本文關鍵詞：KLF4基因沉默大鼠肝星狀細胞中Smad 2、3、7 mRNA及蛋白表達觀察

  更多相關文章： Kruppel樣因子基因 人肝星狀細胞 轉化生長因子β Smad 基因沉默 肝纖維化

【摘要】：目的觀察Kruppel樣因子4(KLF4)基因沉默對大鼠肝星狀細胞HSC-T6中Smad 2、3、7 mRNA及蛋白表達的影響。方法設計并構建針對大鼠KLF4基因的3個干擾質粒(p GPU6-1、p GPU6-2、p GPU6-3),將質粒轉染HSC-T6細胞,檢測KLF4 mRNA及蛋白,篩選出沉默效果最好的重組質粒用于后續(xù)實驗。將HSC-T6細胞分為A、B、C、D組,A組常規(guī)培養(yǎng)細胞;B組在培養(yǎng)液中加入TGF-β_1 50 ng/m L;C組轉染重組質粒p GPU6-3;D組轉染干擾質粒p GPU6-3 24 h后,再加入TGF-β_1 50 ng/m L。采用real-time PCR法檢測各組細胞中的Smad2、Smad3、Smad7mRNA。采用Western blotting法檢測各組細胞中的Smad2、Smad3、Smad7蛋白和磷酸化Smad2、3(p-Smad2、3)蛋白。結果 B、D組細胞中Smad2、Smad3、Smad7 mRNA相對表達量高于A組,C組細胞中Smad7 mRNA相對表達量高于A組(P均0.05)。C組、D組細胞中p-Smad2、p-Smad3蛋白相對表達量低于A組,Smad7蛋白相對表達量高于A組(P均0.05)。B組細胞中Smad2、p-Smad2、Smad3、p-Smad3、Smad7蛋白相對表達量均高于A組(P均0.05)。結論 KLF4基因沉默后,HSC-T6細胞(包括被TGF-β_1激活的HSC-T6)中p-Smad2、p-Smad3蛋白表達下調,Smad7 mRNA及蛋白表達上調;抑制KLF4基因表達可能有抗纖維化作用,作用機制與抑制TGF-β_1/Smad信號通路激活有關。
【作者單位】： 河北醫(yī)科大學公共衛(wèi)生學院;石家莊市第三醫(yī)院;
【關鍵詞】： Kruppel樣因子基因 人肝星狀細胞 轉化生長因子β Smad 基因沉默 肝纖維化
【基金】：河北省衛(wèi)生和計劃生育委員會醫(yī)學科學研究重點課題計劃項目(20150627)
【分類號】：R575.2
【正文快照】： 肝損傷到肝纖維化至肝癌的病變過程中,肝纖維化是關鍵的中間環(huán)節(jié),許多細胞因子和信號通路在其中發(fā)揮重要調節(jié)作用[1,2]。轉化生長因子β1(TGF-β1)已被廣泛證明是加速肝纖維化的一個重要因子[3]。TGF-β1主要通過TGF-β1/Smad信號通路激活肝星狀細胞(HSCs),增加細胞外基質(ECM

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 崔小偉;陳麗琴;周鈞;周莉;王淑珍;張晶;;沉默結締組織生長因子表達對肝星狀細胞增殖和凋亡的影響[J];山東醫(yī)藥;2016年10期

2 陸倫根;;肝纖維化基礎和臨床研究熱點問題[J];實用肝臟病雜志;2016年01期

3 Albert J Czaja;;Hepatic inflammation and progressive liver fibrosis in chronic liver disease[J];World Journal of Gastroenterology;2014年10期

4 ;Paclitaxel ameliorates fibrosis in hepatic stellate cells via inhibition of TGF-β/Smad activity[J];World Journal of Gastroenterology;2010年26期

5 ;Effect of Oxymatrine on the TGFbeta-Smad signaling pathway in rats with CCl_4-induced hepatic fibrosis[J];World Journal of Gastroenterology;2008年13期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李濤;牛麗娟;劉文宣;楊磊;李曼;曹丹丹;劉殿武;;KLF4基因沉默大鼠肝星狀細胞中Smad 2、3、7 mRNA及蛋白表達觀察[J];山東醫(yī)藥;2016年31期

2 田華捷;馮琴;胡義揚;;肝纖維化無創(chuàng)診斷的研究現(xiàn)狀[J];上海醫(yī)藥;2016年13期

3 陳宵瑜;楊長青;;肝纖維化發(fā)生機制研究新進展[J];實用肝臟病雜志;2016年01期

4 賴華梅;王萍;姜峰;鄧國孫;;1,25-二羥基維生素D3在肝星狀細胞中抗增殖及纖維化模型中抗纖維化作用研究[J];世界最新醫(yī)學信息文摘;2015年99期

5 劉俊平;秦燕;;肝纖維化治療的研究進展[J];醫(yī)學理論與實踐;2015年21期

6 周斐;;肝纖維化患者血清和血漿中Ⅲ型膠原蛋白檢測的價值比較[J];國際檢驗醫(yī)學雜志;2015年19期

7 程明亮;趙雪珂;穆茂;;食療:輔助逆轉肝纖維化的重要策略[J];中西醫(yī)結合肝病雜志;2015年04期

8 吳琴;高云;;氧化苦參堿藥理作用的分子機制研究進展[J];中國藥理學通報;2015年06期

9 Hussein M Atta;;Reversibility and heritability of liver fibrosis:Implications for research and therapy[J];World Journal of Gastroenterology;2015年17期

10 劉曉亞;劉瑞霞;崔立建;侯斐;文艷;陰峧宏;;膽管結扎和四氯化碳誘導Wistar大鼠肝纖維化模型的建立及相關指標的對比分析[J];臨床肝膽病雜志;2015年02期

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 Xing Wang;Shang-Xiong Lin;Jin Tao;Xiu-Qing Wei;Yuan-Ting Liu;Yu-Ming Chen;Bin Wu;;Study of liver cirrhosis over ten consecutive years in Southern China[J];World Journal of Gastroenterology;2014年37期

2 王曉霞;鄒正升;李保森;管群;孫穎;常彬霞;滕光菊;李進;;2002至2011年中國“北方”地區(qū)住院肝硬化患者病因構成及變化趨勢分析[J];實用肝臟病雜志;2014年02期

3 王小蓮;吳江鋒;馮罡;;酒精性肝纖維化發(fā)生機制的研究進展[J];重慶醫(yī)學;2013年04期

4 ;Effect of Oxymatrine on the TGFbeta-Smad signaling pathway in rats with CCl_4-induced hepatic fibrosis[J];World Journal of Gastroenterology;2008年13期

5 陶艷艷;崔紅燕;劉成海;;大鼠肝纖維化病理過程中Smads錨著蛋白表達變化[J];中華肝臟病雜志;2006年12期

6 汪明明,崔速南,李新立,楊公煒,張秀珍,杜文軍;結締組織生長因子在慢性乙型肝炎和肝硬化組織中的表達及意義[J];山東醫(yī)藥;2005年29期

7 李蘊銣,魏來;轉化生長因子β/Smad信號傳導機制及其與肝纖維化的關系[J];中華肝臟病雜志;2005年06期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳偉 ,付小兵 ,盛志勇;Review of current progress in the structure and function of Smad proteins[J];Chinese Medical Journal;2002年03期

2 王啟偉;Smad蛋白信號網(wǎng)絡[J];國外醫(yī)學(分子生物學分冊);2003年04期

3 張遠強,胡靜,劉新平,許若軍;EXPRESSION AND LOCALIZATION OF SMAD4 PROTEIN IN RAT TESTIS DURING THE POSTNATAL DEVELOPMENT[J];Chinese Medical Sciences Journal;2003年03期

4 徐新保,冷希圣,何振平,梁志清,林凱,魏玉華,于鑫,彭吉潤;Inhibitory effect of retroviral vector containing anti-sense Smad_4 gene on Ito cell line, LI90[J];Chinese Medical Journal;2004年08期

5 鄭啟新;王運濤;郭曉東;;Wild-type Smad3 Gene Enhances the Osteoblastic Differentiation of Rat Bone Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells in Vitro[J];華中科技大學學報(醫(yī)學英德文版);2005年06期

6 王運濤,鄭啟新,郭曉東,吳永超,郝杰;Influence of Exogenous TGFβ_1 on the Expression of Smad2 and Smad3 in Rat Bone Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells[J];華中科技大學學報(醫(yī)學英德文版);2005年01期

7 ;HSP70 decreases receptor-dependent phosphorylation of Smad2 and blocks TGF-β-induced epithelial-mesenchymal transition[J];遺傳學報;2011年03期

8 ;Berbamine inhibits proliferation and induces apoptosis of KU812 cells by increasing Smad3 activity[J];Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology);2011年07期

9 尚政軍;修復相關基因Smad3的研究進展[J];國外醫(yī)學(分子生物學分冊);2001年05期

10 楊曉 ,孫彥洵 ,周江 ,黃培堂 ,黃翠芬 ,徐曉玲 ,李翠玲 ,GotayJessica ,陳林 ,鄧初夏;Establishment of murine Smad5 double knockout ES cells and the studies on their properties[J];Science in China(Series C:Life Sciences);2001年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 霍艷英;李剛;胡迎春;周平坤;吳德昌;;THE SIGNIFICANCE OF SMAD7 IN TGF-β-MEDIATED SMADS AND ERK/MAPK SIGNAL PATHWAY IN RADIATION-INDUCED TUMORIGENIC HUMAN BRONCHIAL EPITHELIAL CELLS[A];海峽兩岸第三屆毒理學研討會論文摘要[C];2005年

2 張素平;張然;陳峰;張麗霞;陳曄光;;Smad7 antagonises TGF-β signaling in the nucleus[A];中國細胞生物學學會2005年學術大會、青年學術研討會論文摘要集[C];2005年

3 王劍;楊曉;;Gene expression profile in cardiomyocyte-specific Smad4 knock-out mice[A];中國遺傳學會第八次代表大會暨學術討論會論文摘要匯編（2004-2008）[C];2008年

4 劉昭廷;王強;孟安明;;基因組水平上受斑馬魚Smad2調控的靶基因[A];“細胞活動 生命活力”——中國細胞生物學學會全體會員代表大會暨第十二次學術大會論文摘要集[C];2011年

5 ;HSP70 decreases receptor-dependent phosphorylation of Smad2 and blocks TGF-β-induced epithelial-mesenchymal transition[A];“細胞活動 生命活力”——中國細胞生物學學會全體會員代表大會暨第十二次學術大會論文摘要集[C];2011年

6 ;Maternal Smad3 Deficiency Compromises Decidualization in Mice[A];“細胞活動 生命活力”——中國細胞生物學學會全體會員代表大會暨第十二次學術大會論文摘要集[C];2011年

7 Jingmin Zhao;Jia Wang;Jun Yu;;Inhibitory role of Smad7 in hepatocarcinogenesis in mice and in vitro[A];中華醫(yī)學會第十六次全國病毒性肝炎及肝病學術會議論文匯編[C];2013年

8 Bensoussan D.;Stoltz J.F.;de Isla N;;Differentiation of human bone marrow mesenchymal stem cells induced by biaxial tension involves Smad3 activation[A];中國生理學會第23屆全國會員代表大會暨生理學學術大會論文摘要文集[C];2010年

9 ;Function of TGF-β/Smad4 Signaling in the Maintenance of Tissue Homeostasis[A];中國的遺傳學研究——遺傳學進步推動中國西部經(jīng)濟與社會發(fā)展——2011年中國遺傳學會大會論文摘要匯編[C];2011年

10 楊曉;;Targeted disruption of Smad4 in mouse epidemis results in failure of hair follicle cycling and formation of skin tumors[A];中國遺傳學會七屆一次青年研討會暨上海高校模式生物E——研究院第一屆模式生物學術研討會論文匯編[C];2005年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 記者 李天舒;先天性心臟病病因被發(fā)現(xiàn)[N];健康報;2009年

2 通訊員 俞志新　記者 李水根;骨碎補總黃酮可以促進骨形成[N];健康報;2010年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 黎錦;氨氯地平通過調節(jié)Smad的表達防止腎臟纖維化[D];武漢大學;2014年

2 張俊文;TGF-β信號通路中兩個與TβRI相互作用蛋白的功能研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2012年

3 胡祥鵬;復方芪參提取物調控TGF-β/Smad信號及miR-145、miR-21表達發(fā)揮抗肝纖維化—肝細胞癌作用[D];安徽醫(yī)科大學;2015年

4 徐濤;NLRC5通過NF-κB與TGF-β1/Smad通路調控肝星狀細胞炎癥因子分泌和纖維化的功能及其機制研究[D];安徽醫(yī)科大學;2015年

5 徐洪杰;回轉條件下成骨細胞微絲對BMP2信號傳導的調控[D];西北工業(yè)大學;2015年

6 黃闖;FTY-720調節(jié)去勢大鼠骨髓間充質干細胞成骨分化Smad信號通路的機制研究[D];第四軍醫(yī)大學;2015年

7 王加紅;IL-6對TGF-β1/Smad3信號通路介導缺血心肌重構的影響及作用機制[D];山東大學;2015年

8 田彥;三步序貫法對激素依賴型哮喘患者及激素撤減過程中氣道重塑模型大鼠TGF-β_1/Smad信號通路的影響[D];北京中醫(yī)藥大學;2016年

9 計磊;突變體p53與生長轉化因子β信號在肺癌發(fā)生發(fā)展與轉移擴散中的作用[D];華東師范大學;2015年

10 牛立慢;TGF-β1/Smad3在四氯化碳誘導小鼠急性肝損傷中的表達及其作用研究[D];吉林大學;2016年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 林琳;SnoN蛋白在RPE細胞TGF-β/Smad信號通路中的作用[D];福建醫(yī)科大學;2015年

2 丁雪峰;芪藶強心提取物阻斷Smad3信號通路抑制血管緊張素Ⅱ誘導的心臟成纖維細胞轉分化的機制研究[D];川北醫(yī)學院;2015年

3 李祥亭;N-乙酰半胱氨酸對大鼠肺纖維化模型肺組織Smad家族基因表達的影響[D];遵義醫(yī)學院;2015年

4 李鑫靜;Smad4、Kindlin-2和Anxa2基因在胃癌組織中的表達及臨床病理意義[D];福建醫(yī)科大學;2015年

5 汪呈;靶向Smurf1 HECT結構域的小分子抑制劑的細胞學水平驗證[D];石河子大學;2015年

6 田茜華;補腎法、疏肝法對體外培養(yǎng)IVF-ET患者卵巢顆粒細胞中ACTA及其Smads信號通路的影響[D];河北醫(yī)科大學;2015年

7 李春杰;新生大鼠高氧性肺損傷肺組織中Smad3及PPAR-γ的蛋白和mRNA表達及羅格列酮的干預作用[D];蘇州大學;2015年

8 孫景英;CXCL9和Smad3的表達與新疆維吾爾族銀屑病發(fā)病關系的研究[D];石河子大學;2015年

9 黃海平;MiR-145通過靶向作用于Smad3抑制鼻咽癌的侵襲和轉移能力[D];蘇州大學;2015年

10 劉昌偉;Smad2通過抑制TGF-β1/Smad3介導的膠原合成在肝纖維化中起保護作用[D];安徽醫(yī)科大學;2015年

，

本文編號：669442