組織部分細(xì)胞核固縮,細(xì)胞凋亡壞死;與對照組相比較,慢性腦缺血組腦含水量無顯著變化;慢性腦缺血各組腦組織的乳酸含量均較對照組升高(P0.05);免疫熒光和免疫印跡結(jié)果顯示,慢性腦缺血后AQP9表達(dá)上調(diào),且隨腦缺血時間的延長而進(jìn)一步增加;免疫印跡結(jié)果顯示,慢性腦缺血后腦組織p-JNK/JNK和p-p38/p38的表達(dá)上調(diào)(P0.05),p-ERK/ERK的表達(dá)無明顯差異。結(jié)論慢性腦缺血后,大鼠的學(xué)習(xí)記憶功能減退;AQP9的表達(dá)上調(diào)可能與水的轉(zhuǎn)運(yùn)并不直接相關(guān),其表達(dá)上調(diào)可能僅與其它物質(zhì)如乳酸的轉(zhuǎn)運(yùn)有關(guān);JNK-MAPK和p38-MAPK通路可能協(xié)同調(diào)控慢性腦缺血后AQP9的表達(dá)。第二部分AQP9在糖尿病肝臟中的表達(dá)變化及其機(jī)制研究目的檢測水通道蛋白9(AQP9)和MAPK信號通路(ERK、JNK和p38)在1型和2型糖尿病(DM)鼠肝臟中的表達(dá)變化,探討AQP9在糖尿病鼠肝臟中的作用及其可能調(diào)控機(jī)制。方法健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,小劑量一次腹腔注射鏈脲霉素(STZ)建立1型糖尿病模型;db/db鼠為2型糖尿病模型。HE染色觀察糖尿病鼠肝臟的形態(tài)學(xué)改變;免疫熒光染色檢測AQP9在1型和2型糖尿病鼠肝臟的表達(dá)分布變化;免疫印跡測定AQP9和MAPK信號通路(ERK、JNK和p38)在1型和2型糖尿病鼠肝臟中的表達(dá)變化。結(jié)果HE染色結(jié)果顯示,對照組肝臟組織結(jié)構(gòu)正常,1型和2型糖尿病鼠部分肝細(xì)胞出現(xiàn)水腫和壞死;免疫熒光染色結(jié)果顯示,糖尿病組和對照組中,均可見AQP9在肝細(xì)胞胞漿面的近肝血竇側(cè)大量表達(dá),1型和2型糖尿病組肝臟AQP9的表達(dá)均較其對照組上調(diào)(P0.05);免疫印跡結(jié)果顯示,與對照組相比,1型和2型糖尿病組肝臟AQP9的表達(dá)上調(diào),p-ERK/ERK的表達(dá)無顯著差異,p-JNK/JNK的表達(dá)上調(diào)(P0.05),而p-p38/p38的表達(dá)下調(diào)(P0.05)。結(jié)論在1型和2型糖尿病鼠肝臟中,AQP9均表達(dá)上調(diào);JNK-MAPK和p38-MAPK可能協(xié)同調(diào)控高糖環(huán)境下AQP9的表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】:水通道蛋白9 慢性腦缺血 MAPK 糖尿病 水通道蛋白9 MAPK
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R587.2;R575
【目錄】:
- 英漢縮略語名詞對照4-5
- 中文摘要5-9
- 英文摘要9-13
- 第一部分 慢性腦缺血后腦組織AQP9的表達(dá)變化及其機(jī)制研究13-33
- 前言13
- 1 材料13-18
- 2 方法18-23
- 3 結(jié)果23-24
- 4 討論24-26
- 參考文獻(xiàn)26-29
- 附圖29-33
- 第二部分AQP9在糖尿病肝臟中的表達(dá)變化及其機(jī)制研究33-44
- 前言33
- 1 材料33-35
- 2 實(shí)驗(yàn)方法35-37
- 3 結(jié)果37
- 4 討論37-39
- 參考文獻(xiàn)39-41
- 附圖41-44
- 文獻(xiàn)綜述44-50
- 參考文獻(xiàn)48-50
- 致謝50-51
- 攻讀碩士期間發(fā)表的論文51
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,本文編號:682399
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